一种利用改进的CRISPR-Cpf1进行基因装配的新方法

发明专利有效专利

申请号：
CN201910015592.7
IPC分类号：C12N15/70;C12N15/90
申请日期：
2019-01-08
申请人：
湖北大学

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著录项信息

专利名称	一种利用改进的CRISPR-Cpf1进行基因装配的新方法
申请号	CN201910015592.7	申请日期	2019-01-08
法律状态	实质审查	申报国家	中国
公开/公告日	2019-05-31	公开/公告号	CN109825520A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/70 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/63 使用载体引入外来遗传物质；载体；其宿主的使用；表达的调节〔5〕 C12N15/70 专门适用于大肠杆菌的载体或表达系统〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;7;0;;;C;1;2;N;1;5;/;9;0查看分类表>
申请人	湖北大学	申请人地址	湖北省武汉市武昌区友谊大道368号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	湖北大学	当前权利人	湖北大学
发明人	马立新;董梦洁;翟超;韩瑞;王亚平
代理机构	武汉河山金堂专利事务所（普通合伙）	代理人	丁齐旭

摘要

本发明公开了一种利用改进的CRISPR‑Cpf1进行基因装配的新方法，它是一种利用来自于FrancisellatularemianoticedU112菌株(土拉弗朗西斯菌诺维达亚种U112，基因序列号：MF193599)的DNA基因编辑酶FnCpf1进行基因重组克隆的方法。本方法在不影响FnCpf1切割效率的前提下，将crRNA(规律成簇的间隔的短回文重复序列转录产生的RNA序列)的种子序列从文献报道的23个核苷酸缩短为18个。同时选用oligo(dN)6(寡核苷酸六聚体)作为切割靶位点产生的粘性末端，克服了FnCpf1酶切后末端不均一的问题，从而显著提高外源DNA片段的装配效率，DNA片段装配效率达到85％左右。所述基因编辑酶FnCpf1可以用AsCpf1和LbCpf1等其它核酸编辑酶Cpf1代替。

序号	公开(公告)号	公开(公告)日	申请日	专利名称	申请人
该专利没有引用任何外部专利数据！

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