航天用功能性全营养流食及其制备方法

暂无

航天用功能性全营养流食及其制备方法\n技术领域\n[0001] 本发明涉及一种改进营养性质的流食及其制备方法。\n背景技术\n[0002] 人在太空航天飞行期间，身处失重、辐射、噪音、狭小密闭空间等特因环境下，由于体液的重新分布导致脾胃功能下降，航天员会出现肌肉萎缩、骨钙丢失、肠道菌群紊乱、体重减轻、免疫力下降等现象。早期国外的航天流食考虑到在失重状态下可能出现咀嚼吞咽困难，特别制成牙膏状流食。现在舱外活动期间的能量补充仍以流食为主。现有技术中的这类流食只涉及到通常的七大营养素，包括蛋白质、脂肪、糖类、维生素、电解质、微量元素和水，它们对保证人体的生长发育，维持体温，补充物质消耗，增强机体抵抗力等有着极为重要的作用，但均未涉及调节脾胃功能、延缓肌肉萎缩和骨钙丢失、维持肠道菌群平衡、调节免疫功能等作用。\n发明内容\n[0003] 本发明要解决的技术问题是提供一种用于航天飞行食用的和病人食用的、具有调节脾胃功能、延缓肌肉萎缩和骨钙丢失、维持肠道菌群平衡、调节免疫功能的功能性全营养流食及其制备方法。\n[0004] 一种功能性全营养流食，每1L中包括下列组分：\n[0005] (1)\n[0006] (2)碳水化合物100～300g；\n[0007] (3)蛋白质30～80g；\n[0008] (4)脂类20～60g；\n[0009] (5)维生素：\n[0010] \n[0011] (6)微量矿物元素及电解质：\n[0012] \n[0013] (7)益生元1～3g：水苏糖和/或大豆低聚糖；\n[0014] (8)乳化稳定剂3-13g；\n[0015] 本发明功能性全营养流食，其中所述脂类包括质量比为12.5∶3.5∶1～\n18∶6.5∶1的茶叶籽油、中链脂肪酸甘油酯和卵磷脂。\n[0016] 本发明功能性全营养流食，其中所述蛋白质包括质量比为(8∶8∶3∶1)～(8∶8∶2∶2)的酪蛋白、大豆多肽、水解胶原蛋白和N-(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。\n[0017] 本发明功能性全营养流食，其中所述碳水化合物包括质量比为(3∶1)～(1∶3)的麦芽糊精和异麦芽酮糖。\n[0018] 本发明功能性全营养流食，其中所述乳化稳定剂由下列组分组成：\n[0019] 硬脂酰乳酸钠 1～4g 黄原胶 1～3g\n[0020] 柠檬酸单甘酯 1～6g\n[0021] 本发明功能性全营养流食，其中所述卵磷脂包括磷脂酰胆碱22～24％、磷脂酰乙醇胺20～24％、磷脂酰肌醇12～15％、磷脂酸4～7％、亚油酸26～36％、亚麻酸2～\n5％。\n[0022] 一种上述功能性全营养流食的制备方法，其包括以下步骤：按比例称取上述山药、党参、黄芪、山楂、炒麦芽、当归、甘草、阿胶、茯苓，混合均匀并超微粉碎后过200-500目筛，在2450MHz、1000～1500W的条件下微波熟化灭菌2～5min，加入维生素、微量矿物元素及电解质、乳化稳定剂、益生元、碳水化合物、蛋白质、脂类并充分混匀，得到粉剂，真空包装，便于保存和运输。\n[0023] 一种上述功能性全营养流食的制备方法，其中所述真空包装用下述步骤替代：用温度为50℃以上的纯净水将所得粉剂的质量补足至1L后加热至50～80℃，经胶体磨混合乳化10～30min，在压力为70-140MPa的条件下均质15～45min，灌装，121℃灭菌20分钟，得到流食。\n[0024] 本发明功能性全营养流食具有调节脾胃功能、延缓肌肉萎缩和骨钙丢失、维持肠道菌群平衡、调节免疫功能(详见实施例3和实施例4)。\n具体实施方式\n[0025] 当归：促进造血，显著促进血红蛋白和红血球的生成，抗氧化和抗自由基的形成，减少自由基对细胞膜的损伤，增强机体的免疫力，抗血栓形成。\n[0026] 党参：增强机体免疫力；抗疲劳；促进造血，调节胃肠道。\n[0027] 黄芪：增强机体免疫力；抗疲劳；促进机体新陈代谢；抗菌及抑制病毒。\n[0028] 山药：增强免疫功能，恢复胃肠道节率功能，抗氧化，促进伤口愈合。\n[0029] 麦芽：可促进淀粉水解。\n[0030] 阿胶：具有补血滋阴、润燥、止血之功效。\n[0031] 茯苓：健脾利湿。\n[0032] 山楂：可促进脂肪水解，所含的多种有机酸能提高蛋白酶的活性，有利于消化。\n[0033] 水苏糖：具有润肠通便，改善肠道微环境，增殖有益菌群，如双歧杆菌及乳杆菌等，调节肠道微生态平衡。\n[0034] 大豆低聚糖：大豆低聚糖是从大豆乳清废水中提出的可溶性寡糖的总称，其可以通便洁肠、促进肠道内双歧杆菌增殖、抑制肠内腐败物质的生成。\n[0035] 茶叶籽油：茶叶籽油是近年来出现的一种新的食用油，是从茶叶树开花后产生的种子中提取得到的，茶叶籽油中含有大量不饱和脂肪酸，具有更高的抗氧化性和更优的生理活性；除此之外，茶叶籽油还含有茶多酚、角鲨烯、维生素E等多种重要保健成分。本发明所用茶叶籽油为市购产品。\n[0036] 中链脂肪酸甘油酯：中链脂肪酸甘油酯具有消化吸收快、能量易于释放的优点，因而其特别适宜作为功能性流食原料。中链脂肪酸甘油酯有着与葡萄糖相媲美的快速消化特性，并且可以产生高于葡萄糖2倍的能量，非常适合激烈运动和高强体力劳动的营养补给，有助于疲劳恢复(中链脂肪酸甘油酯研究概况；《粮油加工与流食机械》，2005年第4期，\n13-14.)。本发明所述中链是指脂肪酸的碳链长为8-12的市购产品。\n[0037] 卵磷脂：卵磷脂属于一种混合物，是存在于动植物组织以及卵黄之中的一组黄褐色的油脂性物质，其构成成分包括磷酸、胆碱、脂肪酸、甘油、糖脂、甘油三酸酯以及磷脂。卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。1925年由德国公司首次自大豆中提取活性卵磷脂并投入市场。在国外的生产和应用已形成相当规模。70年代以来欧美等国就开始用此类保健品，在美国卵磷脂类保健品总销量仅次于复合维生素和维生素E而名列第三。本发明所述卵磷脂为市购产品。\n[0038] 酪蛋白：酪蛋白是乳中含量最高的蛋白质，是一种优质蛋白。本发明所用酪蛋白是质量分数90％以上的市购产品。\n[0039] 大豆多肽：大豆多肽是大豆蛋白质经蛋白酶作用，再经特殊处理而得到的蛋白质水解产物，其易消化吸收，具有调节人体生理机能的作用。本发明所用大豆多肽是质量分数\n90％以上的市购产品。\n[0040] 水解胶原蛋白：水解胶原蛋白是以动物胶原蛋白为原料经过净化提纯、酶解、过滤、浓缩、喷雾干燥等处理而制成的粉末状产品，其主要由分子量在500-20000Da之间的多肽组成，水解胶原蛋白在提高骨骼强度、抑制血压升高、保护胃粘膜、抗氧化等方面具有显著功效(水解胶原蛋白在保健流食和化妆品中的应用；《农业工程技术(农产品加工)》，\n2007年10期，17-20.)。本发明所用水解胶原蛋白是质量分数90％以上的市购产品。\n[0041] N-(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(本发明中称为丙谷二肽)：水溶性及热稳定性均比谷氨酰胺为佳，在体内降解出L-谷氨酰胺，在蛋白质、核酸合成中具有重要作用，能够促进创伤病人伤口愈合，是肠粘膜上皮细胞、肾小管上皮细胞和免疫活性细胞等细胞的能量来源。此外，谷氨酰胺具有维护肠黏膜屏障功能及减少细菌易位作用，与水苏糖协同，促进胃肠功能。本发明所用丙谷二肽是质量分数为90％以上的市购产品。\n[0042] 麦芽糊精：麦芽糊精是以各类淀粉作原料，经酶法水解，提纯干燥而成。本发明所用麦芽糊精是质量分数95％以上的市购产品。\n[0043] 异麦芽酮糖：异麦芽酮糖的甜度约为蔗糖的40％，具有持续缓慢释放能量、血糖反应平缓、延长饱腹感的特点。本发明所用异麦芽酮糖是质量分数94％以上的市购产品。\n[0044] 所用电解质和微量元素：\n[0045] \n 化学名称 分子式 分子量\n 柠檬酸钠 C6H5O7Na3·2H2O 294.10\n 柠檬酸钾 C6H5O7K3·H2O 324.41\n 氯化钠 NaCl 58.44\n 磷酸钙 Ca3(PO4)2 310\n 氯化钾 KCl 74.55\n 硫酸镁 MgSO4·7H2O 246.47\n 硫酸亚铁 FeSO4·7H2O 278.03\n 葡萄糖酸锌 C12H22O14Zn 455\n 葡萄糖酸铜 Cu(C6H11O7)2 453.84\n 葡萄糖酸锰 C12H22MnO14·2H2O 481.27\n 碘化钾 KI 166.00\n 氯化铬 CrCl3·6H2O 266.49\n 钼酸钠 Na2MOO4·2H2O 241.95\n 氟化钠 NaF 41.99\n 亚硒酸钠 Na2SeO3 172.94\n[0046] 实施例1(航天用)\n[0047] \n 名称 用量(/kg) 名称 用量(/kg)\n 山药 2g 炒麦芽 4g\n 党参 4g 甘草 3g\n 当归 3g 茯苓 2g\n 阿胶 3g 卵磷脂 2g\n 黄芪 2g 水苏糖或大豆低聚糖 2g\n 山楂 4g 麦芽糊精 150g\n 异麦芽酮糖 50g 酪蛋白 25.68g\n 大豆多肽 25.68g 水解胶原蛋白 9.63g\n 茶叶籽油 36g 中链脂肪酸甘油酯 13g\n 柠檬酸钠 2156mg 视黄醇 1mg\n 柠檬酸钾 2122mg 维生素D3 5μg\n 氯化钠 1236mg 维生素E 50mg\n 磷酸钙 1850mg 维生素K1 40μg\n 氯化钾 525mg 硫胺素(维生素B1) 2mg\n 硫酸镁 878mg 核黄素(维生素B2) 2mg\n 硫酸亚铁 14mg 泛酸钙 3mg\n 葡萄糖酸锌 56mg 烟酰胺 15mg\n 葡萄糖酸铜 7mg 吡哆醇(维生素B6) 2mg\n 葡萄糖酸锰 16mg 钴胺素(维生素B12) 1μg\n 碘化钾 98μg 维生素H(生物素) 15μg\n 氯化铬 94μg 叶酸 200μg\n 钼酸钠 64μg 维生素C 50mg\n 氟化钠 2mg 氯化胆碱 266mg\n 亚硒酸钠 38μg 丙谷二肽 3.21g\n 黄原胶 1.0g 硬脂酰乳酸钠 1.5g\n 柠檬酸单甘酯 2.5g 纯净水 用纯净水补充至1L\n[0048] 称取上述山药、党参、黄芪、山楂、炒麦芽、当归、甘草、阿胶、茯苓，混合均匀并经超微粉碎后过200-500目筛，在2450MHz、1500W的条件下微波熟化灭菌2min，加入维生素、微量矿物元素及电解质、乳化稳定剂、益生元、碳水化合物、蛋白质、脂类并充分混匀，用温度为60℃的纯净水将所得混合物的质量补足至1L后加热至80℃，经胶体磨混合乳化30min，在压力为140MPa的条件下均质15min，灌装，121℃灭菌20分钟。本复方参考航天员膳食供给量标准，为即用型混悬液，方便使用，能量密度约在1.5kCal/g左右，较少的进食量即可满足航天员所有营养需求。\n[0049] 实施例2(病人用)\n[0050] \n 名称 用量(/kg) 名称 用量(/kg)\n 山药 3g 炒麦芽 3g\n 党参 2g 甘草 2g\n 当归 2g 茯苓 4g\n 阿胶 2g 卵磷脂 2g\n 黄芪 4g 水苏糖或大豆低聚糖 1g\n 山楂 3g 麦芽糊精 34.5g\n 异麦芽酮糖 103.5g 酪蛋白 16.8g\n 大豆多肽 16.8g 水解胶原蛋白 4.2g\n 茶叶籽油 25g 中链脂肪酸甘油酯 7g\n 柠檬酸钠 1034mg 视黄醇 0.4mg\n 柠檬酸钾 1829mg 维生素D3 5μg\n 氯化钠 1154mg 维生素E 7mg\n 磷酸钙 1779mg 维生素K1 60μg\n 氯化钾 630mg 硫胺素(维生素B1) 1mg\n 硫酸镁 878mg 核黄素(维生素B2) 1mg\n 硫酸亚铁 22mg 泛酸钙 3mg\n 葡萄糖酸锌 56mg 烟酰胺 7mg\n 葡萄糖酸铜 7mg 吡哆醇(维生素B6) 1mg\n 葡萄糖酸锰 16mg 钴胺素(维生素B12) 1μg\n 碘化钾 98μg 维生素H(生物素) 15μg\n 氯化铬 94μg 叶酸 200μg\n 钼酸钠 64μg 维生素C 50mg\n 氟化钠 2mg 氯化胆碱 346mg\n 亚硒酸钠 38μg 丙谷二肽 4.2g\n 黄原胶 1.5g 硬脂酰乳酸钠 1g\n 柠檬酸单甘酯 2g 纯净水 用纯净水补充\n至1L\n[0051] 称取上述山药、党参、黄芪、山楂、炒麦芽、当归、甘草、阿胶、茯苓，混合均匀并粉碎后过200-500目筛，在2450MHz、1000W的条件下微波熟化灭菌5min，加入维生素、微量矿物元素及电解质、乳化稳定剂、益生元、碳水化合物、蛋白质、脂类并充分混匀，用温度为50℃的纯净水将所得混合物的质量补足至1L后加热至60℃，经胶体磨混合乳化10min，在压力为70MPa的条件下均质45min，灌装，121℃灭菌20分钟。本复方参考中国居民膳食营养摄入量标准，适用于凡具有营养支持指征、胃肠道功能存在并可利用的病人。如：吞咽和咀嚼困难；意识障碍或昏迷、无进食能力者；消化道疾病稳定期，如消化道瘘、短肠综合征、炎性肠疾病和胰腺炎等；高分解代谢，如严重感染、手术、创伤及大面积灼伤病人；慢性消耗性疾病，如结核、肿瘤等。本复方能量密度为1kCal/g左右，为即用型混悬液，方便使用。\n[0052] 实施例3\n[0053] 1、实验材料\n[0054] 实验动物：健康SD雄性大鼠40只，体重140～150g/只，由北京维通利华实验动物有限公司提供。在无特定病原体(Specific pathogen Free，SPF)级实验室适应性饲养\n1周后按体重随机分为4组，每组10只。\n[0055] 实验药物：能全力(市购)；功能性全营养流食(实施例1中制备)。\n[0056] 2、模拟失重模型的建立\n[0057] 采用国际通用的实验动物模型(尾吊法)：大鼠尾部悬吊，后肢离地，大鼠前肢着地，使躯干与地面成25～30°角。\n[0058] 3、实验分组及给药\n[0059] 在SPF级动物房饲养，分组情况如下：\n[0060] I：地面对照组：正常饲养，饲喂常规饲料；\n[0061] II：模型组：尾部悬吊，饲喂常规饲料；\n[0062] III：能全力组：尾部悬吊，阳性对照；灌胃能全力，每天6次，用量为200kcal/kg体重；\n[0063] IV：功能性全营养流食组：尾部悬吊；灌胃实施例1中所得功能性全营养流食，每天6次，每天用量为200kcal/kg。\n[0064] 实验进行4周后，称大鼠体重，以10％水合氯醛350mg/kg体重将大鼠麻醉，处死取材。\n[0065] 4、检测指标与方法\n[0066] A)肠道功能测试指标及方法\n[0067] 每组采集10只大鼠新鲜粪便，采样节点为实验第-1(即尾吊前1天，记为B1)、\n5(指尾吊第一个天，记为D5，下同)、15(记为D15)、25(记为D25)天，利用活菌平板计数法检测新鲜粪便中双歧杆菌、乳杆菌、类杆菌、肠杆菌、肠球菌的数量，结果取对数Lg(cfu/g鲜便)。\n[0068] B)免疫功能测试指标及方法\n[0069] (1)免疫器官重量的测定\n[0070] 摘取胸腺、脾脏，吸干血迹称其湿重。计算胸腺(脾脏)指数。胸腺(脾脏)指数＝胸腺(脾脏)质量(g)/体重(g)。\n[0071] (2)采用流式细胞仪测定外周血T细胞表型CD4+、CD8+含量。\n[0072] (3)血清IL-4，TNF-α及IgG，IgM的测定分别采用ELISA法及比浊法。\n[0073] C)骨丢失防护功能测试指标及方法\n[0074] 大鼠腹部主动脉取血，迅速置于低温离心机5000r/min离心10min，取上层血清，待测。腹主动脉取血后，迅速剪开前后肢皮肤，剥离肌肉，取出股骨及胫骨，剔净附着的其他组织，置于-20℃冰箱冷藏过夜。观察指标与方法：\n[0075] (1)血清中Ca、P及血清骨钙素含量测定按照试剂盒(南京建成)说明书进行。\n[0076] (2)股骨、胫骨骨密度(BMD)的测定应用双能X线骨密度仪扫描。\n[0077] (3)胫骨及肱骨生物力学测定指标：最大应力(N)、最大桡度(mm)、弹性应力(N)、弹性桡度(mm)用QTS25型质构仪测定。\n[0078] 5、统计学方法：采用t检验方法，以p＜0.05为差异显著。\n[0079] 6、实验结果\n[0080] A)功能性全营养流食对模拟失重条件下大鼠肠道菌群的影响\n[0081] 肠道内正常菌群能参与碳水化合物和蛋白质的代谢，降解胆固醇形成胆汁酸，合成多种维生素，并有免疫促进等作用。正常情况下由正常菌群、宿主和外环境构成的生态系统是相互平衡的。肠道菌群的变化在一定程度上能直接反应机体的胃肠功能。功能性全营养流食对模拟失重条件下大鼠肠道菌群的影响实验结果见表1～5。\n[0082] 表1 各组大便样品中乳杆菌数目Lg(cfu/g鲜便，n＝10， )\n[0083] \n[0084] 注：*表示与地面对照组相比差异显著；#表示与功能性全营养流食组相比差异显著\n[0085] 表2 各组大便样品中双歧杆菌数目Lg(cfu/g鲜便，n＝10， )\n[0086] \n \n[0087] 注：*表示与地面对照组相比差异显著；#表示与功能性全营养流食组相比差异显著\n[0088] 表3 各组大便样品中大肠杆菌数目Lg(cfu/g鲜便，n＝10， )\n[0089] \n[0090] 表4 各组大便样品中类杆菌数目Lg(cfu/g鲜便，n＝10， )\n[0091] \n[0092] 注：*表示模型组与地面对照相比差异显著；#表示与功能性全营养流食组相比差异显著\n[0093] 表5 各组大便样品中肠球菌数目Lg(cfu/g鲜便，n＝10， )\n[0094] \n \n[0095] 注：*表示模型组与地面对照组相比差异显著；#表示与功能性全营养流食组相比差异显著\n[0096] 由表1～5可见，与地面对照组相比，模型组益生菌包括乳杆菌及双歧杆菌数量显著降低，常驻菌类杆菌数量显著降低，说明尾吊大鼠肠道菌群已发生紊乱，表明模拟失重(尾吊)致大鼠肠道菌群失调模型造模成功。第15天和第25天取样时，功能性全营养流食组的乳杆菌、双歧杆菌显著高于模型组及能全力组，与对照组差异不显著，表明功能性全营养流食对模拟失重条件下大鼠肠道菌群紊乱具有防护作用。\n[0097] B)功能性全营养流食对模拟失重条件下大鼠免疫功能的影响\n[0098] (1)不同组别的大鼠脾脏及胸腺指数见表6。\n[0099] 表6 不同组别大鼠脾脏及胸腺指数(n＝10， )\n[0100] \n[0101] 注：*表示模型组与地面对照组相比差异显著；#表示与功能性全营养流食组相比差异显著\n[0102] 脾脏及胸腺是各类免疫细胞居住的场所，也是对抗原物质产生免疫应答及产生免疫效应物质(如抗体等)的重要基地。由表6可见，模型组脾脏指数及胸腺指数与地面对照组相比差异极显著降低，表明尾吊模拟失重致免疫抑制模型已经建立。\n[0103] 功能性全营养流食组的脾脏指数及胸腺指数与地面对照组接近，显著高于模型组，脾脏指数显著高于能全力组。\n[0104] (2)不同组别大鼠血清IgG，IgM，TNF-α，IL-4检测结果见表7。\n[0105] 表7血清IL-4、TNF-α、IgG、IgM检测结果(n＝10， )\n[0106] \n[0107] 注：*表示模型组与地面对照组相比差异显著；#表示与功能性全营养流食组相比差异显著\n[0108] 由表7可见，模型组与地面对照组相比，IgG，IgM，IL-4各指标均显著降低，表明免疫抑制模型建立。功能性全营养流食组的IL-4，TNF-α，IgG，IgM水平与地面对照组接近，IL-4，IgG，IgM水平显著高于模型组及能全力组。\n[0109] (3)不同组别大鼠外周血流式细胞检测结果见表8。\n[0110] 表8 外周血T细胞表型流式细胞检测结果(n＝10， )\n[0111] \n[0112] 注：*表示模型组与地面对照组相比差异显著；#表示与功能性全营养流食组相比差异显著\n[0113] 由表8可见，模型组与地面对照组相比，CD8+、CD4+、CD4+/CD8+指标均降低，其中CD4+及CD4+/CD8+降低有显著性，说明免疫抑制模型建立。功能性全营养流食组CD4+及CD4+/CD8+比值显著高于模型组及能全力组。\n[0114] C)功能性全营养流食对模拟失重条件下大鼠骨丢失防护功能\n[0115] 为验证功能性全营养流食对模拟失重条件下大鼠骨丢失防护功能，主要从血清学、骨密度及骨生物力学方面进行了分析。检测结果见表9。\n[0116] 表9 不同组别大鼠血清学指标检测结果(n＝10， )\n[0117] \n[0118] 注：*表示模型组与地面对照组相比差异显著；#表示与功能性全营养流食组相比差异显著\n[0119] 由表9可见，模型组与地面对照组相比，血清钙、血清骨钙素及血清磷均降低，其中，血清钙及血清骨钙素显著降低，说明模拟失重造成骨钙丢失模型成立。功能性全营养流食组血清钙及血清骨钙素显著高于模型组及能全力组，血清磷水平差异不显著。\n[0120] 表10 不同组别大鼠骨密度检测结果(n＝10， )\n[0121] \n[0122] 注：*表示模型组与地面对照相比差异显著；#表示与功能性全营养流食组相比差异显著\n[0123] 由表10可见，模型组与对照组相比，胫骨端、股骨端、股骨近端及股骨远端骨密度均显著降低。功能性全营养流食组的胫骨端、股骨端、股骨近端及股骨远端骨密度与对照组接近，显著高于模型组及能全力组。\n[0124] 表11 不同组别大鼠骨生物力学指标检测结果(n＝10， )\n[0125] \n[0126] 注：*表示模型组与地面对照组相比差异显著；#表示与功能性全营养流食组相比差异显著\n[0127] 由表11可见，模型组与对照组相比，最大应力、最大挠度、弹性应力及弹性挠度均显著降低。功能性全营养流食组的最大应力、最大挠度、弹性应力及弹性挠度与对照组接近，显著高于模型组及能全力组。\n[0128] 6、实验结论\n[0129] 综上，研究结果表明，本功能性航天全营养流食具有防止模拟失重(尾吊)致大鼠肠道菌群失调、调节免疫功能、增强骨密度延缓骨丢失的功能。说明本流食用于航天具有其独特的功能和优势。\n[0130] 实施例4\n[0131] 1、实验材料\n[0132] 实验动物：健康SD雄性大鼠40只，体重140～150g/只，由北京维通利华实验动物有限公司提供。在无特定病原体(Specific pathogen Free，SPF)级实验室适应性饲养\n1周后按体重随机分为4组，每组10只。\n[0133] 实验药物：能全力(市购)；功能性全营养流食(实施例2中制得)。\n[0134] 2、创伤模型的建立\n[0135] 大鼠用3％戊巴比妥钠按40mg/kg腹腔注射麻醉后，于背部制造直径大约3cm的圆形全层皮肤开放创面，止血后创面处覆盖无菌纱布，边缘缝合固定。单笼饲养，防止互相抓伤。\n[0136] 3、实验分组及给药\n[0137] 在SPF级动物房饲养，分组情况如下：\n[0138] I：正常对照组：正常饲养，饲喂常规饲料；\n[0139] II：创伤模型组：建立创伤模型，饲喂常规饲料；\n[0140] III：能全力组：建立创伤模型，阳性对照，能全力组灌胃能全力，每天6次，每天用量为200kcal/kg·d；\n[0141] IV：功能性全营养流食组：建立创伤模型，功能性全营养流食组灌胃实施例1中所得功能性全营养流食，每天6次，每天用量为200kcal/kg。\n[0142] 实验进行15天后，称大鼠体重，以10％水合氯醛350mg/kg体重将大鼠麻醉，处死取材。\n[0143] 4、指标与方法\n[0144] A)功能性全营养流食对创伤大鼠肠道功能的影响测试指标及方法\n[0145] 每组固定采集10只大鼠新鲜粪便，采样节点为第-1(记为B1)、6(记为D6)、12(记为D12)天，利用活菌平板计数法检测便样中双歧杆菌、乳杆菌、类杆菌、肠杆菌、肠球菌的数量，结果取Lg(cfu/g鲜便)。\n[0146] B)功能性全营养流食对创伤大鼠创伤恢复测试指标及方法\n[0147] 造模后第5(记为D5)、10(记为D10)、15(记为D15)天用硫酸纸片在创面上描记创缘，沿边缘剪下，用分析天平称重，与初始创面大小的纸片重量比较，计算创面愈合率。\n创面愈合率＝(初始创面面积纸片重量-现创面面积纸片重量)/初始创面面积纸片重量×100％。\n[0148] 试验结束时，取大鼠双后肢肌肉，加入冰生理盐水，制备匀浆，4℃，4000r/min离心\n10min，取上清液检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性。检测按试剂盒说明书(南京建成生物工程研究所)进行。\n[0149] C)功能性全营养流食对创伤大鼠免疫功能的影响测试指标及方法：\n[0150] 同实施例4中免疫功能测试指标及方法。\n[0151] 5、统计学方法：采用t检验方法，以p＜0.05为差异显著。\n[0152] 6、实验结果\n[0153] A)功能性全营养流食对创伤大鼠肠道功能的影响\n[0154] 肠道内正常菌群能参与碳水化合物和蛋白质的代谢，降解胆固醇形成胆汁酸，合成多种维生素，并有免疫促进等作用。正常情况下由正常菌群、宿主和外环境构成的生态系统是相互平衡的。肠道菌群的变化在一定程度上能直接反应机体的胃肠功能。实验各组大鼠肠道菌群的变化结果见表1～5。\n[0155] 表1 各组大便样品中乳杆菌数目Lg(cfu/g鲜便，n＝10， )\n[0156] \n[0157] 注：*表示创伤模型组与正常对照组相比差异显著；#表示与功能性全营养流食组相比差异显著\n[0158] 表2 各组大便样品中双歧杆菌数目Lg(cfu/g鲜便，n＝10， )\n[0159] \n[0160] 注：*表示创伤模型组与正常对照组相比差异显著；#表示与功能性全营养流食组相比差异显著\n[0161] 表3 各组大便样品中肠杆菌数目Lg(cfu/g鲜便，n＝10， )\n[0162] \n \n[0163] 表4 各组大便样品中类杆菌数目Lg(cfu/g鲜便，n＝10， )\n[0164] \n[0165] 注：*表示创伤模型组与正常对照组相比差异显著；#表示与功能性全营养流食组相比差异显著\n[0166] 表5 各组大便样品中肠球菌数目Lg(cfu/g鲜便，n＝10， )\n[0167] \n[0168] 由表1～5可见，与正常对照组相比，创伤模型组益生菌包括乳杆菌及双歧杆菌数量显著降低，常驻菌类杆菌数量显著降低，表明创伤致大鼠肠道菌群发生紊乱。实验进行第\n12天(D12)时，功能性全营养流食组乳杆菌、双歧杆菌显著高于创伤模型组及能全力组，与对照组差异不显著，表明功能性全营养流食对创伤致大鼠肠道菌群紊乱具有防护作用。\n[0169] B)功能性全营养流食对大鼠创伤恢复的作用\n[0170] (1)各组大鼠创伤大鼠创面愈合率测试结果见表6。\n[0171] 表6 创伤大鼠创面愈合率测试结果((n＝10， )\n[0172] \n[0173] 注：#表示与功能性全营养流食组相比差异显著\n[0174] 由表6可见，在各测试时间点，功能性全营养流食组大鼠创面愈合率均显著高于创伤模型组及能全力组。\n[0175] (2)各组大鼠血清主要抗氧化酶水平见表7。\n[0176] 表7 大鼠血清SOD和GSH-PX检测结果(U/ml，n＝10， )\n[0177] \n[0178] 注：*表示创伤模型组与正常对照组相比差异显著；#表示与功能性全营养流食组相比差异显著\n[0179] 从表7看出，与正常对照组相比，创伤模型组大鼠血清SOD、GSH-Px活力水平显著降低；与创伤模型组及能全力组相比，功能性全营养流食组大鼠血清SOD、GSH-Px活力水平均显著增加，SOD、GSH-Px是机体酶抗氧化防御系统中的重要成员，创伤模型组大鼠SOD、GSH-Px活力水平与对照组相比显著降低，表明创伤导致了大鼠体内氧化应激。而功能性全营养流食组大鼠的SOD和GSH-Px活力水平均明显升高，说明灌胃功能性全营养流食可以提升机体SOD和GSH-Px的活力，从而提高创伤大鼠机体的抗氧化能力，延缓或减轻由氧化应激所导致的肌肉损伤，有助于加速伤口愈合。\n[0180] C)功能性全营养流食对创伤大鼠免疫功能的影响\n[0181] (1)各组大鼠脾脏及胸腺指数见表8。\n[0182] 表8 各组大鼠脾脏及胸腺指数(n＝10， )\n[0183] \n \n[0184] 注：*表示创伤模型组与正常对照组相比差异显著；#表示与功能性全营养流食组相比差异显著\n[0185] 由表8可见，创伤模型组脾脏指数及胸腺指数与正常对照组相比差异极显著降低，说明创伤导致免疫抑制。\n[0186] 功能性全营养流食组的脾脏指数及胸腺指数与正常对照组接近，显著高于模型组及能全力组。\n[0187] (2)血清IgG、IgM、TNF-α、IL-4检测结果见表9。\n[0188] 表9 血清IgG、IgM、TNF-α、IL-4检测结果(n＝10， )\n[0189] \n[0190] 注：*表示创伤模型组与正常对照组相比差异显著；#表示与功能性全营养流食组相比差异显著\n[0191] 由表9可见，创伤模型组与正常对照组相比，IL-4，TNF-α，IgG，IgM各指标均显著降低，说明创伤导致免疫抑制。\n[0192] 功能性全营养流食组的IL-4，TNF-α，IgG，IgM水平与正常对照组接近，IgG，IgM水平显著高于创伤模型组及能全力组。\n[0193] (3)流式细胞检测结果见下表10。\n[0194] 表10 流式细胞检测结果(n＝10， )\n[0195] \n \n[0196] 注：*表示创伤模型组与正常对照组相比差异显著；#表示与功能性全营养流食组相比差异显著\n[0197] 由表10可见，创伤模型组与正常对照组相比，CD4+、CD8+、CD4+/CD8+指标均降低，其中CD4+及CD4+/CD8+降低有显著性，说明创伤导致免疫抑制。\n[0198] 功能性全营养流食组的CD8+及CD4+所占比例与正常对照组接近，CD4+/CD8+比值显著高于模型组及能全力组。\n[0199] 6、实验结论\n[0200] 功能性全营养流食病人用配方，能够调控炎症细胞和生长因子，促进创面愈合；通过调整肠道菌群有利于防治创伤应激所致的细菌移位感染，调节机体的免疫功能，有利于营养物质及药物的吸收转化，特别是术后早期施行肠内营养，可以恢复消化道的完整性，促进机体的康复。\n[0201] 综上，病人用功能性全营养流食具有调节肠道菌群平衡及调节免疫的功能，能够促进肌肉生长，加速创伤愈合的作用。