肌醇磷酸酯的新的合成方法

1.一种制备1-O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙 基肌醇的方法，包括：
(a)将D-肌醇通过下列步骤转变成(±)-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌 醇：
(i)将肌醇丙酮化而形成(±)-2，3-O-亚异丙基肌醇；和
(ii)将步骤(i)的产物丙酮化而产生(±)-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌 醇；
(b)通过下列步骤将步骤(a)的产物转变成(±)-6-O-苄基-2，3：4，5-二- O-亚异丙基肌醇：
(i)将(±)-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇甲锡烷基化；和
(ii)将步骤(i)的产物苄化而产生(±)-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙 基肌醇；
(c)将步骤(b)的产物转变成1-O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄基- 2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇；和
(d)从步骤(c)的产物分离1-O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5- 二-O-亚异丙基肌醇。
2.权利要求1的方法，其中步骤(b)(ii)的苄化是通过与氟化铯和 苄基溴的反应进行的。
3.权利要求1的方法，其中步骤(c)的转化是通过用(+)-氯甲酸 酯酰化进行的。
4.权利要求1的方法，其中在步骤(d)中1-O-[(+)-氧基羰基]-6- O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇用甲醇重结晶。
5.一种制备6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇H-磷酸酯的方 法，包括下列步骤：
(a)将权利要求1的1-O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O- 亚异丙基肌醇水解而得到(-)-6-O-苄基-2，3：4，5-O-亚异丙基肌醇；和(b)将步骤(a)的产物通过与PCl3和咪唑反应转变成6-O-苄基- 2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇H-膦酸酯。
6.权利要求5的方法，其中步骤(a)的水解是在甲醇中用碳酸钾 进行。
7.权利要求5的方法，其中(-)-6-O-苄基-2，3：4，5-O-亚异丙基肌醇 通过与PCl3和咪唑反应而被转化。
8.一种制备对映体纯的D-肌醇1，4，5-三磷酸酯的方法，包括：
(a)将D-肌醇通过下列步骤转变成(±)-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌 醇：
(i)将肌醇丙酮化而形成(±)-2，3-O-亚异丙基肌醇；和
(ii)将步骤(i)的产物丙酮化而产生(±)-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌 醇；
(b)通过下列步骤将步骤(a)的产物转变成(±)-6-O-苄基-2，3：4，5-二- O-亚异丙基肌醇：
(i)将(±)-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇甲锡烷基化；和
(ii)将步骤(i)的产物苄化而产生(±)-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙 基肌醇；
(c)将步骤(b)的产物转变成1-O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄基- 2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇；
(d)从步骤(c)的产物分离1-O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5- 二-O-亚异丙基肌醇；
(e)通过下列步骤将1-O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O- 亚异丙基肌醇转变成(+)-6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌醇：
(i)将1-O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇 用对甲苯磺酸吡啶鎓水解而产生1-O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3- O-亚异丙基肌醇；和(ii)将步骤(i)的产物碱水解而产生(+)-6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌 醇；
(f)将步骤(e)的产物通过下列步骤转变成(-)-6-O-苄基-2，3-O-亚异 丙基肌醇1，4，5-三(二苄基磷酸酯)：
(i)将步骤(a)的产物磷酸化而产生(-)-6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌 醇1，4，5-三(二苄基亚磷酸酯)；
(ii)就地将步骤(i)的产物氧化而产生(-)-6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基 肌醇1，4，5-三(二苄基磷酸酯)；和
(iii)使用SiO2层析从步骤(ii)的产物分离(-)-6-O-苄基-2，3-O-亚异 丙基肌醇1，4，5-三(二苄基磷酸酯)；和
(g)通过下列步骤将步骤(f)的产物转变成D-肌醇1，4，5-三磷酸酯：
(i)将步骤(b)的产物氢解而得到D-2，3-O-亚异丙基肌醇1，4，5-三磷 酸酯；和
(ii)将步骤(ii)的产物酸化而得到D-肌醇1，4，5-三磷酸酯。
9.权利要求8的方法，其中步骤(f)(i)的磷酸化通过与N，N-二异 丙基二苄基氨基亚磷酸酯反应来进行。
10.权利要求8的方法，其中步骤(f)(ii)的就地氧化用间氯过苯甲 酸(“mCPBA”)进行。
11.权利要求8的方法，其中步骤(g)(i)的氢解用载于活性炭上的 钯进行。
12.权利要求8的方法，其中步骤(g)(ii)的酸化用乙酸进行。
13.权利要求8的方法，其中步骤(b)(ii)的苄化通过与氟化铯和 苄基溴反应进行。
14.权利要求8的方法，其中步骤(c)的转变通过与(+)-氯甲酸 酯酰化来进行。
15.权利要求8的方法，其中在步骤(d)中1-O-[(+)-氧基羰基]- 6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇用甲醇重结晶。
16.一种制备对映体纯的L-肌几醇1，4，5-三磷酸酯的方法，包括下 列步骤：
(a)将中1-O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌 醇水解而形成(-)-6-O-苄基-2，3：4，5-O-亚异丙基肌醇；
(b)将步骤(a)的产物通过与PCl3和咪唑反应转变成(±)-6-O-苄基- 2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇H-膦酸酯；
(c)用(-)-氯甲酸酯酰化(±)-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇 H-膦酸酯而得到3-O-[(+)-氧基羰基]-4-O-苄基-1，2：5，6-二-O-亚异丙 基肌醇；
(d)从步骤(c)的产物结晶3-O-[(+)-氧基羰基]-4-O-苄基-1，2：5，6- 二-O-亚异丙基肌醇；
(e)通过下列步骤将3-O-[(+)-氧基羰基]-4-O-苄基-1，2：5，6-二-O- 亚异丙基肌醇转变成(+)-4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基肌醇3，5，6-三(二苄 基磷酸酯)：
(i)将3-O-[(+)-氧基羰基]-4-O-苄基-1，2：5，6-二-O-亚异丙基肌醇 磷酸化而产生4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基肌醇3，5，6-三(二苄基亚磷酸 酯)；和(ii)就地将步骤(i)的产物氧化而产生(+)-4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基 肌醇3，5，6-三(二苄基磷酸酯)；
(f)从步骤(e)的产物分离(+)-4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基肌醇3，5，6- 三(二苄基磷酸酯)；
(g)将(+)-4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基肌醇3，5，6-三(二苄基磷酸酯)氢 解而产生L-1，2-O-亚异丙基肌醇3，5，6-三磷酸酯；和
(h)将L-1，2-O-亚异丙基肌醇3，5，6-三磷酸酯酸化而得到L-肌醇 3，5，6-三磷酸酯。
17.权利要求16的方法，其中3-O-[(+)-氧基羰基]-4-O-苄基- 1，2：5，6-二-O-亚异丙基肌醇在步骤(b)中用甲醇重结晶。
18.权利要求16的方法，其中步骤(c)(i)的磷酸化用N，N-二异丙 基二苄基氨基亚磷酸酯进行。
19.权利要求16的方法，其中步骤(c)(ii)的就地氧化用间氯过苯 甲酸进行。
20.权利要求16的方法，其中4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基肌醇3，5，6- 三(二苄基磷酸酯)在步骤(d)中使用SiO2层析进行分离。
21.权利要求16的方法，其中步骤(d)的氢解使用载于活性炭上 的钯进行。
22.权利要求16的方法，其中步骤(f)的酸化用乙酸进行。
23.权利要求16的方法，其中步骤(a)的水解在甲醇中用碳酸钾 进行。

技术领域\n本发明涉及提供快速、经济和有效地合成磷酸酯基的肌醇衍生物 的方法。\n背景技术\n许多信号分子诸如激素和神经递质通过结合细胞膜上的受体对其 靶细胞施加作用。结合后，信号分子在其受体上的存在被转化为靶 细胞内受一个或多个位于膜内的分子的作用。负责传导许多信号分 子作用的化合物相信是磷脂酰肌醇4，5-双磷酸酯(“PIP2”)。\n信号分子结合到其受体后，PIP2的水解导致形成D-肌醇1，4，5-三 磷酸酯(“D-IP3”)和二酰基甘油。D-IP3导致细胞内、非线粒体存储的 钙的释放；提高的细胞内钙水平本身又导致细胞内的各种反应诸如 肌肉收缩、细胞集合和血栓烷B2释放。此外，二酰基甘油和磷脂酰 丝氨酸及钙一起激活蛋白激酶C(PKC)。已知PKC能将众多涉及细 胞机制调节的蛋白质磷酸化。\n因此，D-IP3和其它磷酸酯基的肌醇衍生物可用于各个方面，包 括外信号影响细胞内各过程的途径和机制的说明性研究。例如，细 胞内D-IP3受体的分离和鉴定有助于说明在各种生理和病理过程中钙 转移的作用以及有助于开发能调节钙转移作用的药剂。\n先前已有有关D-IP3合成的报告(参见S.Ozaki等，1986)。但是， Ozaki的方法需要通过柱层析进行几种肌醇非对映体的分离，而柱层 析是需要使用约150美元/公斤的硅胶的高成本、低效和不适宜工业 使用的方法。尽管其它人(参见J.Gigg等，1985；R.de la Pradilla等， 1990；N.Noda等，1990；Chen等，美国专利5260472)已经报告了中间 体少于Ozaki方法的D-IP3合成，但是他们的方法仍需要多个层析分 离步骤和/或需要非商品化的反应剂。\n本发明提供了快速、方便和经济的合成对映体纯的肌醇衍生物 D-IR3和L-IP3的方法，尽可能少利用层析。反应中间体一般通过结晶 分离，所用的反应剂均是可购置和较低价的。\n此外，在所述合成过程中产生的一种中间体可转变成一种对于肌 醇基的脂质和肌醇类似物的合成有用的前体。所提供的肌醇-H-磷酸 酯3-HP可用于制备各种磷脂酰肌醇。\n发明内容\n本发明提供了合成1-O-[(+)-氧基(menthoxy)羰基]-6-O-苄基- 2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇(“D4P”)、D-肌醇1，4，5-三磷酸酯(“D-IP3”)、 肌醇6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇H-膦酸酯(“3-HP”)和L-肌 醇1，4，5-三磷酸酯(“L-IP3”)的快速、方便和经济的方法。所述合成所 需的层析分离步骤比先前已知的反应图式少。\nD4P按照本发明的方法经中间体(±)-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇 (“(±)-2”)、(±)-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇(“(±)-3”)和1-O-(+)- 氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇(“4P”)用D-肌醇合 成，接着通过用甲醇结晶将D4P与外消旋的4P分离。D-IP3经中间 体(+)-6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌醇和6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌醇 1，4，5-三(二苄基磷酸酯)用D4P制备。在所述合成过程中只使用层析 用于6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌醇1，4，5-三(二苄基磷酸酯)的分离。\n3-HP经中间体(-)-6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌醇用D-4P制备。 L-IP3经化合物(±)-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇((±)-3)、3-O- [(+)-氧基羰基]-4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基肌醇(4M)、4-O-苄基-1，2- O-亚异丙基肌醇3，5，6-三(二苄基磷酸酯)和4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基 肌醇3，5，6-三(二苄基磷酸酯)制备。在所述合成过程中只使用层析用 于4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基肌醇3，5，6-三(二苄基磷酸酯)的分离。\n下面是本申请中所用的缩写词和缩写词代表的化合物的全名：1- O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇：D4P； (±)-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇：(±)-2；(±)-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚 异丙基肌醇：(±)-3；外消旋-1-O-(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5- 二-O-亚异丙基肌醇：4P；D-肌醇1，4，5-三磷酸酯：D-IP3；间-氯过苯 甲酸：mCPBA；肌醇6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇H-膦酸酯： 3-HP；L-肌醇1，4，5-三膦酸酯：L-IP3和3-O-[(+)-氧基羰基]-4-O-苄 基-1，2：5，6-二-O-亚异丙基肌醇：4M。\n本发明总的来说提供了磷酸肌醇衍生物的合成方法，使用作为中 间体的H-膦酸酯和(+)-氯甲酸酯来分离各种肌醇衍生物。更准确地 说，这里描述了一种制备D-1-O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5- 二-O-亚异丙基肌醇(“D4P”)的方法(参见下面的图式1)。这里也提供 了制备对映体纯的D-肌醇1，4，5-三磷酸酯(“D-IP3”)的方法(参见下面 的图式1)。\n制备D-4P方法中的第一步包括将肌醇转变成(±)-2，3：4，5-二-O-亚 异丙基肌醇(“(±)-2”)：通过肌醇的丙酮化作用而产生(±)-2，3-O-亚异丙 基肌醇，再将该产物丙酮化而形成(±)-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇。 接着这种(±)-2通过将其甲锡烷基化，然后将其产物苄化而形成(±)-6- O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇(“(±)-3”)。所述苄化可通过本领域 技术人员熟知的多种方式来完成，包括(没有限定)：在苄基溴中使用 氟化铯反应；在苄基溴中用氧化银超声处理；在苄基溴中使用氢氧 化钠相转移催化；和在苄基溴中与乙醇亚铊反应。优选所述苄化通 过与氟化铯和苄基溴反应进行。\n然后，(±)-3通过例如用氯甲酸酯酰化转变成外消旋-1-O-[(+)- 氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇(“4P”)。使用例如 甲醇从外消旋物4-P产物分离D-4P。这些化合物以及其它此中制备 的化合物的质子和磷NMR光谱通过标准方法得到并且符合预测的结 构(对于化合物(±)-3的光谱，参见Chung and Ryu，1994))。\n在制备对映体纯的D-肌醇1，4，5-三磷酸酯(“D-IP3”)(参见下面的图 式1)的方法中，第一步包括(+)-6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌醇的转化， 通过例如用对甲苯磺酸吡啶鎓将D4P水解形成1-O-[(+)-氧基羰 基]-6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌醇。将这种产物进行碱水解产生(+)-6- O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌醇。然后将这个步骤的产物(+)-6-O-苄基- 2，3-O-亚异丙基肌醇首先通过磷酸化而形成6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基 肌醇1，4，5-三(二苄基亚磷酸酯)。所述磷酸化可通过任何一般为本领 域所接受用来将磷原子结合到化合物上的方式进行。优选这种磷酸 化步骤用N，N-二异丙基-二苄基氨基亚磷酸酯(phosphoramidite)进行。\n磷酸化后，就地将亚磷酸酯例如用间-氯过苯甲酸(“mCPBA”)氧 化而产生6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌醇1，4，5-三(二苄基磷酸酯)。例 如使用SiO2层析将6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌醇1，4，5-三(二苄基磷 酸酯)从所获得的磷酸酯分离。然后，D-IP3通过6-O-苄基-2，3-O-亚异 丙基肌醇1，4，5-三(二苄基磷酸酯)的氢解形成，例如使用载于活性炭 上的钯将其氢解获得2，3-O-亚异丙基肌醇1，4，5-三磷酸酯。这种产物 例如用乙酸酸化得到D-肌醇1，4，5-三磷酸酯。\n本发明还提供了制备6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇H-膦 酸酯(“3-HP”)的方法(参见下面的图式3)。该方法包括在甲醇中用碳 酸钾将D4P水解得到(-)-6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌醇(“(-)-3”)并接着 将这种产物用PCl3和咪唑转变成3-HP。\n本发明还提供了制备对映体纯的L-肌醇1，4，5-三磷酸酯(L-IP3)的 方法(参见下面的图式2)。首先优选(但不是必须)用(-)-氯甲酸酯将 (±)-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇(“(±)-3”)转变成外消旋3-O- [(-)-氧基羰基]-4-O-苄基-1，2：5，6-二-O-亚异丙基肌醇(“4M”)。例如 用甲醇从其反应产物中结晶L4M。然后，为了形成4-O-苄基-1，2-O- 亚异丙基肌醇3，5，6-三(二苄基亚磷酸酯)，将其通过例如用N，N-二异 丙基-二苄基氨基亚磷酸酯将4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基肌醇磷酸化转 变成4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基肌醇3，5，6-三(二苄基磷酸酯)。就地将 这种产物例如用间氯过苯甲酸氧化产生4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基肌 醇3，5，6-三(二苄基磷酸酯)，然后，通过各种方法包括SiO2层析分离。 然后，为了获得1，2-O-亚异丙基肌醇3，5，6-三磷酸酯，通过例如使用 载于活性炭上的钯将4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基肌醇3，5，6-三(二苄基 磷酸酯)氢解形成L-肌醇1，4，5-三磷酸酯。然后将该产物用乙酸酸化 而得到L-肌醇3，5，6-三磷酸酯。\n本发明具体涉及：\n1.一种制备1-O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙 基肌醇的方法，包括：\n(a)将D-肌醇通过下列步骤转变成(±)-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌 醇：\n(i)将肌醇丙酮化而形成(±)-2，3-O-亚异丙基肌醇；和\n(ii)将步骤(i)的产物丙酮化而产生(±)-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌 醇；\n(b)通过下列步骤将步骤(a)的产物转变成(±)-6-O-苄基-2，3：4，5-二- O-亚异丙基肌醇：\n(i)将(±)-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇甲锡烷基化；和\n(ii)将步骤(i)的产物苄化而产生(±)-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙 基肌醇；\n(c)将步骤(b)的产物转变成1-O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄基- 2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇；和\n(d)从步骤(c)的产物分离1-O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5- 二-O-亚异丙基肌醇。\n2.以上1的方法，其中步骤(b)(ii)的苄化是通过与氟化铯和苄基 溴的反应进行的。\n3.以上1的方法，其中步骤(c)的转化是通过用(+)-氯甲酸酯酰 化进行的。\n4.以上1的方法，其中在步骤(d)中1-O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄 基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇用甲醇重结晶。\n5.一种制备6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇H-磷酸酯的方 法，包括下列步骤：\n(a)将权利要求1的1-O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O- 亚异丙基肌醇水解而得到(-)-6-O-苄基-2，3：4，5-O-亚异丙基肌醇；和\n(b)将步骤(a)的产物通过与PCl3和咪唑反应转变成6-O-苄基- 2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇H-膦酸酯。\n6.以上5的方法，其中步骤(a)的水解是在甲醇中用碳酸钾进行。\n7.以上5的方法，其中(-)-6-O-苄基-2，3：4，5-O-亚异丙基肌醇通过 与PCl3和咪唑反应而被转化。\n8.一种制备对映体纯的D-肌醇1，4，5-三磷酸酯的方法，包括：\n(a)将D-肌醇通过下列步骤转变成(±)-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌 醇：\n(i)将肌醇丙酮化而形成(±)-2，3-O-亚异丙基肌醇；和\n(ii)将步骤(i)的产物丙酮化而产生(±)-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌 醇；\n(b)通过下列步骤将步骤(a)的产物转变成(±)-6-O-苄基-2，3：4，5-二- O-亚异丙基肌醇：\n(i)将(±)-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇甲锡烷基化；和\n(ii)将步骤(i)的产物苄化而产生(±)-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙 基肌醇；\n(c)将步骤(b)的产物转变成1-O-(+)-氧基羰基]-6-O-苄基- 2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇；\n(d)从步骤(c)的产物分离1-O-(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5- 二-O-亚异丙基肌醇；\n(e)通过下列步骤将1-O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O- 亚异丙基肌醇转变成(+)-6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌醇：\n(i)将1-O-(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇 用对甲苯磺酸吡啶鎓水解而产生1-O-(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3- O-亚异丙基肌醇；和\n(ii)将步骤(i)的产物碱水解而产生(+)-6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌 醇；\n(f)将步骤(e)的产物通过下列步骤转变成(-)-6-O-苄基-2，3-O-亚异 丙基肌醇1，4，5-三(二苄基磷酸酯)：\n(i)将步骤(a)的产物磷酸化而产生(-)-6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌 醇1，4，5-三(二苄基亚磷酸酯)；\n(ii)就地将步骤(i)的产物氧化而产生(-)-6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基 肌醇1，4，5-三(二苄基磷酸酯)；和\n(iii)使用SiO2层析从步骤(ii)的产物分离(-)-6-O-苄基-2，3-O-亚异 丙基肌醇1，4，5-三(二苄基磷酸酯)；和\n(g)通过下列步骤将步骤(f)的产物转变成D-肌醇1，4，5-三磷酸酯：\n(i)将步骤(b)的产物氢解而得到D-2，3-O-亚异丙基肌醇1，4，5-三磷 酸酯；和\n(ii)将步骤(ii)的产物酸化而得到D-肌醇1，4，5-三磷酸酯。\n9.以上8的方法，其中步骤(f)(i)的磷酸化通过与N，N-二异丙基 二苄基氨基亚磷酸酯反应来进行。\n1O.以上8的方法，其中步骤(f)(ii)的就地氧化用间氯过苯甲酸 (“mCPBA”)进行。\n11.以上8的方法，其中步骤(g)(i)的氢解用载于活性炭上的钯进 行。\n12.以上8的方法，其中步骤(g)(ii)的酸化用乙酸进行。\n13.以上8的方法，其中步骤(b)(ii)的苄化通过与氟化铯和苄基 溴反应进行。\n14.以上8的方法，其中步骤(c)的转变通过与(+)-氯甲酸酯酰 化来进行。\n15.以上8的方法，其中在步骤(d)中1-O-(+)-氧基羰基]-6-O- 苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇用甲醇重结晶。\n16.一种制备对映体纯的L-肌醇1，4，5-三磷酸酯的方法，包括下 列步骤：\n(a)将中1-O-[(+)-氧基羰基]-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌 醇水解而形成(-)-6-O-苄基-2，3：4，5-O-亚异丙基肌醇；\n(b)将步骤(a)的产物通过与PCl3和咪唑反应转变成(±)-6-O-苄基- 2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇H-膦酸酯；\n(c)用(-)-氯甲酸酯酰化(±)-6-O-苄基-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇 H-膦酸酯而得到3-O-[(+)-氧基羰基]-4-O-苄基-1，2：5，6-二-O-亚异丙 基肌醇；\n(d)从步骤(c)的产物结晶3-O-[(+)-氧基羰基]-4-O-苄基-1，2：5，6- 二-O-亚异丙基肌醇；\n(e)通过下列步骤将3-O-[(+)-氧基羰基]-4-O-苄基-1，2：5，6-二-O- 亚异丙基肌醇转变成(+)-4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基肌醇3，5，6-三(二苄 基磷酸酯)：\n(i)将3-O-[(+)-氧基羰基]-4-O-苄基-1，2：5，6-二-O-亚异丙基肌醇 磷酸化而产生4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基肌醇3，5，6-三(二苄基亚磷酸 酯)；和\n(ii)就地将步骤(i)的产物氧化而产生(+)-4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基 肌醇3，5，6-三(二苄基磷酸酯)；\n(f)从步骤(e)的产物分离(+)-4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基肌醇3，5，6- 三(二苄基磷酸酯)；\n(g)将(+)-4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基肌醇3，5，6-三(二苄基磷酸酯)氢 解而产生L-1，2-O-亚异丙基肌醇3，5，6-三磷酸酯；和\n(h)将L-1，2-O-亚异丙基肌醇3，5，6-三磷酸酯酸化而得到L-肌醇 3，5，6-三磷酸酯。\n17.以上16的方法，其中3-O-[(+)-氧基羰基]-4-O-苄基-1，2：5，6- 二-O-亚异丙基肌醇在步骤(b)中用甲醇重结晶。\n18.以上16的方法，其中步骤(c)(i)的磷酸化用N，N-二异丙基二 苄基氨基亚磷酸酯进行。\n19.以上16的方法，其中步骤(c)(ii)的就地氧化用间氯过苯甲酸 进行。\n20.以上16的方法，其中4-O-苄基-1，2-O-亚异丙基肌醇3，5，6-三 (二苄基磷酸酯)在步骤(d)中使用SiO2层析进行分离。\n21.以上16的方法，其中步骤(d)的氢解使用载于活性炭上的钯 进行。\n22.以上16的方法，其中步骤(f)的酸化用乙酸进行。\n23.以上16的方法，其中步骤(a)的水解在甲醇中用碳酸钾进行。\n图式1：D-IP3的合成\n图式2：L-IP3的合成\n图式3：3HP的合成\n具体实施方式\n本发明可通过下列实施例更好地理解。但是，本领域技术人员易 于理解这些实施例只是用于其后权利要求书中定义的本发明的说 明。本领域技术人员可通过本发明的说明容易地在本发明的范围内 对本发明的化合物、反应剂、反应图式和其它条件进行修改。\n实施例\n实施例1\n层析\n所有快速层析(flash)和SiO2层析均使用KieselgelTM 60(EM Science)进行。所有化合物均使用薄层层析(KieselgelTM 60，涂布在铝 片上)判断纯度。\n实施例2\nD4P的合成\n按照Gigg等人或de laPradilla等人的方法(其内容通过引用并入 本文)将肌醇(参见图式1)转变成(±)-2，3：4，5-二-O-亚异丙基肌醇。(±)-2 的区域选择性单苄基化通过一种O-甲锡烷基化中间体以60％收率形 成易于通过快速层析(己烷∶乙酸乙酯4∶1)纯化的(±)-6-O-苄基-2，3：4，5- 二-O-亚异丙基肌醇(“(±)-3”)来完成。使用(+)-氯甲酸酯将(±)-3转变 成外消旋的4P。\n通过在甲醇中重结晶从外消旋4P中分离出D4P(mp 128-131℃)。\n实施例3\nD-IP3的合成\n用对甲苯磺酸吡啶鎓将D4P(参见图式1)的反式缩酮选择性水解 后，在甲醇中用碳酸酯进行碱水解，通过快速层析纯化后以40％ 的收率获得所述三醇(±)-6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌醇(5，[α]D 24℃+21° (c 0.43，CHCl3)；文献值(de la Pradilla等)[α]D+15°(c0.6，CH3OH))。 所述三醇也可以32％的收率使用己烷∶乙酸乙酯(4∶1)从粗反应混合物 结晶。用N，N-二异丙基-二苄基氨基亚磷酸酯(Fraser-Reid试剂)将所 述三醇磷酸化后就地用mCPBA氧化，通过快速层析纯化后以92％ 的收率获得6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌醇。经载于活性炭上的钯氢 解得到6-O-苄基-2，3-O-亚异丙基肌醇，接着用乙酸酸化以定量的收 率得到D-IP3([α]D 24℃-20°(c0.05，H2O，pH9)；文献值(Liu等)：[α]D-30° (c0.5，H2O，pH9.5))。\n实施例4\nL-IP3的合成\n将按上文实施例1所述制备的(±)-3与(-)-氯甲酸酯反应(参见图 式2)后用甲醇结晶得到对映体纯的L4M(mp 130-131℃)，为D4P的 对映体。按照上文实施例3中所述的同样图式，但是使用L4M代替 D4P作为原料(参见图式2)以类似的收率得到L-IP3([α]D 24℃+17°(c0.30， H2O，pH10))。\n实施例5\n3-HP的合成\n在甲醇中用碳酸钾水解D4P(参见图式3)并在柱层析(己烷∶乙酸 乙酯4∶1)后以定量收率得到(-)-3([α]D 24℃-17.4°(c1.69，CHCl3)；文献值 (Chen等)：([α]D-16°(c0.9，CHCl3))。用PCl3和咪唑转变成相应的H- 膦酸酯而以70％的收率获得产物3-HP。3-HP是一种无色的液体， 在-20℃下可稳定几个月。