一种检测有机磷农药的免疫胶体金测试条及其制备方法

1.一种检测有机磷农药的免疫胶体金测试条及其制备方法，其特征在于：该测试条包括PVC背衬、样品垫，胶体金结合垫，检测线，质控线，硝酸纤维素膜，吸水垫，样品垫与胶体金结合垫有部分重叠，胶体金结合垫、吸水垫都与硝酸纤维膜有部分重叠；硝酸纤维素膜上依次喷涂有检测线和质控线；所述胶体金结合垫上包被有胶体金标记的有机磷农药通用抗体，检测线上喷涂有有机磷农药通用半抗原与载体蛋白的偶联物，质控线上喷涂有抗鼠或抗兔IgG抗体，所述有机磷农药通用半抗原分子为式1所示。
2.一种制备权利要求1所述检测有机磷农药免疫胶体金测试条的方法，其特征在于包括以下步骤：
1)制备有机磷农药-BSA载体蛋白偶联物：将有机磷农药与BSA载体蛋白按mol/mol1∶5～50比例混匀，形成稳定的颗粒，通过纯化形成有机磷农药-BSA偶联物；
2)制备抗有机磷农药特异性单克隆抗体或多克隆抗体：用有机磷农药-BSA偶联物多次免疫Balb/c纯系小鼠，取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞在体外融合形成杂交瘤细胞，经选择性培养基筛选得阳性杂交瘤细胞株；通过将阳性杂交瘤细胞注入小鼠腹腔获取腹水或以体外细胞培养收集培养上清液的方式，大量制备抗有机磷农药特异性单克隆抗体；将机磷农药-BSA偶联物多次免疫新西兰大白兔，静脉取血，纯化分离，获得针对有机磷农药的多克隆抗体；
3)制备胶体金：用柠檬酸三钠还原剂将氯金酸还原成20nm～40nm的胶体金颗粒；
4)制备单克隆抗体/多克隆抗体胶体金标记：将胶体金与抗有机磷农药特异性单克隆抗体/、多克隆抗体按ml/mg1∶0.001～0.02比例混匀，形成稳定的胶体颗粒，通过纯化、浓缩形成抗有机磷农药特异性单克隆抗体/多克隆抗体-胶体金标记物；
5)将抗有机磷农药特异性单克隆抗体/多克隆抗体-胶体金标记物包被在胶体金结合垫上；将有机磷农药-OVA偶联物包被在硝酸纤维素膜的检测线上；将抗羊或抗兔IgG包被在质控线上，并充分干燥；
6)将硝酸纤维素膜、胶体金结合垫、样品垫、吸水垫通过不干胶粘合剂依次粘合在PVC背衬上，切成条状，即制成检测有机磷农药的免疫胶体金测试条。

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