一种不依赖于纯化对PCR扩增产物直接进行Sanger测序的方法

发明专利有效专利

申请号：
CN202011557959.7
IPC分类号：C12Q1/6869;C12N15/11
申请日期：
2020-12-25
申请人：
北京思尔成生物技术有限公司

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专利名称	一种不依赖于纯化对PCR扩增产物直接进行Sanger测序的方法
申请号	CN202011557959.7	申请日期	2020-12-25
法律状态	实质审查	申报国家	中国
公开/公告日	2021-03-30	公开/公告号	CN112575071A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12Q1/6869 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12Q 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（免疫检测入G01N33/53）；其所用的组合物或试纸；这种组合物的制备方法；在微生物学方法或酶学方法中的条件反应控制〔3〕 C12Q1/00 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（带有条件测量或传感器的测定或试验装置，如菌落计数器入C12M1/34）；其组合物；这种组合物的制备方法〔3，2006.01〕 C12Q1/68 包括核酸〔3，2006.01，2018.01〕 C12Q1/6869 测序方法〔2018.01〕	IPC分类号	C;1;2;Q;1;/;6;8;6;9;;;C;1;2;N;1;5;/;1;1查看分类表>
申请人	北京思尔成生物技术有限公司	申请人地址	北京市大兴区经济技术开发区经海四路156号院11号楼4层401室变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	北京思尔成生物技术有限公司	当前权利人	北京思尔成生物技术有限公司
发明人	刘金超;刘明坤;叶锋
代理机构	北京纪凯知识产权代理有限公司	代理人	魏少伟

摘要

本发明公开了一种不依赖于纯化对PCR扩增产物直接进行Sanger测序的方法。本发明公开的方法包括：1)利用5’端带有测序引物的引物对对待测DNA片段进行PCR扩增，得到扩增产物；2)在含有测序引物与扩增产物的测序反应体系中进行测序反应，得到测序产物；测序引物的3’端带有不能被核酸外切酶进行切割的修饰；3)分析测序产物，得到待测DNA片段的序列，完成测序。本发明通过设计经特殊修饰的测序引物，可以不经过纯化，直接对PCR扩增产物进行下游测序反应和测序分析，从而精简了测序流程，缩短了测序时间，降低了操作的复杂程度，同时不需要纯化试剂，降低了检测成本，更有利于Sanger测序法在临床样本检测中的应用。

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