用于检测有机磷农药残留的免疫抗体及其应用

1、一种用于检测有机磷农药残留的免疫抗体，其特征在于，以二乙基 膦酸乙酸为半抗原，通过与牛血清蛋白(BSA)偶联制备免疫原，并通过免 疫新西兰大白兔制备成多克隆抗体或通过小鼠免疫、细胞融合、筛选及克 隆化培养等过程制备单克隆抗体。
2、根据权利要求1所述的用于检测有机磷农药残留的免疫抗体，其特 征在于：所述的人工免疫原采用活化酯法或水溶性碳二亚胺法制备。
3、根据权利要求2所述的用于检测有机磷农药残留的免疫抗体，其特 征在于：所述的采用活化酯法制备人工免疫原是这样实现的：取等摩尔量 的二乙基膦酸乙酸和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)，环二己基碳酰亚胺(DCC)， 用二氧六环将混合物溶解，室温下避光反应过夜，去除沉淀后取上清液干 燥，将残留物悬浮在3毫升溶有20mg牛血清蛋白(BSA)的硼酸盐缓冲液 中，混合物在室温下磁力搅拌1小时，4℃对1升pH7.4的磷酸盐缓冲液 (PBS)透析，制备成免疫原。
4、根据权利要求2所述的用于检测有机磷农药残留的免疫抗体，其特 征在于：所述的采用水溶性碳二亚胺法制备人工免疫原是这样实现的：先 称取二乙基膦酸乙酸溶于二甲基甲酰胺(DMF)中，低温搅拌，取水溶性碳 二亚胺(EDC)溶于1mlDMF中，缓慢加入到上述溶液中。另取牛血清蛋白 (BSA)20mg溶于2mlDMF中，4℃搅拌，缓慢加入到上述混合液中。4℃ 搅拌反应8h，再于14℃反应过夜，次日2000g离心10min，取沉淀，透析， 制备成免疫原。
5、根据权利要求1所述免疫抗体在检测中的应用，其特征在于，免疫 抗体可用于对有机磷类农药的残留进行检测。
6、根据权利要求5所述免疫抗体在检测中的应用，其特征在于，所述 的有机磷类农药包括毒死蜱、氧乐果、二嗪农、乙基对硫磷、丙溴磷、辛 硫磷、二乙基膦酸乙酸。
7、根据权利要求5或6所述免疫抗体在检测中的应用，其特征在于： 获得的单克隆抗体或多克隆抗体可用于常规的间接竞争性ELISA检测。
8、根据权利要求5或6所述免疫抗体在检测中的应用，其特征在于： 获得的单克隆抗体或多克隆抗体通过金、酶、荧光标记抗体后用于直接 ELISA检测。
9、根据权利要求5或6所述免疫抗体在检测中的应用，其特征在于： 获得的单克隆抗体或多克隆抗体制成免疫检测试纸后，对果蔬中有机磷农 药残留的检测。

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