一种PD-1/CTLA-4双特异性抗体的制备方法及其应用

发明专利无效专利

申请号：
CN201610067928.0
IPC分类号：C12N15/10;C12N15/13;C12N5/10;C12N15/867;C12N15/66;C07K16/46;A61K39/395;A61P35/00
申请日期：
2016-01-29
申请人：
深圳精准医疗科技有限公司

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专利名称	一种PD-1/CTLA-4双特异性抗体的制备方法及其应用
申请号	CN201610067928.0	申请日期	2016-01-29
法律状态	驳回	申报国家	中国
公开/公告日	2016-07-13	公开/公告号	CN105754990A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/10 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/10 分离、制备或纯化DNA或RNA的方法（DNA或RNA的化学制备入C07H21/00；自微生物中或用酶制备非结构多核苷酸入C12P19/34）〔5，2006.01〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;1;0;;;C;1;2;N;1;5;/;1;3;;;C;1;2;N;5;/;1;0;;;C;1;2;N;1;5;/;8;6;7;;;C;1;2;N;1;5;/;6;6;;;C;0;7;K;1;6;/;4;6;;;A;6;1;K;3;9;/;3;9;5;;;A;6;1;P;3;5;/;0;0查看分类表>
申请人	深圳精准医疗科技有限公司	申请人地址	广东省深圳市福田区福荣路碧海红树园4栋7C 变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	杨晶	当前权利人	杨晶
发明人	杨世成
代理机构	上海申新律师事务所	代理人	竺路玲

摘要

本发明公开了一种PD?1/CTLA?4双特异性抗体的制备方法及其应用。本发明通过基因工程技术以单链抗体基因为模板，以特定的高效扩增引物，通过PCR和Overlap PCR，并向抗体的可变区引入二硫键制备PD?1/CTLA?4双特异性抗体片段，并将该基因片段克隆到慢病毒表达载体，通过转染293T细胞进行病毒包装；然后进行CIK细胞的转导，从健康人外周血分离PBMC，用CD3/CD28磁珠刺激T细胞生长，慢病毒与T细胞共培养，得到能够阻断肿瘤及肿瘤微环境来源的免疫抑制信号，同时增强杀伤癌细胞的功能的新型抗肿瘤T细胞。

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