一种肺炎衣原体IgM化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法

1.一种肺炎衣原体IgM化学发光免疫检测试剂盒，所述试剂盒包括：肺炎衣原体抗原包被的纳米磁微球、吖啶酯标记的鼠抗人IgM抗体、化学发光底物液、肺炎衣原体IgM定标品。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述肺炎衣原体抗原包被的固相载体为磁微粒。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述肺炎衣原体抗原包被的固相载体为羧基化的粒径为0.05-1um磁微粒。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物为吖啶酯、吖啶酯磺酰胺、吖啶酯甲苯磺酰胺、吖啶酯对甲基磺酰胺、吖啶酯三氟甲基磺酰胺。
5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物优选吖啶酯。
6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述化学发光底物液包括化学发光激发液、化学发光预激发液。
7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述化学发光预激发液为质量分数
0.005% ~ 0.5%的双氧水(H2O2)溶液，激发液为0.005mol/L ~ 0.025mol/L的氢氧化钠(NaOH)溶液。
8.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述肺炎衣原体IgM定标品为用标准品缓冲液将肺炎衣原体IgM配制成一定浓度，4 ℃保存备用。
9.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的制备方法，其特征在于包括肺炎衣原体抗原包被的磁微粒的制备、吖啶酯标记的鼠抗人IgM抗体的制备、化学发光底物液的制备、肺炎衣原体IgM定标品的制备。
10.根据权利要求1和权利要求9所述试剂盒的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
1）肺炎衣原体抗原包被的磁微粒的制备：
取羧基化的纳米磁珠悬浮液，磁分离去上清， MES缓冲液重悬，加入EDC水溶液，活化磁珠表面羧基，加入肺炎衣原体抗原，室温下混悬2-10 h，磁分离，去除上清， Tris缓冲液重悬，得到肺炎衣原体抗原包被的磁微粒；可选的，羧基化纳米磁珠直径为0.1μm ~ 2.0μm；
MES缓冲液浓度为10mM ~ 100mM，pH 5.5 ~ 8.5；
2）吖啶酯标记的鼠抗人IgM抗体的制备：
取鼠抗人IgM抗体，加入碳酸盐缓冲液，混匀，然后加入吖啶酯混匀，室温下避光反应，
1-2 h后取出，离心脱盐柱脱盐处理，脱盐过程中首先分别用纯净水及TBS缓冲液进行处理，最后加入得到的鼠抗人IgM抗体衍生物标记的吖啶酯溶液，收集离心管中的液体至保存管得到鼠抗人IgM抗体衍生物标记的吖啶酯；
3）肺炎衣原体IgM定标品的制备：
用标准品缓冲液将肺炎衣原体IgM配置成一定浓度，分装冻干，4 ℃保存备用；
4）化学发光预激发液的制备：
量取1.0升纯化水，依次加入0.5 ~100uL质量分数为20%的双氧水(H2O2)、0.5 ~ 5克防腐剂、0.5 ~ 5克表面活性剂，摇匀后避光存放；可选的，防腐剂为商品化叠氮化钠、PC300，表面活性剂为吐温20、吐温80、Triton X-100、Triton X-405；
5）化学发光激发液的制备：
量取1.0升纯化水，依次加入0.2 ~ 1克氢氧化钠、0.5 ~ 5克防腐剂、0.5 ~ 5克表面活性剂，摇匀后避光存放；可选的，防腐剂为商品化叠氮化钠、PC300，表面活性剂为吐温20、吐温80、Triton X-100、Triton X-405。

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