一种对硝基苄基酯酶突变体及应用

发明专利有效专利

申请号：
CN202110465504.0
IPC分类号：C12N9/18;C12N15/55;C12P17/16
申请日期：
2021-04-28
申请人：
安徽丰乐香料有限责任公司;浙江工业大学

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专利名称	一种对硝基苄基酯酶突变体及应用
申请号	CN202110465504.0	申请日期	2021-04-28
法律状态	实质审查	申报国家	中国
公开/公告日	2021-08-03	公开/公告号	CN113201516A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N9/18 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N9/00 酶，如连接酶（6.）；酶原；其组合物（用于清洁牙齿的含酶的制剂入A61K 8/66、A61Q 11/00；含酶或酶原的医药制剂入A61K 38/43；含酶去污剂组合物入C11D）；制备、活化、抑制、分离或纯化酶的方法〔3〕 C12N9/14 水解酶（3.）〔3〕 C12N9/16 作用在酯键上（3.1）〔3〕 C12N9/18 羧酸酯水解酶〔3〕	IPC分类号	C;1;2;N;9;/;1;8;;;C;1;2;N;1;5;/;5;5;;;C;1;2;P;1;7;/;1;6查看分类表>
申请人	安徽丰乐香料有限责任公司;浙江工业大学	申请人地址	安徽省合肥市高新区天湖路一号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	安徽丰乐香料有限责任公司,浙江工业大学	当前权利人	安徽丰乐香料有限责任公司,浙江工业大学
发明人	陈小龙;王广强;金晓;胡军;陆跃乐;张翼轸;朱林江;陈志钢;陈翰驰;田雯;朱俊峰
代理机构	浙江千克知识产权代理有限公司	代理人	冷红梅

摘要

本发明公开了一种对硝基苄基酯酶突变体及其在酶催化dl‑‑薄荷酯的手性拆分制备l‑薄荷醇中的应用。所述突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的野生型对硝基苄基酯酶在315位进行定点饱和突变获得。本发明的有益效果主要体现在：①本发明酯酶突变体无需添加助溶剂，酶催化活性维持较高水平；②在无助溶剂体系下，突变体酶催化的立体选择性较野生型显著提高。将该突变体酶通过大肠杆菌过量表达后用于催化反应，并以10～200g/L的dl‑乙酸薄荷酯为底物，进行水解拆分制备l‑薄荷醇，结果表明l‑乙酸薄荷酯底物转化率>70％，产物l‑薄荷醇的eep值>95％，表现出良好的工业应用性能。

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