一种复合益生菌发酵蓝莓果汁粉的制备方法

1.一种复合益生菌发酵蓝莓果汁粉的制备方法，其特征是按下述方法制备：
1）益生菌的选择及培养基的制备
A菌——两歧双歧杆菌CICC6168（Bifidobacterium bifidum），培养基为：酪蛋白胨
10g，肉汤提取物5g，酵母提取物5g，大豆蛋白胨5g，葡萄糖10g，吐温80 1ml，K2HPO4 2g/L， MgSO4×7 H2O 0.2g/L， MnSO4 x H2O 0.05g/L，NaCl 5g，盐溶液 4ml，浓度为25mg/100ml刃天青4ml，蒸馏水950ml ，培养基煮至沸腾，添加半胱氨酸，调pH 至 6.8后，在CO2下冷却至37℃备用。 其中盐溶液配方为：CaCl2 × 2 H2O 0.25g/L， KH2PO4 1g/L，K2HPO4 1g/L，MgSO4×7 H2O 0.5g/L， NaHCO3 10g/L ，NaCl 2g/L。
B菌——副干酪乳杆菌CICC20246 (Lactobacillus paracasei) ，培养基为：酪蛋白胨
10.0g，牛肉膏 10.0g，酵母粉 5.0g，葡萄糖 5.0g，乙酸钠 5.0g，柠檬酸二胺 2.0g，Tween
80 1.0g，K2HPO4 2.0g，MgSO4.7H2O 0.2g，MnSO4.H2O 0.05g，CaCO3 20.0g，蒸馏水 1.0L，pH6.8，经121℃灭菌20分钟冷却至37℃备用。
C菌——鼠李糖乳杆菌CICC6142 (Lactobacillus rhamnosus) ，培养基为：酪蛋白胨
10.0g，牛肉膏 10.0g，酵母粉 5.0g，葡萄糖 5.0g，乙酸钠 5.0g，柠檬酸二胺 2.0g，Tween
80 1.0g，K2HPO4 2.0g，MgSO4.7H2O 0.2g，MnSO4.H2O 0.05g，CaCO3 20.0g，蒸馏水 1.0L，pH6.8，经121℃灭菌20分钟冷却至37℃备用。
2）原菌种活化
分别量取0.9%的生理盐水10ml于3只试管内，经121℃灭菌20分钟冷却至37℃，将3株益生菌安瓶内的冻干菌粉末在无菌状态下全部倒入0.9%的生理盐水中，震荡使其溶解，在37℃恒温箱中静止活化30分钟，备用。
3）母发酵剂的制备
分别量取3株益生菌培养基各100ml于3只250mL三角瓶内，121℃灭菌20分钟冷却至37℃，按培养基体积的10%接种步骤2）中已经活化的菌种，在37℃厌氧箱内静止培养24小时，作为母发酵剂。
4）生产发酵剂的制备
首先配制质量百分比浓度为10%的脱脂奶乳浊液，分装于3只500mL三角瓶内，每瓶
200mL，121℃灭菌20分钟冷却至37℃，分别按3%体积比例接种母发酵剂，37℃厌氧培养
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48——54小时，检测3株益生菌发酵液活菌数，各发酵液活菌数≥10 个/ml，视同为发酵
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成熟，如果活菌数＜10 个/ml，继续培养，直至达到10 个/ml。
5）粉末冻干菌种的制备
将成熟的生产发酵剂在无菌条件下导入玻璃安瓶中，液面高度0.8—1cm，加盖瓶塞后放入-30℃冰柜速冻，冻结后将玻璃安瓶用托盘盛装，放入冻干机进行冷冻干燥，制备粉末冻干菌种。
6）复合益生菌发酵剂冻干粉的制备
按各粉末冻干菌种重量，取A菌粉末3-4份，B菌粉末1-2份，C菌粉末2-3份，充分混匀后制成复合益生菌发酵剂冻干粉，用于发酵加糖蓝莓果汁，复合益生菌发酵剂冻干粉的添加量为加糖蓝莓果汁中固形物重量的0.03%。
7）益生菌发酵蓝莓果汁粉的制备
7.1）原料选择：选用新鲜蓝莓，剔除病烂、病虫果，用清水洗净。
7.2）制取果汁：用滚筒式或离心式破碎机将果实压破。
7.3）过滤：用板框过滤机过滤，收集清汁。
7.4）加糖：按蓝莓清汁重量的12%添加白砂糖，完全溶解后制成加糖蓝莓果汁。
7.5）灭菌：采用142℃3秒超高温瞬时灭菌机灭菌，冷却至37℃等待发酵。
7.6）复合益生菌发酵：按加糖蓝莓果汁中固形物重量的0.03%添加步骤2.4制备的复合益生菌发酵剂冻干粉，37℃厌氧发酵72小时。
7.7）冷冻干燥
将步骤7.6）发酵处理后的物料，打入冷冻干燥机进行冷冻干燥，获得益生菌发酵蓝莓果汁粉。

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