水稻人工miRNA基因干涉载体快速构建方法

发明专利无效专利

申请号：
CN200910153288.5
IPC分类号：C12N15/113;C12N15/10;C12N15/82;C12N15/64
申请日期：
2009-10-30
申请人：
浙江省农业科学院

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专利名称	水稻人工miRNA基因干涉载体快速构建方法
申请号	CN200910153288.5	申请日期	2009-10-30
法律状态	权利终止	申报国家	中国
公开/公告日	2010-05-19	公开/公告号	CN101709300A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/113 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/11 DNA或RNA片段；其修饰形成（不用于重组技术的DNA或RNA入C07H 21/00）〔5〕 C12N15/113 调节基因表达的非编码核酸，如反义寡核苷酸〔2010.01〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;1;1;3;;;C;1;2;N;1;5;/;1;0;;;C;1;2;N;1;5;/;8;2;;;C;1;2;N;1;5;/;6;4查看分类表>
申请人	浙江省农业科学院	申请人地址	浙江省杭州市石桥路198号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	浙江省农业科学院	当前权利人	浙江省农业科学院
发明人	王栩鸣;杨勇;余初浪;周洁;严成其;程晔;陈剑平
代理机构	杭州丰禾专利事务所有限公司	代理人	王从友

摘要

本发明涉及水稻人工miRNA基因干涉载体快速构建方法，尤其涉及水稻快速沉默载体改造用DNA序列和该DNA序列的合成方法以及采用该DNA序列用于建立高效的水稻人工miRNA基因干涉载体。本发明将沉默相关片段两端的不变区域事先放入转基因目标载体，再将核心沉默片段(wi-site)连入改造后的载体，直接完成载体构建。在首、尾片段选择时，分析了DNA序列，使得首尾片段相连后可获得一个AfeI酶切位点，转化大肠杆菌后，可大量制备该载体并用AfeI内切酶对其进行线性化，直接连接采用本专利方法合成的核心沉默片段，完成水稻沉默载体的构建。本发明扩展了目标载体上不变的DNA区间，从而简化了单个沉默载体构建的方法，加速了构建过程，提高了载体构建的效率。

序号	公开(公告)号	公开(公告)日	申请日	专利名称	申请人
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