多孔淀粉复合凹土作为保护剂制备益生菌制剂的方法

1.多孔淀粉复合凹土作为保护剂制备益生菌制剂的方法，其特征是：该益生菌制剂的制备方法首先是纯化凹土，然后将凹土与多孔淀粉混合，再将制备好的益生菌菌悬液在一定的条件下吸附至多孔淀粉和凹土表面，最后采用真空冷冻干燥法制备益生菌制剂。
2. 根据权利要求1所述的多孔淀粉复合凹土作为保护剂制备益生菌制剂的方法，其特征是该益生菌制剂制备方法包括以下步骤：
第一步凹土的纯化：将凹土采用电导率低于5μs/cm的去离子水浸泡20~28h，搅拌器以1000~1500rpm转速搅拌20~28h，静置分层，取中间层凹土悬液，以中间层凹土悬液量的
5~20%的量继续加入上述去离子水，同样操作，重复2~3次，于105~120℃烘干，研磨，过筛，取200目至140目细土备用；
第二步多孔淀粉的选择：多孔淀粉是由生淀粉酶在低于糊化温度下作用于生淀粉而形成的多孔性蜂窝状变性淀粉，其小孔直径为1μm，孔的容积占颗粒体积的50%，吸油率为
1~2g/g；
第三步多孔淀粉与凹土的复合：多孔淀粉与凹土以1:10~10:1混合；
第四步益生菌菌悬液的制备：将枯草芽孢杆菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、粪链球菌、地衣芽孢杆菌或酵母菌培养至对数生长期后期，收集菌体，采用无菌生理盐水洗涤去培养基，将菌体悬浮于pH为2~9的缓冲体系中，并将浓
9 10
度调节至10~10 CFU/ml备用；
第五步吸附益生菌：将100~1000g多孔淀粉与凹土的复合物，悬浮至10L的菌悬液中，于15~35℃震荡吸附10~60分钟，震荡速度为90~200rpm；
第六步真空冷冻干燥：步骤五的混合物经真空冷冻干燥法获得凹土为载体的益生菌活菌制剂，真空冷冻干燥法条件为：步骤五的混合物于-40~-75℃预冻2~3小时，移入冷冻干
9 12
燥机冷冻干燥20~28小时，使制剂含水量≤2%，检测活菌剂中活菌数为10~10 CFU/g。
3. 根据权利要求2所述的多孔淀粉复合凹土作为保护剂制备益生菌制剂的方法，其特征是所述枯草芽孢杆菌培养条件是：培养基：葡萄糖5g、蛋白胨10g、酵母膏5g、氯化钠
5g，蒸馏水1000ml，pH7.2；35℃振荡培养18h，摇床转速为180rpm。
4. 根据权利要求2所述的多孔淀粉复合凹土作为保护剂制备益生菌制剂的方法，其特征是所述双歧杆菌培养条件是：培养基：蛋白胨15g，葡萄糖15g，酵母膏4g，牛肉膏4g，NaCl 5g，Na2HPO4 2.5g，蒸馏水1000ml，pH7；35℃静置培养22小时。
5. 根据权利要求2所述的多孔淀粉复合凹土作为保护剂制备益生菌制剂的方法，其特征是所述嗜酸乳杆菌培养条件是：培养基：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g，柠檬酸氢二铵2g，葡萄糖20g，吐温-80 1ml，CH3COONa•3H2O 5g，K2HPO4•3H2O 2g，MgSO4•7H2O 0.58g，MnSO4•H2O 0.25g，蒸馏水1000ml，调pH6.2-6.4；37℃静置培养20小时。
6. 根据权利要求2所述的多孔淀粉复合凹土作为保护剂制备益生菌制剂的方法，其特征是所述嗜热链球菌培养条件是：培养基同嗜酸乳杆菌，40℃静置培养20小时；所述保加利亚乳杆菌培养条件是：培养基同嗜酸乳杆菌，37℃静置培养20小时；所述鼠李糖乳杆菌培养条件是：培养基同嗜酸乳杆菌，37℃静置培养20小时。
7. 根据权利要求2所述的多孔淀粉复合凹土作为保护剂制备益生菌制剂的方法，其特征是所述粪链球菌培养条件是：培养基：蛋白胨2g，牛肉膏2g，乳糖2g，蒸馏水1000ml，pH6.8；37℃振荡培养6h，摇床转速为100rpm。
8. 根据权利要求2所述的多孔淀粉复合凹土作为保护剂制备益生菌制剂的方法，其特征是所述地衣芽孢杆菌培养条件是：培养基：葡萄糖5g，蛋白胨5g，K2HPO4 2g，MgSO4 2g，蒸馏水1000ml，pH 7.0；37℃振荡培养40h，摇床转速为180rpm。
9. 根据权利要求2所述的多孔淀粉复合凹土作为保护剂制备益生菌制剂的方法，其特征是所述酵母菌培养条件是： 培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，蒸馏水1000mL，pH自然；28℃振荡培养18h，摇床转速为150rpm。

暂无