用于兔子皮肤移植后免疫状态监测的试剂及其制备方法

1.用于兔子皮肤移植后免疫状态监测的试剂，该试剂是经CFSE染色的两种同品系的
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兔脾细胞的PBS悬液，两种兔脾细胞的总浓度为（5～7）×10 个/mL，二者的比例为1：1，其中，两种兔脾细胞分别来自经过异体皮肤移植后的供体和受体，染色后的阳性细胞比例≥95%，活细胞比例≥95%。
2.根据权利要求1所述的用于兔子皮肤移植后免疫状态监测的试剂，其特征在于：供体为雌性兔子。
3.根据权利要求1所述的用于兔子皮肤移植后免疫状态监测的试剂，其特征在于：受体为雄性兔子。
4.如权利要求1～3任一项所述的用于兔子皮肤移植后免疫状态监测的试剂的制备方法，包括如下步骤：
1) 取同品系的雌性兔子和雄性兔子分别为供体和受体，进行异体皮肤移植；
2) 异体皮肤移植后第10～13天切除供体和受体的脾脏，分别制成供体脾细胞的PBS悬液和受体脾细胞的PBS悬液；
3) 往供体脾细胞的PBS悬液中加入6μM CFSE，往受体脾细胞的PBS悬液中加入
0.24μM CFSE，然后在温度为37℃下孵育染色；
4) 染色后，将供体脾细胞和受体脾细胞用PBS洗涤后，按细胞数1∶1 的比例混合，
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用PBS调整细胞总浓度为（5～7）×10 个/mL，得用于兔子皮肤移植后免疫状态监测的试剂。
5.根据权利要求4所述的用于兔子皮肤移植后免疫状态监测的试剂的制备方法，其特征在于：雌性兔子为雌性大白兔。
6.根据权利要求4所述的用于兔子皮肤移植后免疫状态监测的试剂的制备方法，其特征在于：雄性兔子为雄性大白兔。
7.根据权利要求4所述的用于兔子皮肤移植后免疫状态监测的试剂的制备方法，其特征在于：孵育染色时间为15～20 min。

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