黑大豆14-3-3j蛋白基因的原核表达载体及其应用

发明专利无效专利

申请号：
CN201310000498.7
IPC分类号：C12N15/70;C07K16/16;G01N33/68
申请日期：
2013-01-04
申请人：
昆明理工大学

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专利名称	黑大豆14-3-3j蛋白基因的原核表达载体及其应用
申请号	CN201310000498.7	申请日期	2013-01-04
法律状态	驳回	申报国家	中国
公开/公告日	2013-04-24	公开/公告号	CN103060360A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/70 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/63 使用载体引入外来遗传物质；载体；其宿主的使用；表达的调节〔5〕 C12N15/70 专门适用于大肠杆菌的载体或表达系统〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;7;0;;;C;0;7;K;1;6;/;1;6;;;G;0;1;N;3;3;/;6;8查看分类表>
申请人	昆明理工大学	申请人地址	云南省昆明市五华区学府路253号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	昆明理工大学	当前权利人	昆明理工大学
发明人	陈丽梅;周磊;郭传龙;李松;王琳
代理机构	暂无	代理人	暂无

摘要

本发明公开一种黑大豆14-3-3j蛋白基因的原核表达载体pGEX-4T-1-14-3-3j，该载体是含有黑大豆14-3-3j蛋白基因的原核表达载体，是从黑大豆中克隆出14-3-3j基因，用T7启动子、lac(乳糖操纵子)在IPTG诱导下控制它在EcoliBL21中过量表达，合成14-3-3j蛋白并分泌到细胞质，通过SDS-PAGE检测其表达水平，实验结果表明在28℃、1mMIPTG诱导4h时14-3-3j蛋白表达量达到最大；本发明提供的原核表达载体能应用在制备多克隆抗体中，制作的多克隆抗体可以用于检测14-3-3j蛋白表达量和蛋白相互作用的体外验证，为研究14-3-3j蛋白的结构和功能提供可行性基础。

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