著录项信息
专利名称 | 有机磷农药多残留的免疫检测方法 |
申请号 | CN201110219714.8 | 申请日期 | 2011-08-02 |
法律状态 | 驳回 | 申报国家 | 中国 |
公开/公告日 | 2012-04-11 | 公开/公告号 | CN102411051A |
优先权 | 暂无 | 优先权号 | 暂无 |
主分类号 | G01N33/543 | IPC分类号 | G01N33/543;G01N33/52查看分类表>
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申请人 | 上海交通大学 | 申请人地址 | 上海市闵行区东川路8***
变更
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权利人 | 上海交通大学 | 当前权利人 | 上海交通大学 |
发明人 | 朱鸿林;沈国清;胡寅;姜官鑫 |
代理机构 | 上海汉声知识产权代理有限公司 | 代理人 | 郭国中 |
摘要
一种农药检测技术领域的有机磷农药多残留的免疫检测方法,包括如下步骤:合成有机磷通用半抗原,并与蛋白偶联制备免疫原与包被原;用免疫原进行动物免疫,得到有机磷农药通用抗体;合成Fe3O4磁性纳米粒子,并进行表面修饰;将表面修饰后的Fe3O4磁性纳米粒子与有机磷农药通用抗体偶联,形成免疫磁珠;在试纸条的底板上加上硝酸纤维素膜,将有机磷通用半抗原与蛋白偶联制备免疫原包被在膜上,封闭后成为检测部分,确定最佳包被、封闭条件以及免疫磁珠的用量;进行定性和半定量检测。本检测方法操作简便、灵敏、快速、不需要大型仪器,适合现场抽样检测以及大批量的检测任务。
1.一种有机磷农药多残留的免疫检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤一,设计及合成有机磷通用半抗原,并与蛋白偶联制备免疫原与包被原;
步骤二,用上述制备的免疫原进行动物免疫,得到有机磷农药通用抗体;
步骤三,通过化学方法合成Fe3O4磁性纳米粒子,并进行表面修饰;
步骤四,将表面修饰后的Fe3O4磁性纳米粒子与有机磷农药通用抗体偶联,形成免疫磁珠;
步骤五,在试纸条的底板上加上硝酸纤维素膜,将有机磷通用半抗原与蛋白偶联制备免疫原包被在膜上,封闭后成为检测部分,确定最佳包被、封闭条件以及免疫磁珠的用量;
步骤六,利用免疫磁珠以及第五步中装配的检测试纸条对样品进行检测,获得定性结果和定量结果。
2.根据权利要求1所述的有机磷农药多残留的免疫检测方法,其特征在于,步骤一中,所述有机磷通用半抗原分别与牛血清白蛋白和鸡卵清白蛋白偶联,得到免疫原与包被原。
3.根据权利要求1所述的有机磷农药多残留的免疫检测方法,其特征在于,步骤二中,所述动物为小白鼠或新西兰大白兔。
4.根据权利要求1所述的有机磷农药多残留的免疫检测方法,其特征在于,步骤三中,所述化学方法为共沉淀法,所述表面修饰为用3-氨丙基三乙氧基硅烷对Fe3O4磁性纳米粒子进行表面氨基硅烷化修饰。
5.根据权利要求1所述的有机磷农药多残留的免疫检测方法,其特征在于,步骤四中,所述形成免疫磁珠具体为:将表面修饰后的Fe3O4磁性纳米粒子分散在乙醇溶液中,用戊二醛法将其与制备得到的有机磷农药通用抗体偶联,磁分离,用PBS和超纯水分别洗涤3次,加入胶体金后,得到免疫磁珠。
引用专利(该专利引用了哪些专利)
序号 | 公开(公告)号 | 公开(公告)日 | 申请日 | 专利名称 | 申请人 |
1
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2005-03-23
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2004-09-07
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2
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2007-06-06
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2006-09-06
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3
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2009-05-27
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2008-12-25
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被引用专利(该专利被哪些专利引用)
序号 | 公开(公告)号 | 公开(公告)日 | 申请日 | 专利名称 | 申请人 | 1 | | 2013-06-25 | 2013-06-25 | | |
2 | | 2016-08-23 | 2016-08-23 | | |
3 | | 2015-05-21 | 2015-05-21 | | |
4 | | 2016-08-23 | 2016-08-23 | | |
5 | | 2012-07-11 | 2012-07-11 | | |
6 | | 2013-06-25 | 2013-06-25 | | |
7 | | 2015-05-21 | 2015-05-21 | | |