一种非介质依赖直接对米曲霉休眠孢子转化外源DNA的方法

发明专利有效专利

申请号：
CN201610812877.X
IPC分类号：C12N15/80;C12R1/69
申请日期：
2016-09-09
申请人：
福州大学

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专利名称	一种非介质依赖直接对米曲霉休眠孢子转化外源DNA的方法
申请号	CN201610812877.X	申请日期	2016-09-09
法律状态	实质审查	申报国家	暂无
公开/公告日	2016-11-23	公开/公告号	CN106148386A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/80 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/63 使用载体引入外来遗传物质；载体；其宿主的使用；表达的调节〔5〕 C12N15/79 专门适用于真核细胞宿主的载体或表达系统〔5〕 C12N15/80 用于真菌〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;8;0;;;C;1;2;R;1;/;6;9查看分类表>
申请人	福州大学	申请人地址	福建省福州市福州地区大学新区学园路2号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	福州大学	当前权利人	福州大学
发明人	林峻
代理机构	福州君诚知识产权代理有限公司	代理人	戴雨君

摘要

本发明公开了一种非介质依赖直接对米曲霉休眠孢子转化外源DNA的方法，包括米曲霉培养和孢子收集、米曲霉孢子预处理以及使用HDEN法电击米曲霉孢子三个步骤，得到导入待转化质粒的米曲霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料，并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入米曲霉休眠孢子，可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤，省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等，并且转化率高，每个转化反应体系，至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。

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