一种基于ddPCR定量检测饲料中转基因玉米IE034的方法、引物和探针及应用

发明专利有效专利

申请号：
CN201711421155.2
IPC分类号：C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11
申请日期：
2017-12-25
申请人：
环境保护部南京环境科学研究所

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专利名称	一种基于ddPCR定量检测饲料中转基因玉米IE034的方法、引物和探针及应用
申请号	CN201711421155.2	申请日期	2017-12-25
法律状态	实质审查	申报国家	中国
公开/公告日	2018-04-20	公开/公告号	CN107937595A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12Q1/6895 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12Q 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（免疫检测入G01N33/53）；其所用的组合物或试纸；这种组合物的制备方法；在微生物学方法或酶学方法中的条件反应控制〔3〕 C12Q1/00 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（带有条件测量或传感器的测定或试验装置，如菌落计数器入C12M1/34）；其组合物；这种组合物的制备方法〔3，2006.01〕 C12Q1/68 包括核酸〔3，2006.01，2018.01〕 C12Q1/6876 用于核酸分析的核酸产品，如引物或探针〔2018.01〕 C12Q1/6888 用于生物体的检测与识别〔2018.01〕 C12Q1/6895 用于植物、真菌或藻类〔2018.01〕	IPC分类号	C;1;2;Q;1;/;6;8;9;5;;;C;1;2;Q;1;/;6;8;6;;;C;1;2;N;1;5;/;1;1查看分类表>
申请人	环境保护部南京环境科学研究所	申请人地址	江苏省南京市玄武区蒋王庙街8号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	环境保护部南京环境科学研究所	当前权利人	环境保护部南京环境科学研究所
发明人	董姗姗;刘燕;张振华;章嫡妮;于赐刚;郭晓平
代理机构	南京知识律师事务所	代理人	蒋海军

摘要

本发明公开了一种基于ddPCR定量检测饲料中转基因玉米IE034的方法、引物和探针及应用，涉及分子生物学及转基因检测技术领域。所述的引物和探针分别包括外源基因Cry1Ie和内参基因rubisco的引物和探针，所述定量分析方法包括：1)提取饲料样品基因组DNA；2)利用外源基因Cry1Ie和内参基因rubisco的特异性引物和探针，对稀释后的基因组DNA进行ddPCR扩增；3)PCR产物的检测与分析。本方法不依赖于标准曲线、不受PCR抑制物及PCR扩增效率的影响，与常规PCR相比具有更高的灵敏度和稳定性，能够精准定量检测饲料中转基因的拷贝数浓度，能够对饲料中转基因玉米IE034定量分析。

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