棉花专用生物有机肥及其制备方法

1.一种棉花专用生物有机肥，其特征在于，包括复合菌剂10-25重量份、载体75-90重量份；其中，所述复合菌剂中含有枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)2.5-15亿cfu/g、里氏木霉(Trichoderma harzianum)0.5-4.0亿cfu/g、刺孢吸水链霉菌(Streptomyces hygrospinosus)0.5-4.0亿cfu/g；所述载体为豆粕饼、菜籽饼、芝麻饼、朴树叶经过微生物堆腐发酵、干燥过筛处理的粉状物；其中优选朴树叶在所述载体的添加量为0.5％-2％。
2.根据权利要求1所述的棉花专用生物有机肥，其特征在于，包括复合菌剂15-20重量份、载体80-85重量份；其中，所述复合菌剂中含有枯草芽孢杆菌5-12亿cfu/g、里氏木霉1-3.2亿cfu/g、刺孢吸水链霉菌1-3.2亿cfu/g；其中优选朴树叶在所述载体的添加量为0.8％-1.6％。
3.根据权利要求1所述的棉花专用生物有机肥，其特征在于，包括复合菌剂16重量份、载体84重量份；所述复合菌剂中含有枯草芽孢杆菌10.0亿cfu/g、里氏木霉2.5亿cfu/g、刺孢吸水链霉菌2.5亿cfu/g；其中优选朴树叶在所述载体的添加量为1％。
4.根据权利要求1-3任一项所述的棉花专用生物有机肥，其特征在于，所述载体是由豆粕饼、菜籽饼、芝麻饼按重量比例1:1:1混合，经过微生物堆腐发酵而成；其中，优选地，所述堆腐发酵所需微生物包括枯草芽孢杆菌、里氏木霉；进一步优选地，所述发酵剂中枯草芽孢杆菌、里氏木霉两种微生物的活菌数比为8:1，总菌数为200亿/g，添加量为2.5kg/吨干物料。
5.根据权利要求4所述的棉花专用生物有机肥，其特征在于，所述载体的制备方法包括：将朴树叶用粉碎机粉碎，优选细度为过20目筛90％以上；将豆粕饼、菜籽饼、芝麻饼按配比混匀，然后按配比加入朴树叶、微生物，混合均匀，调节水分至50％-60％，堆高
1.0-1.5米，堆沤20-30天；
发酵初始时覆盖薄膜，待发酵堆中心温度在50℃以上时撤去薄膜，当发酵堆中心温度超过65℃时用翻堆机翻堆，发酵前10天适当补水，使得发酵堆水分维持50％-60％；如此反复操作，待发酵堆颜色变咖啡色或黑色，同时发酵堆温度降至30℃，水含量在30％以下结束发酵，将发酵好的物质烘干、破碎、过筛，即得载体。
6.根据权利要求1-5任一项所述的棉花专用生物有机肥，其特征在于，所述复合菌剂的制备方法，包括如下步骤：
I.枯草芽孢杆菌混合孢子粉的制备：将枯草芽孢杆菌原始菌种在无菌条件下依次进行斜面培养、摇床培养、发酵罐培养后，将得到的发酵液与玉米淀粉混合，经过浓缩干燥制备成枯草芽孢杆菌孢子粉；
II.里氏木霉孢子粉的制备：将里氏木霉原始菌种在无菌条件下分别依次进行斜面培养、摇床培养、发酵罐培养、固体发酵产孢后，将得到的完全产孢的孢子-基质混合物浸在清水中制成孢子悬浮液，从而得到里氏木霉孢子悬浮液，然后将得到的里氏木霉孢子悬浮液浓缩干燥制备成里氏木霉孢子粉；
III.刺孢吸水链霉菌菌粉的制备：将刺孢吸水链霉菌原始菌种在无菌条件下依次进行斜面培养、摇床培养、发酵罐培养后，将得到的发酵液与玉米淀粉混合，经过浓缩干燥制备成刺孢吸水链霉菌菌粉；
Ⅳ.将上述制得的枯草芽孢杆菌混合孢子粉、里氏木霉孢子粉、刺孢吸水链霉菌菌粉按比例混合，即得复合菌剂。
7.根据权利要求6所述的棉花专用生物有机肥，其特征在于，所述复合菌剂的制备步骤I、II、III具体包括：
I.枯草芽孢杆菌混合孢子粉的制备：
a.斜面培养：将枯草芽孢杆菌原始菌种在无菌条件下接种于斜面培养基上，在
35±2℃条件下培养36-48小时；
b.摇床培养：将步骤a培养的菌种在无菌条件下接种于种子培养基中，在pH 6.5-7.0、
35℃条件下，140-160r/min摇床培养12-18小时；
c.发酵罐培养：将步骤b培养的菌种在无菌条件下接种于液体发酵培养基中，在pH
7.5-8.0、罐压0.5kg、35℃、通风量1:0.8-1.1条件下，培养48-56小时后，活菌数大于
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1.0×10cfu/mL，80％菌体成为芽孢时下罐，得到发酵液；
d.将步骤c中得到的发酵液按等重量比混合玉米淀粉，经过浓缩干燥制备成枯草芽孢杆菌混合孢子粉；
其中，步骤a中使用的斜面培养基的配方如下：葡萄糖15g、鱼蛋白胨5g、酵母膏5g、琼脂15g和水1000mL；步骤b中使用的种子培养基配方如下：葡萄糖10g、牛肉膏5g、酵母粉
5g、淀粉10g、豆饼粉5g、KH2PO4 0.5g、MgSO4 0.2g和水1000mL；步骤c中使用的液体发酵培养基配方如下：玉米粉26kg、豆饼粉16kg、硫酸铵4kg、葡萄糖8kg、酵母粉2.5kg、蛋白胨
1.7kg和消泡剂50mL，加水至600L；
II.里氏木霉孢子粉的制备：
e.将里氏木霉原始菌种在无菌条件下接种于斜面培养基上，在28±2℃条件下培养48小时；
f.摇床培养：将步骤e培养的菌种在无菌条件下接种于种子培养基中，在pH6.5-6.8、
30℃条件下，160-200r/min摇床培养24小时；
g.发酵罐培养：将步骤f培养的菌种在无菌条件下分别接种于液体发酵培养基，在pH6.5-6.8、罐压0.5kg、27-28℃、通风量为1:0.6-0.8，在培养48小时后，菌丝体占总体积的20％时终止发酵，进行固体发酵产孢；
h.固体发酵产孢：将步骤g经过发酵罐培养后的菌丝体接种到固体发酵培养基上，培养144-168小时，待里氏木霉90％产孢时停止发酵；
i.将步骤h中完全产孢的孢子-基质混合物浸在清水中制成孢子悬浮液，从而得到里氏木霉孢子悬浮液；
j.将上述步骤i中得到的里氏木霉孢子悬浮液浓缩干燥制成孢子粉；
其中，步骤e中使用的斜面培养基的配方如下：葡萄糖20g、土豆汁200g、琼脂20g和水
1000mL，pH自然；步骤f中使用的种子培养基配方如下：白糖20g、酵母膏0.5g、淀粉20g、磷酸二氢钾0.5g、硫酸镁0.2g、氯化钠0.2g和水1000mL；步骤g中使用的液体发酵培养基配方如下：淀粉12kg、豆饼粉1.2kg、玉米粉3kg、白糖12kg、酵母膏0.3kg、硫酸镁0.12kg、氯化钠0.12kg、消泡剂50mL，加水至600L；步骤h中的固体发酵培养基配方如下：棉籽壳、玉米粉和麸皮按5:2:13重量比混合组成的固体料中加入水，即得固体发酵培养基，固体料与水的重量比为1:0.6；
III.刺孢吸水链霉菌菌粉的制备：
k.在无菌条件下，将刺孢吸水链霉菌菌种接种于斜面培养基上，于28℃下培养5-6天；
l.摇床培养：将步骤k培养的菌种在无菌条件下接种于种子培养基中，在28℃条件下，
220r/min摇床培养24小时；
m.发酵罐培养：在无菌条件下，将步骤l培养的菌种接入液体发酵培养基中，在初始pH7.5、罐压0.5kg、28℃、通风量1:0.5-1，培养48小时后，放罐收集发酵液，加玉米淀粉经浓缩干燥后制得孢子粉；
其中，步骤k中使用的斜面培养基的配方如下：可溶性淀粉20g、KNO31g、NaCl0.5g、K2HPO40.5g、MgSO40.5g、FeSO40.1g、琼脂粉18g和蒸馏水1000mL，pH7.2-7.4；步骤l、m中使用的培养基配方如下：玉米淀粉20g、豆粉10g、NaCl0.5g、K2HPO40.5g、(NH4)2SO45g、CaCO33g、消泡剂0.5g和蒸馏水1000mL，pH 7.5。
8.根据权利要求1-7任一项所述的棉花专用生物有机肥，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为ACCC 11025、里氏木霉的保藏编号为ACCC 330449、刺孢吸水链霉菌的保藏编号为ACCC 40015。
9.权利要求1-8任一项所述棉花专用生物有机肥的制备方法，包括如下步骤：
(1)载体的制备
(2)复合菌剂的制备
(3)棉花专用有机肥的制备：将所述载体与复合菌剂按比例混合均匀，即得棉花专用有机肥。
10.权利要求1-8任一项所述的棉花专用生物有机肥或权利要求9所述方法制备的棉花专用生物有机肥在棉花种植中的应用；
优选地，所述棉花专用有机肥作为基肥施用，每亩用量50-200kg；
或作为辅助基肥使用，每亩用量10-20kg。

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