一种基于酵母双杂交技术高效筛选膜蛋白互作蛋白的方法

发明专利有效专利

申请号：
CN201910757410.3
IPC分类号：C12N15/10;C12N15/81;C12Q1/6876
申请日期：
2019-08-16
申请人：
北京林业大学

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专利名称	一种基于酵母双杂交技术高效筛选膜蛋白互作蛋白的方法
申请号	CN201910757410.3	申请日期	2019-08-16
法律状态	实质审查	申报国家	中国
公开/公告日	2019-11-26	公开/公告号	CN110499309A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/10 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/10 分离、制备或纯化DNA或RNA的方法（DNA或RNA的化学制备入C07H21/00；自微生物中或用酶制备非结构多核苷酸入C12P19/34）〔5，2006.01〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;1;0;;;C;1;2;N;1;5;/;8;1;;;C;1;2;Q;1;/;6;8;7;6查看分类表>
申请人	北京林业大学	申请人地址	北京市海淀区清华东路35号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	北京林业大学	当前权利人	北京林业大学
发明人	林金星;郑文清;张曦;冯圣年;王树芳;祝蕾;毋瑞华
代理机构	暂无	代理人	暂无

摘要

本发明涉及一种基于酵母双杂交技术筛选膜蛋白互作蛋白的方法，通过采诱饵蛋白载体的选择、进行自激活检测及诱饵载体功能验证、进行膜体系双杂交文库筛选酵母、质粒提取、酵母质粒的扩繁等步骤，优化了诱饵载体的选择，筛选合适的诱饵载体，可以最大限度的筛选到更多的互作蛋白；优化了酵母感受态细胞的制备过程，通过一种接近于定量的方法较好得把握了摇菌的过程，可以使酵母感受态细胞的状态达到最优，比较有利于文库的表达，可以较好地把握实验进度，提高了实验稳定性；基于泛素系统的膜蛋白互作最后的PCR验证，极大促进了膜蛋白互作研究方法的高效性和稳定性，为科研工作者提供了先进的技术手段和理论基础。

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