带有稳定表达猪干扰素α基因的哺乳动物细胞系及其制备方法

发明专利无效专利

申请号：
CN201210005743.9
IPC分类号：C12N5/10;C12N15/21;C12N15/85
申请日期：
2012-01-10
申请人：
河南农业大学

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著录项信息

专利名称	带有稳定表达猪干扰素α基因的哺乳动物细胞系及其制备方法
申请号	CN201210005743.9	申请日期	2012-01-10
法律状态	驳回	申报国家	中国
公开/公告日	2012-07-04	公开/公告号	CN102533662A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N5/10 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N5/08 （转入C12N 5/071） C12N5/10 经引入外来遗传物质而修饰的细胞，如病毒转化的细胞〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;5;/;1;0;;;C;1;2;N;1;5;/;2;1;;;C;1;2;N;1;5;/;8;5查看分类表>
申请人	河南农业大学	申请人地址	河南省郑州市文化路95号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	河南农业大学	当前权利人	河南农业大学
发明人	夏平安;慕春龙;卢晓艳;崔保安
代理机构	郑州中原专利事务所有限公司	代理人	张绍琳

摘要

本发明公开了带有稳定表达猪干扰素α基因的哺乳动物细胞系及其制备方法，建立一种完整猪α干扰素基因的克隆、重组真核表达载体的构建以及稳定表达猪α干扰素的真核细胞系，将克隆的猪α干扰素cDNA基因插入到pcDNA3.0载体中构建真核表达载体pcDNA-poIFNα，通过脂质体转染猪PK15细胞，经G418筛选后用荧光定量PCR和ELISA方法分别检测猪α干扰素mRNA及蛋白的表达水平，构建了稳定表达猪α干扰素的PK15细胞系。采用一系列方法对获得的细胞在基因水平、转录水平和翻译表达水平进行鉴定。

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