一种利用复合微生物发酵秸秆生产青储饲料的方法

1.一种混合微生物生产青储饲料的方法，混合微生物由植物乳杆菌、干酪乳杆菌、产朊假丝酵母和酿酒酵母组成；混合微生物的比例为：植物乳杆菌∶干酪乳杆菌∶产朊假丝酵母∶酿酒酵母为1∶(0.5-2)∶(0.5-2)∶(0.5-2)，以菌体湿重记；包括如下步骤：(1)原料准备；(2)菌种活化：(3)接种装料：原料分层堆积，堆积20～30cm厚时，喷洒一遍菌液，堆积总高不应超过2米；(4)好氧培养：空气中放置5～30天，春、秋两季应适当延长时间为20～30天；夏天放置5～10天；(5)厌氧培养：用塑料薄膜密封，20～90天后可以供牲畜食用。
2.如权利要求1所述的混合微生物生产青储饲料的方法，其特征在于混合微生物的比例为：植物乳杆菌∶干酪乳杆菌∶产朊假丝酵母∶酿酒酵母为1∶0.5∶0.5∶0.5。

一种利用复合微生物发酵秸秆生产青储饲料的方法\n技术领域\n[0001] 本发明属于微生物饲料添加剂领域中的菌种及其混合菌发酵剂，本发明还涉及利用这种混合菌发酵剂生产青储饲料的方法。\n背景技术：\n[0002] 我国的秸秆资源十分丰富，年产量可达到5.79亿吨。其中，玉米、小麦、和稻草秸秆三大作物秸秆产量达到了4.39亿吨，占整个秸秆产量的75.88％。目前，随着畜牧业的快速发展，加剧了畜牧业对粮食的依赖性，但秸秆用作饲料数量较少，即使用作饲料也因加工利用不当，使得秸秆的利用率及饲料报酬率低。农作物秸秆营养价值低、适口性差、消化率低。如果对其进行合理的加工调剂，可用于饲喂家畜。据报道，秸秆经青贮、氨化等方法调治后，每6kg青贮秸秆或4kg氨化秸秆相当于1kg玉米饲料的营养价值。因此，采用科学的方法对秸秆进行加工调剂，广泛用于畜牧业，具有良好的生态效益社会效益和经济效益。\n[0003] 近年来在我国推广的氨化饲料，不仅成本高、能耗高，并且存在与农业争肥、污染环境，有些方法对于牲畜还有毒副作用。而饲料清楚技术的研究与应用已有上百年的历史，目前关键的技术在于微生物优良菌株的选育、复合菌种的有效复配和发酵工艺的优化。\n[0004] 在这些方面，国内外学者均进行了大量的研究工作，但对于综合解决清楚饲料发酵过程中抑制腐败菌、防治二次发酵，有效控制有机酸和降解木质纤维素，降低成本，便于使用等方面仍然存在问题。\n发明内容：\n[0005] 针对目前存在的问题，本发明的目的在于提供一种青储饲料用微生物发酵剂及用其生产青储饲料的方法。\n[0006] 本发明产品的技术方案如下：\n[0007] 1.混合菌发酵剂的制备\n[0008] 1)植物乳杆菌和干酪乳杆菌的制备工艺为：\n[0009] 斜面培养基(g/L)：20葡萄糖，5酵母粉，10大豆蛋白胨，10牛肉膏，5NaCl，10乙酸钠，2柠檬酸铵，0.2MgSO4·7H2O，0.05MnSO4·7H2O，15琼脂，pH 6.5。\n[0010] 发酵培养基(g/L)：40葡萄糖，10酵母粉，10大豆蛋白胨，无机盐(0.01NaCl，0.5乙酸钠，0.2柠檬酸铵，0.2KH2PO4，0.2MgSO4·7H2O，0.05MnSO4·7H2O)，pH 6.5。\n[0011] 发酵方法：在斜面上取1环接种到500mL摇瓶中，装液量为150mL，在37℃下，\n150rpm培养24h至对数期。5000rpm离心10min收集菌体。\n[0012] 2)产朊假丝酵母、酿酒酵母的制备工艺：\n[0013] 斜面培养基：10～12°Brix麦芽汁，15g/L琼脂，pH自然。\n[0014] 发酵培养基：10～12°Brix麦芽汁，pH自然。\n[0015] 发酵方法：在斜面上取1环接种到500mL摇瓶中，装液量为150mL，在个不同菌的最适温度下，150rpm培养至对数期。5000rpm离心10min收集菌体。\n[0016] 3)混合菌发酵剂的制备\n[0017] 将发酵制的植物乳杆菌、干酪乳杆菌、产朊假丝酵母和酿酒酵母以质量比例为\n1∶(0.5-2)∶(0.5-2)∶(0.5-2)混合，以湿重计。\n[0018] 2.微生物青储混合菌发酵剂制作青储饲料的工艺：\n[0019] 1)原料准备：精选无腐烂的稻草、玉米秆及豆科类杆原料或其混合物，铡至2～\n5cm长。\n[0020] 2)菌种活化：将100g混合微生物菌剂倒入1～2°Brix麦芽汁中，混合均匀，\n25℃～35℃下经2～3小时即活化好。原料(稻草、玉米秆及豆科类杆原料或其混合物)的水含量应控制在70％～80％，如含水量较低，则补入相应的水。补入方式为：在制备混合菌液时加入。\n[0021] 3)接种装料：原料分层堆积，堆积20～30cm厚时，喷洒一遍菌液。堆积总高不应超过2米。\n[0022] 4)好氧培养：空气中放置5～30天，春、秋两季应适当延长时间为20～30天；夏天放置5～10天。\n[0023] 5)厌氧培养：用塑料薄膜密封，20～90天后可以供牲畜食用，春、秋两季时间为\n60～90天。夏天20～30天。\n[0024] 有益效果：\n[0025] 通过将植物乳杆菌、干酪乳杆菌、产朊假丝酵母和酿酒酵母组成高活性复合微生物发酵剂。并特异的将青储饲料发酵分为好氧和厌氧两个阶段。这样在好氧阶段促进了菌体的快速生长，厌氧阶段利于代谢物的快速积累，本发明有效的解决了青储饲料发酵中的技术难题，使用简单，便于农民大规模使用。\n[0026] 具体实施方式：下面通过具体的实施方案叙述本发明中利用复合微生物发酵秸秆生产青储饲料的方法。除非特别说明，本发明中所用的技术手段均为本领域技术人员所公知的方法。另外，实施方案应理解为说明性的，而非限制本发明的范围，本发明的实质和范围仅由权利要求书所限定。对于本领域技术人员而言，在不背离本发明实质和范围的前提下，对这些实施方案中的培养剂组分、含量、培养条件、分离提取条件进行的各种改变或改动也属于本发明的保护范围。\n[0027] 实施例1：混合菌发酵剂的制备方法\n[0028] 1)植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum CGMCC.No.1.2158)和干酪乳杆菌(Lactobacillus casei CGMCC.No.1.62)的制备工艺为：\n[0029] 斜面培养基(g/L)：20葡萄糖，5酵母粉，10大豆蛋白胨，10牛肉膏，5NaCl，10乙酸钠，2柠檬酸铵，0.2MgSO4·7H2O，0.05MnSO4·7H2O，15琼脂，pH 6.5。\n[0030] 发酵培养基(g/L)：40葡萄糖，10酵母粉，10大豆蛋白胨，无机盐(0.01NaCl，0.5乙酸钠，0.2柠檬酸铵，0.2KH2PO4，0.2MgSO4·7H2O，0.05MnSO4·7H2O)，pH 6.5。\n[0031] 发酵方法：在斜面上取1环接种到500mL摇瓶中，装液量为150mL，在37℃下，\n150rpm培养24h至对数期。5000rpm离心10min收集菌体。\n[0032] 2)产朊假丝酵母(Candida utilis CGMCC.No.2.120)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae No.2.1554)的制备工艺：\n[0033] 斜面培养基：10～12°Brix麦芽汁，15g/L琼脂，pH自然。\n[0034] 发酵培养基：10～12°Brix麦芽汁，pH自然。\n[0035] 发酵方法：在斜面上取1环接种到500mL摇瓶中，装液量为150mL，在个不同菌的最适温度下，150rpm培养至对数期。5000rpm离心10min收集菌体。\n[0036] 实施例2：\n[0037] 将发酵制的200g植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum CGMCC.No.1.2158)、\n100g干酪乳杆菌(Lactobacillus casei CGMCC.No.1.62)、100g产朊假丝酵母(Candida utilis CGMCC.No.2.120)、100g酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae No.2.1554)混合组成。用上述混合菌发酵剂以如下方法制备青储饲料：\n[0038] 1)原料准备：分别精选1吨无腐烂的稻草、玉米秆、豆科类杆的混合物，铡至2～\n5cm长。\n[0039] 2)菌种活化：将以上配置好的混合微生物菌剂500g倒入100升1°Brix麦芽汁中，充分搅拌混合均匀，35℃下经2小时即活化好。\n[0040] 3)接种装料：原料分层堆积，堆积20cm厚时，喷洒一遍菌液。堆积总高不应超过2米。\n[0041] 4)好氧培养：夏天空气中放置10天。\n[0042] 5)厌氧培养：用塑料薄膜密封，夏天30天后可以供牲畜食用。\n[0043] 发酵制备的青储饲料，pH为4.0，酒精浓度为3g/L。具有酸味、酒香味、呈黄绿色；\n纤维素含量降低、蛋白质含量增加。牛食用后，产奶量提高8％，羊犊日增重提高8％。\n[0044] 实施例2：\n[0045] 将发酵制的100g植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum CGMCC.No.1.2158)、\n200g干酪乳杆菌(Lactobacillus casei CGMCC.No.1.62)、200g产朊假丝酵母(Candida utilis CGMCC.No.2.120)、200g酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae No.2.1554)混合组成。用上述混合菌发酵剂以如下方法制备青储饲料：\n[0046] 1)原料准备：分别精选1吨无腐烂的稻草，铡至2～5cm长。\n[0047] 2)菌种活化：将以上配置好的混合微生物菌剂700g倒入100升2°Brix麦芽汁中，充分搅拌混合均匀，25℃下经3小时即活化好。\n[0048] 3)接种装料：原料分层堆积，堆积30cm厚时，喷洒一遍菌液。堆积总高不应超过2米。\n[0049] 4)好氧培养：夏天空气中放置5天。\n[0050] 5)厌氧培养：用塑料薄膜密封，夏天20天后可以供牲畜食用。\n[0051] 发酵制备的青储饲料，pH为3.8，酒精浓度为5g/L。具有酸味、酒香味、呈黄绿色；\n纤维素含量降低、蛋白质含量增加。牛食用后，产奶量提高10％，羊犊日增重提高10％。\n[0052] 实施例3：\n[0053] 将发酵制的100g植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum CGMCC.No.1.2158)、\n100g干酪乳杆菌(Lactobacillus casei CGMCC.No.1.62)、100g产朊假丝酵母(Candida utilis CGMCC.No.2.120)、100g酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae No.2.1554)混合组成。用上述混合菌发酵剂以如下方法制备青储饲料：\n[0054] 1)原料准备：分别精选1吨无腐烂的玉米秆，铡至2～5cm长。\n[0055] 2)菌种活化：将以上配置好的混合微生物菌剂400g倒入100升2°Brix麦芽汁