高通量的单细胞全长转录组测序文库的构建方法及其应用

发明专利有效专利

申请号：
CN201711174753.4
IPC分类号：C12Q1/6869;C40B50/06
申请日期：
2017-11-22
申请人：
深圳华大智造科技有限公司

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著录项信息

专利名称	高通量的单细胞全长转录组测序文库的构建方法及其应用
申请号	CN201711174753.4	申请日期	2017-11-22
法律状态	实质审查	申报国家	中国
公开/公告日	2019-05-28	公开/公告号	CN109811045A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12Q1/6869 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12Q 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（免疫检测入G01N33/53）；其所用的组合物或试纸；这种组合物的制备方法；在微生物学方法或酶学方法中的条件反应控制〔3〕 C12Q1/00 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（带有条件测量或传感器的测定或试验装置，如菌落计数器入C12M1/34）；其组合物；这种组合物的制备方法〔3，2006.01〕 C12Q1/68 包括核酸〔3，2006.01，2018.01〕 C12Q1/6869 测序方法〔2018.01〕	IPC分类号	C;1;2;Q;1;/;6;8;6;9;;;C;4;0;B;5;0;/;0;6查看分类表>
申请人	深圳华大智造科技有限公司	申请人地址	广东省深圳市盐田区北山工业区综合楼及11栋2楼变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	深圳华大智造科技有限公司	当前权利人	深圳华大智造科技有限公司
发明人	陈丹丹;吴靓;厉磊;赵至坤;刘石平
代理机构	深圳鼎合诚知识产权代理有限公司	代理人	李小焦;彭家恩

摘要

本申请公开了一种高通量的单细胞全长转录组测序文库的构建方法及其应用。本申请方法，包括采用定制微孔芯片和ICELL8平台识别单细胞，并在微孔芯片微孔中，对单细胞进行细胞裂解、mRNA逆转录、cDNA预扩增和Tn5转座酶建库，产物可直接用于测序；在mRNA逆转录或Tn5转座酶建库过程中，引入5’端和3’端双端Barcode序列，以获得单细胞全长转录组。本申请方法，单细胞识别通量高，且产物可直接测序。采用本申请方法进行单细胞测序，只需两天时间，即可一次性高效获取数千个单细胞层面全长转录组库，大大降低了人工和时间成本，并且微量反应体系也大大降低了试剂成本，为大规模单细胞全长转录本测序奠定了基础。

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