一种防治短暂脑缺血综合症的中药胶囊

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一种防治短暂脑缺血综合症的中药胶囊\n一、技术领域本发明是涉及一种医学上防治疾病用的中药，特别是一种防治短暂脑缺血综合症的中药胶囊。\n二、背景技术\n短暂性脑缺血综合症(TIA)是一种常见之疾，对人的身心健康影响很大，其病症是因颈动脉或椎茎底动脉系统发生暂时性的血液供给不足，造成某一区域脑组织因缺血而发生的一过性局灶性神经功能障碍，多见于50岁以上男性，目前治疗此症药物很多，主要有阿司匹林、潘生丁、烟酸、尼莫地平、丹参注射液等等，但由于种种原因，人们并不满足对这些药物的治疗应用，对新药的研制势在必行。\n三、发明内容\n针对上述情况和实际防治短暂脑缺血的需要，本发明之目的就是提供一种防治短暂脑缺血综合症的中药胶囊，又称脑脉舒康，该中药胶囊是由西洋参、五味子、葛根、何首乌、山楂和地黄制成，其中西洋参粉碎加乙醇浸渍渗漉，回收乙醇，得西洋参乙醇提取物，五味子、葛根、何首乌、山楂和地黄混合水煎提取2次，合并2次提取液，浓缩，干燥后，与西洋参乙醇提取物混合粉碎装于胶囊，本发明使用效果好，原材料丰富，易生产，易推广应用，是中药学上的一个创造，为防治短暂脑缺血开辟了新的途径，造福于人类。\n四、具体实施方式\n以下结合具体实施方式对本发明作详细说明。\n由前所述，本发明中药胶囊，是由重量计的：西洋参11-12％、五味子27-29％、葛根16-18％、何首乌13-15％、山楂16-18％和地黄13-15％，总量为100％制成，其中西洋参粉碎加其10倍量的质量浓度为95％的乙醇浸渍72小时后渗漉，回收乙醇，得西洋参乙醇提取物，再将五味子、葛根、何首乌、山楂和地黄混合水煎提取2次，第一次加五味子、葛根、何首乌、山楂和地黄总量的10-12倍量的水煎煮提取。1.5小时，再加8-10倍量的水煎煮1小时，第2次提取，合并2次提取液浓缩干燥后，与西洋参乙醇提取物混合，粉碎，装入胶囊。\n上述药物最佳是由重量计的：西洋参11.11％、五味子27.77％、葛根16.67％、何首乌13.89％、山楂16.67％和地黄13.89％制成，其制备情况如前述，即西洋参用乙醇浸渍渗漉得乙醇提取物，其余药物水煮2次，合并2次水煎液，浓缩、干燥后与西洋参乙醇提取物混合，粉碎装入胶囊。\n以组份药总量3600克为例，其该中药胶囊是由西洋参400g、五味子1000g、葛根600g、何首乌500g、山楂600g和地黄500g制成，其中西洋参经粉碎加4000ml的95％乙醇浸渍7小时，渗漉，回收乙醇，得乙醇提取物，再将五味子、葛根、何首乌、山楂和地黄混合加入32000ml的水煎煮一次，得煎液，再加入25600ml的水煎煮第2次，合并2次煎液，浓缩干燥后与西洋参乙醇提取物混合粉碎，装入胶囊。\n在其上述药物中，西洋参补气养阴，清热生津；五味子收敛固涩，益气生津，补肾宁心；葛根解肌透疹，生津止渴；何首乌生者通大便，解疮毒，制药补肝肾，益精髓、乌须发；山楂消积化痞，破气散瘀；地黄消热凉血、滋阳养血，由上述各药份的功能可以看出，这些药物的合理配伍，可有效解决引起短暂脑缺血之病因，并经动物实验所证实。其实验情况如下：1、对大鼠局灶性脑缺血模型的影响取250-280g雄性健康大鼠60只随机均匀分为6组，分别灌服大中小剂量(1.5g/kg、1g/kg、0.5g/kg)的脑脉舒康胶囊混悬液、华佗再造丸混悬液及同体积生理盐水(2组)，每天给药1次，连续给药7天，于最后1次给药后水合氯醛麻醉大鼠，于颞下开颅窗，暴露右侧大脑中动脉，用电激器凝闭嗅束与大脑下静脉之间的一段大脑中动脉。缝合伤口，回笼饲养。大鼠清醒后，选择大脑中动脉阻断4h、8h、24h为时间点，按bedron法进行神经行为学分级。未次分级后，断头取脑，置生理盐水中(4℃)去除嗅球、小脑及脑干，平均冠状切入刀，共5个脑片，迅速放入TTC染液中(1.2％TTC4.gml，1mol/LH2HPO40.1ml)，37℃避光浴至正常脑组织变为玫瑰色，梗死区呈白色。用图像分析仪，落点求积法，称重法求出5小脑片的切面总面积及梗死面积。将染色后的脑组织置甲醛深液中固定，经腹水包埋切片、染色，进行组织形态学检查。\n大、中、小剂量脑脉舒康组均可显著或明显改善大鼠局灶性脑缺血模型大脑中动脉阻断后4h(24h)神经症状，大、中、小剂量脑脉舒康组可显著减少大鼠局灶性脑缺血模型脑梗死范围(p＜0.01)。\n2、对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用取250-280g雄性大鼠，分组及给药同上。并于第7日手术前1h追加1次。乌拉坦麻醉大鼠，分离出大鼠颈总动脉，放置手术线套扣待用。固定动物尾部向后拉紧，使动物颈部脊髓分开，以观察和电凝翼状孔下的推动脉。背部正中线切口，暴露第一推翼状孔，其下有椎功脉能过，电极插入并电凝灼断，要求不损失脑干。24h后动物已清醒，操纵外置套扣，关闭双侧颈总动脉形成全脑缺血。30min后放总动脉套扣，使脑前血流再通，缺血后及重灌期间以多道生理记录仪在不同的时间点描记大鼠脑电图(EEG)，观察EEG消失时间和再灌后恢复正常时间，翻正反复反射恢复时间，动物行为(脑缺血症状)，重灌后断头测定脑内活性物质及观察脑组织形态学变化情况。\n与模型组比，大、中、小脑脉舒康组可明显或最著提高大鼠脑缺血再灌注后5-HT、NE、、DA水平(p＜0.05)。大、中、小剂量脑脉舒康组可明显降低LPO水平(p＜0.05)，显著提高SOD水平(p＜0.01)，明显或显著提高GSH-PX水平(p＜0.05m，p＜0.01)。与模型组比，大、中、脑脉舒康组可显著降低大鼠脑缺血再灌注损伤模型脑含水量和脑指教(p＜0.01)。\n3、对小鼠断头缺血模型的影晌取18-20g雄性小鼠2批，一批50只，断头后视察呼吸情况，分组及给药均同前(剂量为2g/kg、1.5g/kg、1g/kg)，每天给药1次，连续给药7天，于最后2mm处迅速断头，造成急性脑缺血，记录小鼠的呼吸次数及呼吸维持时间。另一批60只，断头30秒后测各种指标，空白对照组断头后立即匀浆。小鼠断头后停留一定时间后，立即置于液氮中，于冷冻脑组织中加入0.1mol/L盐酸，99％乙醇溶液5ml制成匀浆，再加0.3ml/L高氯酸(含1mmol/L EDTA)溶液2.5ml，混匀后以3000r/min，4℃离心10min，上清液中加入1.5mol/L氧气化钾、0.4mol/L咪唑和0.3mol/L氯化钾的混合液0.45ml，1000r/min，离心10min，上清液置于20℃，用酶学法测定脑组织中的ATP、PCr和乳酸(LA)含量。\n大、中、小剂量脑脉舒康组可显著或明显提高小鼠断头缺血模型呼吸次数和延长呼吸维持时间(p＜0.01，p＜0.05)。大、中、小剂量脑脉舒康组可显著提高小鼠断头缺血模型脑组织中ATP、PC水平，降低LA水平(P＜0 01)。\n4、对大鼠软脑膜微循环障碍的影晌取SD雄性大鼠50只，体重260-290g，随机均匀分为5组，灌药剂量时间同实验1，于第7天，戊巴比妥钠麻醉，剪开硬脑膜，暴露大脑半球的额顶区，采用冷光源45度角投照，用解剖显微镜固定入视野，观察大脑半球表面软胞膜的微循环10％高分子右旋糖苷(5ml/kg)静脉给药，第10分钟再观察微循环情况。\n大、中、小剂量脑脉舒康组给药后血流速度明显快于对照组(P＜005)；给药前各组血流速度无明显差异，给药后血液流态明显快于对照组(P＜005)。\n5、对小鼠短暂性脑缺血模型的干预作用昆明种小鼠70只，雌雄各半，体重19-21g，随机均匀分为7组，分别灌服大、中、小剂量脑脉舒康胶囊(1.8g/kg，0.9g/kg，0.45g/kg，配成浓度为90mg/ml，45mg/ml，22.5mg/ml，)、尼莫地平(0.03g/kg，配成1.5mg/ml，)、复方血栓通(1.125g/kg，配成56.25mg/ml)及同体积(灌胃体积均为0.2ml/10g)的生理盐水(为二组：手术组及假手术组)，每天给药1次，连续给药7天，于第8天给药后1h，禁食后10h，4％水含氯醛0.1ml/10g腹腔注射麻醉，小鼠板固定，作颈部正中切口，分离双侧颈总动脉，动脉下各置一条合适长度的手术线，把直径约为0.3mm的针灸针与血管一起结扎，10min后轻轻抽出针灸针，完成再灌注，其中空白组作假手术处理，即除了不结扎双侧颈总动脉外，其它操作同造模各组。再灌15min后眼球取血，3000转/分离心10-15分取血清按试剂盒说明操作分别测定SOD、MDA；快速取脑，取出的脑矢正中缝切开，一半作冠状切片，取中间及顶叶部分一片放入10％福尔马林液中，用作病理切片，其余称重后放于80℃恒温箱中，24h后开始称重，待恒重后计算脑含水量。\n另一半脑称重，加9倍生理盐水匀浆，制成10％的脑匀浆，按试剂盒说明操作分别测定LD的含量、MDA的含量，另制成2％的脑匀浆，按试剂盒说明操作分别测定Na+K+-ATPase、Mg++-ATPase、Ca++-ATPase和Ca++Mg++-ATPase活力、LDH的活力，制成1％的脑匀浆按试剂盒说明操作测定SOD的活力。\n对脑能量代谢的影响：与假手术组比，模型组脑匀浆中Na++K++-ATPase、Mg++-ATPase、Ca++-ATPase和Ca++Mg++-ATPase活力均显著降低，说明短暂性脑缺血模型复制成功；与模型组比，脑脉舒康胶囊大、中、小剂量组各ATP活力均显著升高。与假手术组比，模型组的乳酸含量显著升高、乳酸脱氢酶活力显著降低；与模型组比，脑脉舒康胶囊大、中、小剂量组可显著降低脑组织中乳酸含量、显著升高脑组织中乳酸脱氢酶活力。其作用与尼莫地平组和复方血栓通组一致，以中剂量脑脉舒康组作用最强。提示脑脉舒康胶囊可显著改善小鼠短暂性脑缺血模型脑组织的能量代谢，改善脑部血液供应。\n对脑组织中抗氧化能力影响：与假手术组比，模型组脑组织中SOD活力显著降低、MDA含量显著升高；与模型组比，脑脉舒康胶囊大、中、小剂量组可明显或显著升高脑组织中SOD活力、明显或显著降低脑组织中MDA含量。其作用与尼莫地平组和复方血栓通组一致，以中剂量脑脉舒康组作用最强。提示脑脉舒康胶囊可显著提高小鼠短暂性脑缺血模型脑组织的抗氧化能力。\n对脑水肿的影响：与假手术组比，模型组脑含水量显著增多。大、中剂量脑脉舒康组可明显降低脑组织含水量。提示脑脉舒康胶囊有预防小鼠短暂性脑缺血模型发生脑水肿的作用。\n对脑组织显微结构的影响：模型组动物脑神经细胞的损伤表现为细胞体积缩小，其病理特征：树突、轴突减少，尼氏小体消失，细胞及核呈嗜酸性改变，结构模糊等退行性改变，与假手术组有显著的不同，胶质细胞也明显减少，证明造模成功。用药各组具有拮抗脑缺血所造成脑神经细胞的损伤及胶质细胞减少的病理改变。增强脑神经细胞及胶质细胞耐缺氧的作用。以中剂量脑脉舒康组的作用最强，使脑神经细胞体积明显增大，细胞及细胞核呈嗜碱性改，说明除增强细胞能量代谢的作用外，也具有增强核酸代谢的作用；可拮抗脑缺血对脑神经细胞及胶质细胞的影响，增强脑神经细胞和胶质细胞的耐缺氧作用。其作用与血栓通及尼莫地平组一致。\n6、脑脉舒康胶囊对大鼠血瘀合并短暂性脑缺血模型干预作用实验取大鼠80只，wistar，体重180～200g，雄性，随机均匀分为8组，分别灌服大、中、小剂量脑脉舒康胶囊(0.9g/kg，0.6g/kg，0.3g/kg，配成浓度为45mg/ml，30mg/ml，15mg/ml，)、尼莫地平(0.02g/kg，配成0.1mg/ml，)、复方血栓通(0.9g/kg，配成45mg/ml)及同体积(灌胃体积均为2ml/100g)的生理盐水(为三组：空白组为不造血瘀模型但作手术组；手术组为造血瘀模型也作手术组；假手术组为造血瘀但不作手术组)，每天给药1次，同时每天大腿内侧肌肉注射地塞米松0.2mg/kg(空白组注射生理盐水)，每天换腿，连续给药10天，于第11天给药后1h，禁食后10h，10％水含氯醛0.35ml/10g腹腔注射麻醉，作颈部正中切口，分离双侧颈总动脉，动脉下各置一条合适长度的手术线，结扎血管，其中假手术组除了不结扎双侧颈总动脉外，其它操作同造模各组。30min后断头取血，肝素抗凝，测全血粘度及红细胞聚集指数，一部分枸橼酸钠抗凝，测TT、PT、APTT；快速取脑，一半放入10％福尔马林液中，用作病理切片，另一半称重，加9倍生理盐水匀浆，制成10％的脑匀浆，按试剂盒说明操作分别测LD、NO、NOS、ET、SOD、MDA、TAA、谷氨酸、降钙素基因相关肽等指标。部分再稀释成2％的脑匀浆，按试剂盒说明操作分别测ATP、LDH，部分再稀释成1％的脑匀浆，按试剂盒说明操作测SOD。\n对血粘度的影响：与空白组比，模型组全血粘度值(高切、中切、低切)均显著升高，表明造模成功；与模型组比，脑脉舒康胶囊大、中、小剂量组可使全血粘度值(高切、中切、低切)显著降低；以大、中剂量脑脉舒康组的作用最强；其作用与尼莫地平组和复方血栓通组一致。提示脑脉舒康胶囊可显著降低大鼠血瘀合短暂性脑缺血模型的血液粘度。\n对血液凝聚的影响：与空白组比，模型组TT、PT、APTT值均显著降低，表明血瘀模型成功；与模型组比，脑脉舒康胶囊大、中剂量组可显著升高TT、PT、APTT值；以中剂量脑脉舒康组的作用最强。其作用与尼莫地平组和复方血栓通组一致。提示脑脉舒康胶囊可显著延长大鼠血瘀合并短暂性脑缺血模型的血液凝聚时间。\n对脑细胞能量代谢的影响：与假手术组比，模型组脑匀浆中Na+K+-ATPase、Mg++-ATPase、Ca++-ATPase活力均显著降低，说明短暂性脑缺血模型复制成功；与模型组比，脑脉舒康胶囊大、中、小剂量组可显著升高脑组织中Na+、K+、ATPase、M++-ATPase、Ca+-ATPase活力。其作用与尼莫地平组和复方血栓通组一致；以中剂量脑脉舒康组的作用最强。与假手术组比，模型组的乳酸含量显著升高、乳酸脱氢酶活力显著降低；与模型组比，脑脉舒康胶囊大、中、小剂量组可显示著降低脑组织中乳酸含量、显著升高组织中乳酸脱氢酶活力。其作用与尼莫地平组和复方血栓通组一致，以中剂量脑脉舒康组作用最强。提示脑脉舒康胶囊可显著改善大鼠血瘀合并短暂性脑缺血模型组织的能量代谢，改善脑部血液供应。\n对脑组织中抗氧化能力及氧自由基的影响：与假手术组比，模型组脑组织中NO和NOS含量均显著升高，脑组织中SOD活力显著降低；与模型组比，脑脉舒康胶囊大、中、小剂量组可显著降低大鼠血瘀合并短暂性缺缺血模型脑组织中NO和NOS水平，显著升高脑组织中SOD活力。其作用与尼莫地平组和复方血栓通组一致，以中剂量脑舒康组作用最强。提示脑舒康胶囊可显著提高大鼠血瘀合并短暂性脑缺血模型脑组织的抗氧化能力。\n对脑组织总氨基酸和谷氨酸含量的影响：与假手术组比，模型组脑组织中Gtu(谷氨酸)和T-AA(总氨基酸)含量均显示著升高：与模型组比，脑脉舒康胶囊大、中、小剂量组可使模型脑组织GIu和TAA水平显著降低。其作用与尼莫地平组和复方血栓通组一致。提示脑脉康胶囊可改善脑循坏、显著升高大鼠血瘀合短暂性脑缺血模型脑组织抑制性活性肽水平、显著降低兴奋性活性肽水平。\n对脑组织ET和CGRP的影响：与假手术组比，模型组脑组织中ET水平显著升高、CORP水平显著降低；与模型组比，脑脉舒康胶囊大、中、小剂量组可显著或明最降低模型脑组织中ET水平、显著升高脑组织中CGRP水平。其作用与尼莫地平组和复方血栓通组一致；以大、中剂量脑脉舒康组作用最强。提示脑脉舒康胶囊可显著改善大鼠血瘀合短暂性脑缺血模型血管的收缩，改善脑部供血。\n对脑组织显微结构的影响：模型组的动物脑神经细胞出现溶解现象，而胶质细胞少数也出现溶解现象与假手术和空白对照组相比，有很大的不同。证明缺血动物模型所造成细胞的部分溶解这一病理改变，说明动物模型复制成功。脑脉舒康胶囊具有拮抗脑缺血所造成的部分细胞自溶的病理改变，增强脑细胞脑缺氧的作用，并显示随着剂量的增加而作用增强，成正相关；对脑缺血所造成的脑神经细胞损伤有着明显的拮抗作用，和增强脑细胞的耐缺氧作用。以中剂量脑脉舒康组作用最强：总之，本发明有很好的改善短暂脑缺血综合症的作用，对中药是一个创造性贡献，具有临床应用的实际价值，并必会造益于人类。