一种利用纳米材料脱除银杏叶提取物中银杏酸和重金属的方法

1.一种利用纳米材料脱除银杏叶提取物中银杏酸和重金属的方法，其特征在于，包括以下步骤完成：
第1步提取：银杏叶分别加入60-70％乙醇，银杏叶与乙醇溶液的配比为5W/V～10W/V，回流提取至少2次，每次1-3小时，合并提取液，减压回收乙醇，加入3-5倍银杏叶重量的水，静置，过滤，滤液备用；
第2步柱层析：采用活化后的AB-8、HP-20、DA201、D101这4种树脂中的任意一种装柱，将提取所得的滤液上柱，用3-6倍体积量水洗柱，采用2-4倍树脂床体积的60％-80％乙醇解吸，收集乙醇洗脱部分备用；
第3步纳米材料吸附：在收集的乙醇洗脱液中加入0.01W/V％-1W/V％的四氧化三铁纳米材料，超声吸附0.5h-8h，并在此过程中用于同时脱除银杏酸和重金属；
第4步纳米材料分离：采用永磁或电磁将四氧化三铁纳米材料吸附，完成固液分离；
第5步分离液浓缩干燥：真空干燥或喷雾干燥；
第6步纳米材料回收：将纳米材料分离步骤得到的四氧化三铁纳米材料收集，以
0.05％-2％盐酸浸泡0.5-24h，然后用去离子水冲洗数次后干燥即可。

一种利用纳米材料脱除银杏叶提取物中银杏酸和重金属的\n方法\n技术领域\n[0001] 本发明属于天然产物制备技术领域，具体涉及一种利用纳米材料吸附作用脱除银杏叶提取物中银杏酸和重金属的方法。\n背景技术\n[0002] 银杏叶为银杏科植物银杏(Ginkgo biloba L.)的干燥叶，性甘、苦、涩、平，归心、肺经，具有敛肺、平喘、活血化瘀、止痛等作用，用于冠心病、心绞痛和高脂血症。银杏叶提取物为银杏叶经加工制成的提取物，活血化瘀通络，用于治疗瘀血阻络引起的胸痹心痛、中风、半身不遂、舌强语塞；冠心病稳定型心绞痛、脑梗死见上述证候者。银杏叶和银杏叶提取物作为原料，被广泛用于治疗心脑血管疾病的制剂，仅《中国药典》就收载了包括银杏叶在内的5个相关品种，《欧洲药典》规定了银杏叶和银杏叶提取物的标准，《美国药典》也将银杏叶及其制剂作为食品补充剂收录。但银杏制剂中还含有一种有毒成分-银杏酸，具有致敏性、细胞毒性等作用，所以国际标准要求银杏酸的含量小于5ppm，同时要求重金属含量小于10ppm。我国目前生产的银杏制剂中银杏酸和重金属的含量大大超过国际标准。导致我国大部分银杏叶提取物生产企业处于停产或半停产的状态，如何有效除去银杏叶提取物中的银杏酸和重金属是当前我国化学工作者研究的主要问题。\n[0003] 目前，脱除银杏酸的方法有：(1)Schwabe公司提出的的丙酮提取+萃取；(2)丙酮提取+层析+有机溶剂萃取；(3)乙醇提取+层析+有机溶剂萃取；(4)超临界萃取。溶剂萃取极易产生乳化而导致生产时间延长和萃取不完全，产品中会有溶剂残留，同时对操作人员和环境不友好。专利文献“银杏叶提取物中银杏酚酸的脱除工艺”(CN101194918A)采用双柱叠加办法去除银杏酸，但是造作比较复杂，且双柱的预处理和活化会产生一定量的工业废水。\n[0004] 银杏叶提取物中银杏酸和重金属含量超标是制约我国银杏叶提取物出口的瓶颈，同时也影响了国内制药的安全性。\n发明内容\n[0005] 本发明的目的在于提供一种利用纳米材料脱除银杏叶提取物中银杏酸和重金属的方法，该方法具有环境友好，同时去除银杏酸和重金属的双重效果。\n[0006] 本发明提供的一种利用纳米材料脱除银杏叶提取物中银杏酸和重金属的方法，该方法通过提取、柱层析、纳米材料吸附、纳米材料分离、分离液浓缩干燥得到银杏叶提取物；\n所述纳米材料为四氧化三铁纳米材料，所述纳米材料分离技术为磁分离技术。\n[0007] 作为上述技术方案的一种改进，该方法还包括纳米材料回收步骤。\n[0008] 作为上述技术方案的另一种改进，所述提取包括下述具体过程：银杏叶分别加入\n60-70％乙醇，银杏叶与乙醇溶液的质量体积比为1∶5-1∶10，回流提取至少2次，每次\n1-3小时，合并提取液，减压回收乙醇，加入3-5倍银杏叶重量的水，静置，过滤，滤液备用。\n[0009] 作为上述技术方案的再一种改进，所述柱层析包括下述具体过程：采用活化后的AB-8、HP-20、DA201、D101这4种树脂中的任意一种装柱，将提取步骤中所得的滤液，用3-6倍树脂床体积的水洗柱，采用2-4倍树脂床体积的60-80％乙醇解吸，收集乙醇洗脱部分备用。\n[0010] 作为上述技术方案的进一步改进，所述纳米材料吸附下述具体过程：在收集的乙醇洗脱液中加入四氧化三铁纳米材料，四氧化三铁的质量与乙醇洗脱液体积之比为\n0.01％-1％，超声吸附0.5-8h。\n[0011] 作为上述技术方案的再进一步改进，所述分离液浓缩干燥的方式为真空干燥或喷雾干燥。\n[0012] 作为上述技术方案的更进一步改进，所述纳米材料回收过程为：将纳米材料分离步骤得到的四氧化三铁纳米材料收集，以0.05％-2％盐酸浸泡0.5-24h，然后用去离子水冲洗数次后干燥。\n[0013] Fe3O4纳米材料与邻苯二酚及其衍生物有较高的亲和力，因此选择性吸附一些羧基或邻位酚羟基的植物化学物质。银杏总酸包括银杏酸、银杏漆酚、异银杏漆酚、白果酸等，其基本结构均具有羧基或邻酚羟基，Fe3O4纳米材料可以吸附银杏酸、漆酚、异漆酚等，利用磁分离技术将银杏总酸从母液中分离。本发明的优点在于利用Fe3O4纳米材料不仅可以去除银杏酸，而且可以去除重金属，达到一举两得之功效，同时还可以将Fe3O4纳米材料通过酸洗回收再利用，工业化大生产富集的银杏酸可制作生物杀虫剂及其他用途。\n具体实施方式\n[0014] 本发明具体实施方式提供的利用纳米材料脱除银杏叶提取物中银杏酸和重金属的方法，具体通过以下步骤完成的：\n[0015] 第1步提取：银杏叶分别加入60-70％乙醇，银杏叶与乙醇溶液的配比为5-10(W/V)，回流提取至少2次，每次1-3小时，合并提取液，减压回收乙醇，加入3-5倍银杏叶重量的水，静置，过滤，滤液备用。\n[0016] 第2步柱层析：采用活化后的AB-8、HP-20、DA201、D101这4种树脂中的任意一种装柱，将提取所得的滤液上柱，用3-6倍体积量水洗柱，采用2-4倍树脂床体积的60-80％乙醇解吸，收集乙醇洗脱部分备用。\n[0017] 第3步纳米材料吸附：在收集的乙醇洗脱液中加入0.01-1％(W/V)的四氧化三铁纳米材料，超声吸附0.5-8h。\n[0018] 第4步纳米材料分离：采用永磁或电磁将四氧化三铁纳米材料吸附，完成固液分离。\n[0019] 第5步分离液浓缩干燥：真空干燥或喷雾干燥。\n[0020] 第6步纳米材料回收：将纳米材料分离步骤得到的四氧化三铁纳米材料收集，以\n0.05％-2％盐酸浸泡0.5-24h，然后用去离子水冲洗数次后干燥即可。\n[0021] 下面结合实例对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及到的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。\n[0022] 实施例1\n[0023] 取银杏叶500g，加入10，8倍量60％乙醇，分别回流提取2h，滤取药液，合并，减压回收乙醇至药液不含醇，然后加水至1500ml，静置，过滤，滤液加于已处理DA201树脂柱，纯净水过柱清洗，当流出液较清亮时，用2000mL80％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，加入0.2g四氧化三铁纳米材料，超声吸附2h，磁铁放入药液中吸附四氧化三铁纳米材料，药液减压浓缩回收乙醇，浸膏真空干燥。收集四氧化三铁纳米材料，放入0.1％盐酸中浸泡4h，磁分离，去离子水冲洗数次，真空干燥备用。干燥后银杏叶提取物称重、取样测定总黄酮、总内酯、银杏酸以及重金属含量。结果为：银杏叶提取物9.1g，总黄酮含量为28.3％，总内酯8.6％，银杏酸2ppm，重金属4ppm。\n[0024] 实施例2\n[0025] 取银杏叶500g，加入8，6倍量70％乙醇，分别回流提取1.5h，滤取药液，合并，减压回收乙醇至药液不含醇，然后加水至1500ml，静置，过滤，滤液加于已处理D101树脂柱，纯净水过柱清洗，当流出液较清亮时，用2500mL80％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇至药液含固量达1.08-1.10时，停止浓缩，药液中加入0.5g四氧化三铁纳米材料，超声吸附5h，电磁铁放入药液中吸附四氧化三铁纳米材料，药液减压浓缩，含固量达1.25-1.30时，喷雾干燥。收集四氧化三铁纳米材料，放入1％盐酸中浸泡2h，磁分离，去离子水冲洗数次，真空干燥备用。干燥后银杏叶提取物称重、取样测定总黄酮、总内酯、银杏酸以及重金属含量。结果为：银杏叶提取物10.2g，总黄酮含量为27.2％，总内酯8.2％，银杏酸2ppm，重金属5ppm。\n[0026] 实施例3\n[0027] 取银杏叶500g，加入10，5倍量70％乙醇，分别回流提取3h，滤取药液，合并，减压回收乙醇至药液不含醇，然后加水至1500ml，静置，过滤，滤液加于已处理AB-8树脂柱，纯净水过柱清洗，当流出液较清亮时，用2000mL60％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，加入1.0g四氧化三铁纳米材料，超声吸附8h，磁铁放入药液中吸附四氧化三铁纳米材料，药液减压浓缩，含固量达1.25-1.30时，喷雾干燥。收集四氧化三铁纳米材料，放入2％盐酸中浸泡24h，磁分离，去离子水冲洗数次，真空干燥备用。干燥后银杏叶提取物称重、取样测定总黄酮、总内酯、银杏酸以及重金属含量。结果为：银杏叶提取物8.8g，总黄酮含量为26.6％，总内酯\n7.4％，银杏酸1ppm，重金属3ppm。\n[0028] 实施例4\n[0029] 取银杏叶500g，加入10，8倍量65％乙醇，分别回流提取2h，滤取药液，合并，减压回收乙醇至药液不含醇，然后加水至1500ml，静置，过滤，滤液加于已处理HP-20树脂柱，纯净水过柱清洗，当流出液较清亮时，用2800mL80％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇至药液含固量达1.08-1.10时，停止浓缩，加入5.0g四氧化三铁纳米材料，超声吸附3h，磁铁放入药液中吸附四氧化三铁纳米材料，药液减压浓缩，含固量达1.25-1.30时，喷雾干燥。收集四氧化三铁纳米材料，放入2％盐酸中浸泡3h，磁分离，去离子水冲洗数次，真空干燥备用。干燥后银杏叶提取物称重、取样测定总黄酮、总内酯、银杏酸以及重金属含量。结果为：银杏叶提取物9.5g，总黄酮含量为28.6％，总内酯7.6％，银杏酸1ppm，重金属2ppm。\n[0030] 本发明中，乙醇和盐酸的浓度均是指体积百分比浓度。\n[0031] 以上所述为本发明的较佳实施例而已，但本发明不应该局限于该实施例所公开的内容。所以凡是不脱离本发明所公开的精神下完成的等效或修改，都落入本发明保护的范