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专利名称 | 蛇肽保健酒及其制备方法 |
申请号 | CN201310513544.3 | 申请日期 | 2013-10-24 |
法律状态 | 授权 | 申报国家 | 中国 |
公开/公告日 | 2014-02-05 | 公开/公告号 | CN103555527A |
优先权 | 暂无 | 优先权号 | 暂无 |
主分类号 | C12G3/04 | IPC分类号 | C;1;2;G;3;/;0;4;;;A;6;1;K;3;8;/;0;3;;;C;1;2;P;2;1;/;0;6查看分类表>
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申请人 | 重庆师范大学 | 申请人地址 | 重庆市沙坪坝区大学城虎溪校区重庆师范大学
变更
专利地址、主体等相关变化,请及时变更,防止失效 |
权利人 | 重庆师范大学 | 当前权利人 | 重庆师范大学 |
发明人 | 余晓东;和七一 |
代理机构 | 重庆为信知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人 | 孙人鹏 |
摘要
本发明公开了一种蛇肽保健酒及其制备方法,其中一种蛇肽保健酒,其特征在于由以下体积份数的原料成分组成:白酒:670~680份、蛇毒活性肽溶液:100~200份、枸杞子浸泡液:10~20份、纯化水:110~210份;一种蛇肽保健酒的制备方法,其特征在于包括以下工艺步骤:(1)制备蛇毒活性肽溶液;(2)制备枸杞子浸泡液;(3)调配;(4)静置和过滤。本发明一种鱼腥草烫伤喷膜剂及其制备方法,方法简单方便,制备得到的蛇肽保健酒吸收快、安全,不用宰杀毒蛇以获得蛇毒,生产成本低,还能有效的缓解疲劳和关节炎。
1. 一种蛇肽保健酒,其特征在于由以下体积份数的原料成分组成: 白酒:670〜680份、 蛇毒活性肽溶液:100〜200份、 枸杞子浸泡液:10〜20份、 纯化水:110〜210份; 所述枸杞子浸泡液为枸杞子在白酒中浸泡过滤得到; 所述蛇毒活性肽溶液的制备由以下步骤组成: ① 称取蛇毒蛋白质,用纯化水充分溶解,升温至50°C后保温; ② 按照酶/底物为l〇〇〇〇U/g的比例添加蛋白酶进行酶解,搅拌均匀,于45°C的条件下, 作用6小时,每小时搅拌一次; ③ 将酶解液加热至80°C作用20分钟,冷却至室温; ④ 将灭酶后的酶解液置于离心机中8000转/分钟,离心15分钟,弃去沉淀,得到蛇毒 活性肽溶液。
2. 根据权利要求1所述的蛇肽保健酒,其特征在于所述枸杞子浸泡液的制备方法为: 称取枸杞子,并用白酒进行浸泡,枸杞子与白酒用量的比为〇. lg/ml,浸泡30天后,用板框 过滤机过滤得枸杞子浸泡液。
3. 根据权利要求2所述的蛇肽保健酒,其特征在于:所述蛇毒取自于蝮蛇或/和尖吻 蝮蛇。
4. 根据权利要求3所述的蛇肽保健酒,其特征在于:所述蛇毒取自于蝮蛇毒液和尖吻 蝮蛇毒液,所述蝮蛇毒液与尖吻蝮蛇毒液的添加比例为1:1。
5. -种权利要求1所述的蛇肽保健酒的制备方法,其特征在于包括以下工艺步骤: (1) 制备蛇毒活性肽溶液: ① 称取蛇毒蛋白质,用纯化水充分溶解,升温至50°C后保温; ② 按照酶/底物为l〇〇〇〇U/g的比例添加蛋白酶进行酶解,搅拌均匀,于45°C的条件下, 作用6小时,期间每小时搅拌一次; ③ 将酶解液加热至80°C作用20分钟,冷却至室温; ④ 将灭酶后的酶解液置于离心机中8000转/分钟,离心15分钟,弃去沉淀,得到蛇毒 活性肽溶液; (2) 制备枸杞子浸泡液:称取枸杞子,并用白酒进行浸泡,枸杞子与白酒用量的比为 〇. lg/ml,浸泡30天后,用板框过滤机过滤得枸杞子浸泡液,保存备用; (3) 调配:按体积份数依次将白酒、枸杞子浸泡液、蛇毒活性肽溶液加入到调配罐中混 合均匀,放置5小时后,按体积份数加入纯化水,再充分搅拌混匀; (4) 静置和过滤:静置12小时,依次通过板框过滤机和10微米膜式过滤器进行过滤, 得到精滤液即为蛇肽保健酒。
6. 根据权利要求5所述的蛇肽保健酒的制备方法,其特征在于还包括步骤(5)灌装筛 选:灌装前将白酒瓶用洗瓶机清洗,内外壁至少冲洗2次,水压为0. 10〜0. 15Mpa,再用酒 精消毒,晾干,瓶盖用水浸泡,再冲洗,用75 %酒精消毒,晾干,然后将精滤液用自动灌装机 灌装于白酒瓶中;将灌装后的白酒瓶于照度不低于300Lx的灯箱前筛选出酒体浑浊,或有 悬浮物及肉眼可见杂质的不合格蛇肽保健酒,然后将合格蛇肽保健酒进行包装检验入库。
7. 根据权利要求5所述的蛇肽保健酒的制备方法,其特征在于:所述蛇毒取自于蝮蛇 或/和尖吻蝮蛇。
8. 根据权利要求7所述的蛇肽保健酒的制备方法,其特征在于:所述蛇毒取自于蝮蛇 毒液和尖吻蝮蛇毒液,其中蝮蛇毒液与尖吻蝮蛇毒液的添加比例为1:1。
蛇肽保健酒及其制备方法\n技术领域\n[0001] 本发明属于保健酒技术领域,具体的说,涉及一种蛇肽保健酒及其制备方法。\n背景技术\n[0002] 随着现代生活节奏的加快,社会竞争的加剧,疲劳以及由此引起的免疫力低下成 为困扰很多人的健康问题。加之我国老龄老人的快速增长,导致老年人口总体健康水平下 降,老年慢性非传染性疾病不断增加。因此,开发出适合这类人群长期使用的保健品具有广 阔的市场前景。\n[0003] 蛇作为一种药食同源的动物,从古至今都受到人们相当的重视。研究表明,蛇体、 蛇体酶解功能多肽以及蛇毒均具有缓解体力疲劳的功效。在民间,以蛇泡酒在我国已有悠 久的历史。用蛇酒治病,早在西周时期,我国劳动人民就开始饮用,数千年来,祖国医学在蛇 酒方面积累了宝贵的经验。随着人民生活水平的不断提高,蛇酒越来越受到人们的重视和 欢迎。\n[0004] 目前,我国批准生产的蛇类保健酒产品,使用的蛇体主要是蝮蛇、尖吻蝮、眼镜蛇、 银环蛇、乌梢蛇等,其中有以全蛇为原料,添加各种各样的中药材浸泡而成,其配方五花八 门,其产品功效模糊而不确切,其成分复杂,其功效成分往往标为中药材的苷类物质,而且 并未提及蛇体组分,因而更不能说明其产品起功效作用的是蛇体或其组分;也有直接以蛇 毒液为原料,添加各种药材通过白酒浸泡得到,但这种方式蛇毒毒性较大,虽然加工过程 中,酒精和加热等方式会降低毒液毒性,但其使用的安全性仍然很低;不管以全蛇或蛇毒为 原料,其有效成分的吸收率都很低。\n[0005] 现有技术缺点:现有蛇类保健酒有效成分的吸收率低,使用安全性低,对蛇的宰杀 量大,保健酒生产成本高。\n发明内容\n[0006] 为解决以上技术问题,本发明的目的在于提供一种有效成分吸收率高、使用安全、 保健酒生产成本相对较低的蛇肽保健酒及其制备方法。\n[0007] 本发明的目的是这样实现的:一种蛇肽保健酒,其关键在于由以下体积份数的原 料成分组成:\n[0008] 白酒:670 〜680 份、\n[0009] 蛇毒活性肽溶液:100〜200份、\n[0010] 枸杞子浸泡液:10〜20份、\n[0011] 纯化水:110〜210份;\n[0012] 所述枸杞子浸泡液为枸杞子在白酒中浸泡过滤得到。\n[0013] 上述蛇毒活性肽溶液的制备由以下步骤组成:\n[0014] ①称取蛇毒蛋白质,用纯化水充分溶解,升温至50°C后保温;\n[0015] ②按照酶/底物为l〇〇〇〇U/g的比例添加蛋白酶进行酶解,搅拌均匀,于45°C的条 件下,作用6小时,每小时搅拌一次;\n[0016] ③将酶解液加热至80°C作用20分钟,冷却至室温;\n[0017] ④将灭酶后的酶解液置于离心机中8000转/分钟,离心15分钟,弃去沉淀,得到 蛇毒活性肽溶液。\n[0018] 上述枸杞子浸泡液的制备方法为:称取枸杞子,并用白酒进行浸泡,枸杞子与白酒 用量的比为0. lg/ml,浸泡30天后,用板框过滤机过滤得枸杞子浸泡液。\n[0019] 上述蛇毒取自于蝮蛇或/和尖吻蝮蛇。\n[0020] 上述蛇毒取自于蝮蛇毒液和尖吻蝮蛇毒液,所述蝮蛇毒液与尖吻蝮蛇毒液的添加 比例为1:1。\n[0021] 一种蛇肽保健酒的制备方法,其关键在于包括以下工艺步骤:\n[0022] ( 1)制备蛇毒活性肽溶液:\n[0023] ①称取蛇毒蛋白质,用纯化水充分溶解,升温至50°C后保温;\n[0024] ②按照酶/底物为10000U/g的比例添加蛋白酶进行酶解,搅拌均匀,于45°C的条 件下,作用6小时,期间每小时搅拌一次;\n[0025] ③将酶解液加热至80°C作用20分钟,冷却至室温;\n[0026] ④将灭酶后的酶解液置于离心机中8000转/分钟,离心15分钟,弃去沉淀,得到 蛇毒活性肽溶液;\n[0027] (2)制备枸杞子浸泡液:称取枸杞子,并用白酒进行浸泡,枸杞子与白酒用量的比 为0. lg/ml,浸泡30天后,用板框过滤机过滤得枸杞子浸泡液,保存备用;\n[0028] (3)调配:按体积份数依次将白酒、枸杞子浸泡液、蛇毒活性肽溶液加入到调配罐 中混合均匀,放置5小时后,按体积份数加入纯化水,再充分搅拌混匀;\n[0029] (4)静置和过滤:静置12小时,依次通过板框过滤机和10微米膜式过滤器进行过 滤,得到精滤液即为蛇肽保健酒。\n[0030] 上述的蛇肽保健酒的制备方法,还包括步骤(5)灌装筛选:灌装前将白酒瓶用洗 瓶机清洗,内外壁至少冲洗2次,水压为0. 10〜0. 15Mpa,再用酒精消毒,晾干,瓶盖用水浸 泡,在冲洗,用75%酒精消毒,晾干,然后将精滤液用自动灌装机灌装于白酒瓶中;将灌装后 的白酒瓶与照度不低于300Lx的灯箱前筛选出酒体浑浊,或有悬浮物及肉眼可见杂质的不 合格蛇肽保健酒,然后将合格蛇肽保健酒进行包装检验入库。\n[0031] 上述蛇毒取自于蝮蛇或/和尖吻蝮蛇。\n[0032] 上述蛇毒取自于蝮蛇毒液和尖吻蝮蛇毒液,其中蝮蛇毒液与尖吻蝮蛇毒液的添加 比例为1:1。\n[0033] -、蛇肽保健酒各种指标参数:\n[0034] 1、蛇肽保健酒的感官指标:量取30ml样品,倒入50ml清洁干燥无色玻璃杯中,在 自然光线下用肉眼观察其色泽及性状,用鼻嗅其气味,用口尝滋味,达到表1所示:\n[0035] 表1感官要求\n[0036]\n[0037] 2、理化指标:本发明蛇肽保健酒的理化指标如表2所示:\n[0038] 表2理化指标\n[0039]\n[0041] 3、微生物指标要求:本发明蛇肽保健酒的微生物指标如表3所示:\n[0042] 表3微生物指标\n[0043]\n[0044] 二、对蛇肽保健酒进行安全性检测及结果:\n[0045] 1、急性毒性试验\n[0046] 方法及结果:蛇肽保健酒200ml/kg. bw剂量经口给予雌、雄SD大鼠服用后,观察并 记录SD大鼠的中毒症状或不良反应,两周试验结束后剖杀全部动物,内脏器官未见明显异 常改变,说明本发明蛇肽保健酒对雌、雄性SD大鼠的急性经口 MTD大于200ml/kg. bw,属无 毒类,结果见表4:\n[0047] 表4蛇肽保健酒对SD大鼠的畸形经口毒性试验结果\n[0048]\n[0049] 2、遗传毒性试验\n[0050] 2. lAmes 试验\n[0051] 进行Ames试验,结果见表5和表6,结果显示:物料加与不加 S9的试验,自发对照 组的每皿平均回变菌落数均在正常值范围内,而阳性对照组诱发的每皿平均回变菌落数均 为自发对照组二倍以上,呈明显阳性反应;各试验组的评价回变菌落数均为超过溶剂对照 组的一倍,呈阴性反应,说明本发明蛇肽保健酒无诱导试验菌株回复突变的作用。\n[0052] 表5蛇肽保健酒Ames试验结果(第一次)(个/皿)\n[0053]\n[0054] 表6蛇肽保健酒Ames试验结果(第二次)(个/皿)\n[0055]\n[0056] 2. 2小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验\n[0057] 本发明蛇肽保健酒在小鼠骨髓细胞微核试验中为阴性结果,结果见表7,结果显 示:阳性对照组雌雄动物的微核率均显著高于阴性对照组(P < 〇. 01),受试物各组的微核 率与阴性对照组比较均无显著性差异(P > 〇. 05)。\n[0058] 表7蛇肽保健酒对小鼠骨髓细胞微核发生率的影响\n[0059]\n[0061] 注:与阴性对照比较# :P〈0. 01\n[0062] 2. 3小鼠精子畸形试验\n[0063] 进行小鼠精子畸形试验,本发明蛇肽保健酒在小鼠畸形试验中为阴性结果,结果 见表8,结果显示:阳性对照组的精子畸形率显著高于阴性对照组(P < 0. 01),各剂量组的 精子畸形率与阴性对照组比较均无显著性差异(P > 0. 05)。\n[0064] 表8蛇肽保健酒对小鼠精子畸形试验结果\n[0065]\n[0066] 注:与阴性对照比较# :P〈0. 01 ;Λ包括双头,双尾,胖头等。\n[0067] 2. 4大鼠30天喂养试验\n[0068] 阴性对照组和三个剂量组动物在30天喂养期间,摄食、饮水、大小便正常,生长发 育情况和一般表现良好,未观察到明显行为改变和中毒表现。\n[0069] 2. 4. 1对体重和食物利用率的影响\n[0070] 各实验组在整个实验期间的大鼠体重、雌雄大鼠食物利用率的测定结果分别如表 9和表10所示,受试动物雄鼠高剂量组动物第2周摄食轻度增加 (Ρ < 0. 05),雌书基酒组 动物第3轴摄食轻度降低(Ρ < 0. 05),但雌雄动物总食物利用与对照组比较无显著性差异 (Ρ > 0. 05),说明本发明蛇肽保健酒对机体生长发育无不良影响。\n[0071] 表9蛇肽保健酒对大鼠体重的影响G±.v )结果\n[0072]\n[0073] 表10蛇肽保健酒对大鼠食物利用率的影响结果\n[0074]\n[0075]\n[0076] 注:与阴性对照比较* :p〈0. 05。\n[0077] 2. 4. 2脏器系数测定结果:\n[0078] 蛇肽保健酒各剂量组的重要脏器的重量和脏器系数测定结果如表11所示并得 出:雌鼠高剂量组脾脏湿重较对照组高(P <〇.〇5),其余雌雄鼠各剂量组重要脏器的重量 和脏器系数与阴性对照组比较均无显著性差异(P > 0. 05)。\n[0079] 表11蛇肽保健酒对大鼠脏器重量和系数的影响结果(11=10, (ϊ±.0)\n[0080]\n[0081] 注:与阴性对照比较* :ρ〈0· 05。\n[0082] 2. 4. 3末期血液学检验结果:\n[0083] 试验末期的常规血液学指标(红细胞、血红蛋白、白细胞及分类)测定结果如表12 所示并得出:雄鼠基酒组合低剂量组动物RBC轻度降低(Ρ < 0. 05),雌鼠三个剂量组RBC均 较对照组轻度升高(Ρ < 0. 05),其余指标与阴性对照组比较均无显著性差异。\n[0084] 表12蛇肽保健酒对大鼠血液学指标的影响结果\n[0085]\n[0086] 注1 :RBC为红细胞,Hb为血红细胞,WBC为白细胞,GR为中性粒细胞,LY为淋巴细 胞;注2 :与阴性对照对比较,P < 0. 05。\n[0087] 2. 4. 4末期生化指标检测结果:\n[0088] 各实验组血清生化指标如表13所示并得出:雌鼠中剂量组Cr较对照组降低(P <0.05),无生物学意义,其余指标雌雄鼠各剂量组与阴性对照组比较均无显著性差异(P > 0· 05)。\n[0089] 表13蛇肽酒对大鼠血清生化指标的影响(X土 s,n=10)结果\n[0090]\n[0091] 注1 :ALT为谷丙转氨酶,AST为谷草转氨酶,TP为总蛋白,ALB为白蛋白,BUN为尿 素氮,CR为肌酐,GLU为血糖,CH0为胆固醇,TG为甘油三酯;\n[0092] 注2 :与阴性对照比较,Ρ〈0· 05。\n[0093] 2. 4. 5组织学检测结果:试验结束是对肝、肾、胃、脾脏和空肠进行检查和组织病 理学检查;结果分别如表14、15、16、17、18所示。\n[0094] 表14蛇肽保健酒大鼠 30天喂养实验肝脏组织学观察结果\n[0095]\n[0096] 表15蛇肽保健酒酒大鼠30天喂养实验肾组织学观察\n[0097]\n[0098] 表16蛇肽保健酒对大鼠30天喂养试验胃组织学观察\n[0099]\n[0100] 表17蛇肽保健酒对大鼠30天喂养试验脾的组织学观察\n[0101]\n[0102] 表18蛇肽保健酒对大鼠30天喂养试验空肠组织学观察\n[0103]\n[0104] 结果显示:空白对照组合高剂量组肾脏间质性肾炎各1例,发生率均为5%,但基酒 组肾脏间质性肾炎例数较多,共有5例,发生率占25% ;肝轻度脂肪变性;空白对照组和高剂 量组各1例属动物的自发病变,基酒组表现表面基酒对肾有轻度损害作用。\n[0105] 综上所述,本发明蛇肽保健酒各剂量组对动物脏器均未见由其引起的损害性改 变。\n[0106] 三、功效检测及其结果\n[0107] 1、蛇肽保健酒对于缓解体力疲劳功效测定:采用SPF级雄性ICR小鼠60只,体重 18〜22g,由重庆滕鑫生物技术有限公司提供。蛇肽保健酒按人体推荐剂量的10、20、30倍 剂量,将60只小白鼠随机分为6组,每组10只,即蛇肽保健酒低剂量组(蛇肽保健酒8. 3ml/ kg)、中剂量组(蛇肽保健酒16. 6ml/kg)、高剂量组(蛇肽保健酒33. 2ml/kg),阳性对照组 (红景天苷180mg · kg · d) E83,基酒对照组(15%酒基),阴性对照组(蒸馏水),连续灌胃30 天,测定小鼠负重游泳时间,血乳酸和血尿素氮,结果分别如表19、20、21所示:\n[0108] (1)从表19可见,3种剂量组的蛇肽保健酒组小鼠的游泳时间均高于阴性对照组 及基酒对照组,且中、高剂量组差异明显(P〈〇. 05),表明游泳时间对蛇肽保健酒具有浓度依 赖性;高剂量组小鼠力竭游泳时间与阳性对照组接近。\n[0109] 表19蛇肽保健酒对小鼠负重游泳时间的影响()\n[0110]\n[0111]\n[0112] 注:与酒基对照组比较,* :P < 0. 05 ;与阴性对照组比较,# :P < 0. 05。\n[0113] (2)从表20可见,低、中剂量蛇肽保健酒组的小鼠明显低于基酒对照组和阴性对 照组(P〈0. 05),而高剂量蛇肽保健酒组与基酒对照组、阴性对照组比较差异有显著统计学 意义(P < 0.01)。\n[0114] 表20蛇肽保健酒对游泳后小鼠血乳酸(LA)含量的影响(ϊ±ί )\n[0115]\n[0116] 注:与酒基对照组比较,* :P < 0. 05 ;与阴性对照组比较,# :P < 0. 05 ;与基酒对 照组及阴性对照组比较,** :P < 〇. 01。\n[0117] (3)从表21可见,蛇肽保健酒组小鼠的BUN含量随剂量的增加而逐渐降低,且中、 高剂量组与阴性对照组及基酒对照组比较差异有显著统计学意义(P〈〇. 05)。\n[0118] 表21蛇肽保健酒对力竭游泳后小鼠血尿素氮(BUN)含量的影响()\n[0119]\n[0120] 注:与酒基对照组比较,* :P < 0. 05 ;与阴性对照组比较,# :P < 0. 01。\n[0121] (4)综上所述:蛇肽保健酒具有明显延长小鼠一次性力竭游泳时间,血乳酸水平及 BUN的含量明显低于基酒对照组及阴性对照组,说明蛇肽保健酒可以通过减少运动中乳酸 的生成,减少运动时蛋白质的分解代谢,减少血清尿素氮的生成,同时降低代谢产生的氨毒 性作用,使小鼠更能适应高强度的运动,达到延缓疲劳产生的效果。\n[0122] 2、蛇肽保健酒对于缓解关节炎功效测定:\n[0123] 以佐剂性关节炎(adjunctive arthritis, AA)小鼠为模型,选取健康雄性成年 小鼠60只,体重20±2g,将60只小鼠随机分为6组,即对照组、模型组、酒基组、蛇肽低剂 量组和高剂量组、阳性对照组,每组101只。除对照组注射生理盐水外,在其他各组小鼠 右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂(FCA)0.02mL诱导炎症发生,得到模型:佐剂性关节炎 (adjunctive arthritis, AA)小鼠。造模成功后第2天至34天,开始对小鼠进行灌胃,每 只小鼠每天1次,每次〇. 2mL。阳性对照组以lmg/kg地塞米松进行灌胃,酒基组按10mL/kg 灌胃,蛇肽保健酒组分别按8. 3mL/kg (低剂量)、33. 2mL/kg (高剂量)灌胃,对照组和模型组 用纯净水对小鼠进行灌胃。然后对AA小鼠足趾肿胀度、踝关节、体重和CIC的测定。\n[0124] (1)AA小鼠足趾和踝关节肿胀度的测定\n[0125] 在造模后第2、10、18、26、34天用电子游标卡尺测定各组小鼠右后肢足趾和踝关 节直径。结果如表22和23所示:\n[0126] 表22蛇肽保健酒对AA小鼠右后足趾肿胀度的影响(mm, ,n=10)\n[0128] 其中a :P < 0. 05, b :P < 0. 01,与模型组比较;c :P < 0. 01,与对照组比较。\n[0129] 表23蛇肽保健酒对AA小鼠后踝关节肿胀度的影响(mm,;c土s,n=10)\n[0130]\n[0131] 其中a :P < 0. 05, b :P < 0. 01,与模型组比较;c :P < 0. 01,与对照组比较。\n[0132] 由表22可见,从造模后第2天开始,其他各组小鼠后足趾肿胀度显著高于对照组 (P < 0. 01)。与模型组比较,从给药后第17天即造模后第18天开始,阳性对照组小鼠足趾 肿胀明显降低(P < 0. 05);从造模后第26天开始,蛇肽低剂量组小鼠足趾肿胀度显著降低 (P < 0. 01);酒基组与蛇肽高剂量组均无显著变化。\n[0133] 由表23可见,从造模后第2天开始,其他各组小鼠右后踝关节肿胀度显著高于对 照组(P < 0. 01)。在造模后第18天,阳性对照组小鼠踝关节肿胀度显著降低(P < 0. 05); 造模后第26天,蛇肽低剂量组、蛇肽高剂量组、酒基组和阳性对照组小鼠踝关节肿胀度均 显著降低(P < 〇. 05);造模后第34天,阳性对照组、蛇肽高剂量组小鼠踝关节肿胀度均显 著降低(P < 0.05),蛇肽低剂量组和酒基组小鼠踝关节肿胀度降低,差异有统计学意义(P < 0· 01)。\n[0134] (2)小鼠体质量和脾脏指数的测定\n[0135] 在造模后第2、10、18、26、34天分别称量小鼠体质量。于末次给药24 h后,称量体 质量,结果如表24所示:\n[0136] 表24蛇肽保健酒对AA小鼠体质量的影响('mm,λ:士s,n=10)\n[0137]\n[0138] 其中a :P < 0. 05,与阳性对照组比较。\n[0139] 由表24可见,从造模第18天开始,与对照组比较,阳性对照组体质量增加缓慢,但 未呈现显著性差异;但蛇肽低剂量组差异有统计学意义(P < 〇. 05),第26天和第34天时, 阳性对照组与蛇肽低剂量组比较,差异有统计学意义(P < 0. 05)。\n[0140] (3)CIC 的测定\n[0141] 造模后第34天,小鼠眼球取血,离心(3000r / min, lOmin)分离血清,血清用2倍 体积0. lmol/L硼酸缓冲液(pH = 8. 4)稀释备用。测定管与对照管各加稀释血清30 μ L,测 定管加入4. 1%聚乙二醇溶液300 μ L,对照管加入上述硼酸缓冲液300 μ L,混匀后4°C放置 lh。用酶标仪以495nm波长测定各管吸光度(A)值,检测结果表示为测定管A495nm-对照 管 495nm。\n[0142] 结果:造模后第34天,测定各组小鼠血清CIC指数,结果显示模型组 (2. 38±1· 22)小鼠血清CIC指数显著高于对照组(0· 52±0· 10) (P < 0· 05);与模型组相 t匕,蛇肽低剂量组(0. 65±0. 14)和阳性对照组(0. 37±0. 09)的小鼠血CIC指数均显著降低 (P < 0· 05)。\n[0143] 通过结果发现:仅蛇肽保健酒低剂量组与阳性对照组小鼠 CIC显著降低,并恢复 为正常水平。\n[0144] (4)综上所述,低剂量蛇肽酒与地塞米松均对AA小鼠佐剂性关节炎具有显著的治 疗效果,但低剂量蛇肽酒治疗效果更好,且未见不良反应。\n[0145] 有益效果:\n[0146] 本发明一种鱼腥草烫伤喷膜剂及其制备方法,方法简单方便,制备得到的蛇肽保 健酒吸收快、安全,不用宰杀毒蛇以获得蛇毒,生产成本低,还能有效的缓解疲劳和关节炎。\n具体实施方式\n[0147] 下面结合实施例对本发明作进一步说明:\n[0148] 实施例1 : 一种蛇肽保健酒,其特征在于由以下体积份数的原料成分组成:\n[0149] 白酒:680ml、\n[0150] 蛇毒活性肽溶液:200ml、\n[0151] 枸杞子浸泡液:10ml、\n[0152] 纯化水:110ml。\n[0153] -种蛇肽保健酒的制备方法,包括以下工艺步骤:\n[0154] ( 1)制备蛇毒活性肽溶液:\n[0155] ①称取蝮蛇蛇毒蛋白质800g,用200ml的纯化水充分溶解,升温至50°C后保温;\n[0156] ②按照酶/底物为10000U/g的比例添加蛋白酶进行酶解,搅拌均匀,于45°C的条 件下,作用6小时,期间每小时搅拌一次;\n[0157] ③将酶解液加热至80°C作用20分钟,冷却至室温;\n[0158] ④将灭酶后的酶解液置于离心机中8000转/分钟,离心15分钟,弃去沉淀,得到 蝮蛇蛇毒活性肽溶液,保存备用;\n[0159] (2)制备枸杞子浸泡液:称取枸杞子,并用52%的浓香型白酒进行浸泡,枸杞子与 白酒用量的比为〇. lg/ml,浸泡30天后,用板框过滤机过滤得枸杞子浸泡液,保存备用;\n[0160] (3)调配:依次将白酒680ml、枸杞子浸泡液10ml、蝮蛇蛇毒活性肽溶液200ml加 入到调配罐中混合均匀,放置5小时后,加入110ml纯化水,再充分搅拌混匀;\n[0161] (4)静置和过滤:静置12小时,依次通过板框过滤机和10微米膜式过滤器进行过 滤,得到精滤液即为蛇肽保健酒;\n[0162] (5)灌装筛选:灌装前将白酒瓶用洗瓶机清洗,内外壁冲洗4次,水压为0. 10〜 0. 15Mpa,再用酒精消毒,晾干,瓶盖用水浸泡,在冲洗,用75%酒精消毒,晾干,然后将精滤 液用自动灌装机灌装于白酒瓶中;将灌装后的白酒瓶与照度不低于300Lx的灯箱前筛选出 酒体浑浊,或有悬浮物及肉眼可见杂质的不合格蛇肽保健酒,然后将合格蛇肽保健酒进行 包装检验入库。\n[0163] 实施例2 : -种蛇肽保健酒,其特征在于由以下体积份数的原料成分组成:\n[0164] 白酒:670ml、\n[0165] 蛇毒活性肽溶液:100ml、\n[0166] 枸杞子浸泡液:20ml、\n[0167] 纯化水:210ml ;\n[0168] 一种蛇肽保健酒的制备方法,包括以下工艺步骤:\n[0169] ( 1)制备蛇毒活性肽溶液:\n[0170] ①称取尖吻蝮蛇蛇毒蛋白质400g,用100ml的纯化水充分溶解,升温至50°C后保 温;\n[0171] ②按照酶/底物为l〇〇〇〇U/g的比例添加蛋白酶进行酶解,搅拌均匀,于45°C的条 件下,作用6小时,期间每小时搅拌一次;\n[0172] ③将酶解液加热至80°C作用20分钟,冷却至室温;\n[0173] ④将灭酶后的酶解液置于离心机中8000转/分钟,离心15分钟,弃去沉淀,得到 尖吻蝮蛇蛇毒活性肽溶液,保存备用;\n[0174] (2)制备枸杞子浸泡液:称取枸杞子,并用52%的浓香型白酒进行浸泡,枸杞子与 白酒用量的比为〇. lg/ml,浸泡30天后,用板框过滤机过滤得枸杞子浸泡液,保存备用;\n[0175] (3)调配:依次将白酒670ml、枸杞子浸泡液20ml、尖吻蝮蛇蛇毒活性肽溶液100ml 加入到调配罐中混合均匀,放置5小时后,加入210ml纯化水,再充分搅拌混匀;\n[0176] (4)静置和过滤:静置12小时,依次通过板框过滤机和10微米膜式过滤器进行过 滤,得到精滤液即为蛇肽保健酒;\n[0177] (5)灌装筛选:灌装前将白酒瓶用洗瓶机清洗,内外壁冲洗2次,水压为0. 10〜 0. 15Mpa,再用酒精消毒,晾干,瓶盖用水浸泡,在冲洗,用75%酒精消毒,晾干,然后将精滤 液用自动灌装机灌装于白酒瓶中;将灌装后的白酒瓶与照度不低于300Lx的灯箱前筛选出 酒体浑浊,或有悬浮物及肉眼可见杂质的不合格蛇肽保健酒,然后将合格蛇肽保健酒进行 包装检验入库。\n[0178] 实施例3 : -种蛇肽保健酒,其特征在于由以下体积份数的原料成分组成:\n[0179] 白酒:675ml、\n[0180] 蛇毒活性肽溶液:150ml、\n[0181] 枸杞子浸泡液:15ml、\n[0182] 纯化水:160ml。\n[0183] 一种蛇肽保健酒的制备方法,包括以下工艺步骤:\n[0184] ( 1)制备蛇毒活性肽溶液:\n[0185] ①称取蝮蛇蛇毒蛋白质和尖吻蝮蛇蛇毒蛋白质各400g,混合后用200ml的纯化水 充分溶解,升温至50°C后保温;\n[0186] ②按照酶/底物为10000U/g的比例添加蛋白酶进行酶解,搅拌均匀,于45°C的条 件下,作用6小时,期间每小时搅拌一次;\n[0187] ③将酶解液加热至80°C作用20分钟,冷却至室温;\n[0188] ④将灭酶后的酶解液置于离心机中8000转/分钟,离心15分钟,弃去沉淀,得到 蛇毒活性肽溶液;\n[0189] (2)制备枸杞子浸泡液:称取枸杞子,并用52%的浓香型白酒进行浸泡,枸杞子与 白酒用量的比为〇. lg/ml,浸泡30天后,用板框过滤机过滤得枸杞子浸泡液,保存备用;\n[0191] (3)调配:依次将白酒675ml、枸杞子浸泡液15ml、蛇毒活性肽溶液150ml加入到 调配罐中混合均匀,放置5小时后,加入160ml纯化水,再充分搅拌混匀;\n[0192] (4)静置和过滤:静置12小时,依次通过板框过滤机和10微米膜式过滤器进行过 滤,得到精滤液即为蛇肽保健酒;\n[0193] (5)灌装筛选:灌装前将白酒瓶用洗瓶机清洗,内外壁冲洗3次,水压为0. 10〜 0. 15Mpa,再用酒精消毒,晾干,瓶盖用水浸泡,在冲洗,用75%酒精消毒,晾干,然后将精滤 液用自动灌装机灌装于白酒瓶中;将灌装后的白酒瓶与照度不低于300Lx的灯箱前筛选出 酒体浑浊,或有悬浮物及肉眼可见杂质的不合格蛇肽保健酒,然后将合格蛇肽保健酒进行 包装检验入库。
法律信息
- 2014-12-31
- 2014-03-12
实质审查的生效
IPC(主分类): C12G 3/04
专利申请号: 201310513544.3
申请日: 2013.10.24
- 2014-02-05
引用专利(该专利引用了哪些专利)
序号 | 公开(公告)号 | 公开(公告)日 | 申请日 | 专利名称 | 申请人 |
1
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2012-04-04
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2010-09-17
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2
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1996-01-24
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1994-07-17
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3
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2002-12-18
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2002-05-20
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4
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2012-10-10
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2012-06-28
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5
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2010-01-13
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2009-07-23
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被引用专利(该专利被哪些专利引用)
序号 | 公开(公告)号 | 公开(公告)日 | 申请日 | 专利名称 | 申请人 | 该专利没有被任何外部专利所引用! |