瑞香狼毒素复配灭虫剂及其制备方法和用途

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瑞香狼毒素复配灭虫剂及其制备方法和用途\n技术领域\n[0001] 本发明涉及瑞香狼毒素复配灭虫剂及其制备方法和用途，属于生物农药领域。\n背景技术\n[0002] 瑞香狼毒素(狼毒素、瑞香素），为瑞香狼毒经提取分离得到的一种植物农药母液。\n瑞香狼毒中含有多种杀虫成分，对害虫有较好的拒食活性、触杀活性及生长抑制等活性。可有效防治同翅目、鳞翅目、蜱螨目害虫如蚜虫、螟虫、菜青虫、螨虫等。瑞香狼毒素为天然提取物，对植物安全无药害，是安全性高、高效低残留的生物杀虫剂，适合于蔬菜、水果、园艺上的使用。\n[0003] 苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis，简称Bt，5000IU/mg）该菌为革兰氏阳性土壤杆菌，属芽孢杆菌属，其产生的杀虫蛋白和芽孢具有高效的杀虫活性，是重要的微生物源杀虫剂，对鳞翅目、双翅目、鞘翅目等多害虫都有很好的毒杀作用，其独特的作用机理，对哺乳动物和环境友好，但是Bt杀虫剂的效果易受外界环境影响，且杀虫速率较低的弱点，限制了其大规模的应用。\n[0004] 申请号为200710049245.3的瑞香狼毒微乳剂及其制备方法，公开了一种由瑞香狼毒根提取物为活性成分，加上乳化剂，稳定剂和水制备而成的瑞香狼毒微乳剂，及其在灭杀胆色库蚊的应用。但其瑞香狼毒微乳剂中狼毒提取物占原料的10～20wt%，成本较高。\n因此，寻找一种瑞香狼毒素用量少，即成本低的灭虫药，同时，延缓抗药性的产生，减少对环境的污染，对植物安全无药害的灭虫剂，是一个亟待解决的技术问题。\n发明内容\n[0005] 本发明要解决的技术问题是，提供一种瑞香狼毒素复配灭虫剂及其制备方法和用途。\n[0006] 本发明瑞香狼毒素复配灭虫剂，其有效组分为瑞香狼毒素和Bt；其中，所述Bt为苏云金芽孢杆菌；Bt浓度优选以5000IU/mg计，瑞香狼毒素/Bt的重量比优选为1～8:1～\n64，更优选为1:1～8，最优选为1:2～4。\n[0007] 进一步的，为了提高瑞香狼毒素和Bt的药效，所述瑞香狼毒素复配灭虫剂的剂型优选为悬浮剂或微乳剂。\n[0008] 其中，为了提高瑞香狼毒素复配灭虫剂的稳定性和药效，其中，所述助剂优选为分散剂、增稠剂、其它辅料中的至少一种；所述分散剂优选为十二烷基硫酸钠、尿素、硅酸镁铝、木质素磺酸钠、亚甲基二萘磺酸钠、高分子聚羧酸盐中的至少一种，更优选为十二烷基硫酸钠、尿素、硅酸镁铝中的至少一种；所述增稠剂优选为有机膨润土、黄原胶、硅酸镁铝、羧甲基纤维素钠、聚乙烯醇、聚丙烯酸钠和聚吡咯烷酮中的至少一种，更优选为有机膨润土和/或黄原胶；所述其它辅料优选为防腐剂和/或增效剂，所述防腐剂优选为苯甲酸酯类和/或水杨酸酯类，最优选为苯甲酸酯，所述增效剂优选为咪唑烷酮类。\n[0009] 进一步的，所述悬浮剂优选由如下重量份组分组成：瑞香狼毒素0.5～8重量份，Bt1～32重量份,十二烷基硫酸钠2～5重量份，尿素1～2重量份，硅酸镁铝1～2重量份，有机膨润土1～2重量份，黄原胶0.1重量份，苯甲酸酯0.1重量份，水80.8～94.3重量份。\n[0010] 进一步的，为了提高瑞香狼毒素复配灭虫剂的稳定性和药效，所述微乳剂的组分还包含助剂；助剂益于有效成分储存和使用中稳定以及药效发挥的物质，上述助剂都是农药制剂中常用或允许使用的成分，并无特别限定。其中，所述助剂优选为乳化剂、稳定剂、助溶剂中至少一种；所述乳化剂优选为十六烷基硫酸钠、烷基酚聚氧乙烯醚、吐温、OP-10、十二烷基硫酸钠、聚甘油酯、聚甘油亚油酸一酯或三乙醇胺中的至少一种，更优选为OP-10、吐温-80；所述稳定剂优选为二甘醇、1,3-丙二醇、二甲亚砜、1,4-丁二醇、乙二醇中的至少一种，更优选为二甘醇、二甲亚砜；所述助溶剂优选为苯甲酸钠、水杨酸钠、乙酰胺、乌拉坦、尿素中的至少一种，更优选为苯甲酸钠。\n[0011] 进一步的，所述微乳剂由如下重量份组分组成：瑞香狼毒素0.5～8重量份，Bt1～32重量份,二甘醇2～10重量份，二甲亚砜1～2重量份，OP-104～12重量份，吐温-801～4重量份，苯甲酸钠3重量份，水70～88.5重量份。\n[0012] 进一步的，本发明还发现了瑞香狼毒素、Bt与其他复配组分组合也具有优良的杀虫性能，所述其他复配组分为氯氰菊酯、灭多威、辛硫磷、氟铃脲、白僵菌、绿僵菌、多杀菌素、阿维菌素中的至少一种；优选为阿维菌素；所述瑞香狼毒素/Bt/阿维菌素的重量比优选为1:2～4:1。\n[0013] 进一步的，本发明同时公开了瑞香狼毒素复配灭虫剂悬浮液的制备方法，包括如下步骤：\n[0014] a、按照配比称取瑞香狼毒素和助剂，混合并研磨，得到混合原料；\n[0015] b、将a步骤所得的混合原料乳化，得到不含Bt的悬浮剂；\n[0016] c、加入Bt和水，搅拌，即得。\n[0017] 进一步的，本发明还公开了瑞香狼毒素复配灭虫剂微乳剂的制备方法，包括如下步骤：\n[0018] a、按照配比加入水、瑞香狼毒素、稳定剂，搅拌；其中，反应温度为40℃；\n[0019] b、加入乳化剂和助溶剂，搅拌，得到不含Bt的微乳剂；\n[0020] c、加入Bt，搅拌，即得。\n[0021] 其中，本发明所述瑞香狼毒素可采用市售或如下方法提取：采用体积浓度为95%的乙醇对瑞香狼毒进行总提，然后采用乙酸乙酯、石油醚等有机溶剂萃取，采用减压浓缩获得。\n[0022] 进一步的，本发明还公开了本发明瑞香狼毒素复配灭虫剂在杀灭蝗虫中的应用。\n[0023] 与现有技术相比，本发明瑞香狼毒素复配灭虫剂使用多元复配组合，高效低毒，对害虫（尤其对蝗虫）具有优异的杀虫活性；同时，大大的减少了有效组分的用量，节约了成本，并且延缓了抗药性的产生，减少了对环境的污染，对植物安全无药害。\n具体实施方式\n[0024] 本发明瑞香狼毒素复配灭虫剂，其有效组分为瑞香狼毒素和Bt；其中，所述Bt为苏云金芽孢杆菌；Bt浓度优选以5000IU/mg计，瑞香狼毒素/Bt的重量比优选为1～8:1～\n64，更优选为1:1～8，最优选为1:2～4。\n[0025] 进一步的，为了提高瑞香狼毒素和Bt的药效，所述瑞香狼毒素复配灭虫剂的剂型优选为悬浮剂或微乳剂。\n[0026] 其中，为了提高瑞香狼毒素复配灭虫剂的稳定性和药效，其中，所述助剂优选为分散剂、增稠剂、其它辅料中的至少一种；所述分散剂优选为十二烷基硫酸钠、尿素、硅酸镁铝、木质素磺酸钠、亚甲基二萘磺酸钠、高分子聚羧酸盐中的至少一种，更优选为十二烷基硫酸钠、尿素、硅酸镁铝中的至少一种；所述增稠剂优选为有机膨润土、黄原胶、硅酸镁铝、羧甲基纤维素钠、聚乙烯醇、聚丙烯酸钠和聚吡咯烷酮中的至少一种，更优选为有机膨润土和/或黄原胶；所述其它辅料优选为防腐剂和/或增效剂，所述防腐剂优选为苯甲酸酯类和/或水杨酸酯类，最优选为苯甲酸酯，所述增效剂优选为咪唑烷酮类。\n[0027] 进一步的，所述悬浮剂优选由如下重量份组分组成：瑞香狼毒素0.5～8重量份，Bt1～32重量份,十二烷基硫酸钠2～5重量份，尿素1～2重量份，硅酸镁铝1～2重量份，有机膨润土1～2重量份，黄原胶0.1重量份，苯甲酸酯0.1重量份，水80.8～94.3重量份。\n[0028] 进一步的，为了提高瑞香狼毒素复配灭虫剂的稳定性和药效，所述微乳剂的组分还包含助剂；助剂益于有效成分储存和使用中稳定以及药效发挥的物质，上述助剂都是农药制剂中常用或允许使用的成分，并无特别限定。其中，所述助剂优选为乳化剂、稳定剂、助溶剂中至少一种；所述乳化剂优选为十六烷基硫酸钠、烷基酚聚氧乙烯醚、吐温、OP-10、十二烷基硫酸钠、聚甘油酯、聚甘油亚油酸一酯或三乙醇胺中的至少一种，更优选为OP-10、吐温-80；所述稳定剂优选为二甘醇、1,3-丙二醇、二甲亚砜、1,4-丁二醇、乙二醇中的至少一种，更优选为二甘醇、二甲亚砜；所述助溶剂优选为苯甲酸钠、水杨酸钠、乙酰胺、乌拉坦、尿素中的至少一种，更优选为苯甲酸钠。\n[0029] 进一步的，所述微乳剂由如下重量份组分组成：瑞香狼毒素0.5～8重量份，Bt1～32重量份,二甘醇2～10重量份，二甲亚砜1～2重量份，OP-104～12重量份，吐温-801～4重量份，苯甲酸钠3重量份，水70～88.5重量份。\n[0030] 进一步的，本发明还发现了瑞香狼毒素、Bt与其他复配组分组合也具有优良的杀虫性能，所述其他复配组分为氯氰菊酯、灭多威、辛硫磷、氟铃脲、白僵菌、绿僵菌、多杀菌素、阿维菌素中的至少一种；优选为阿维菌素；所述瑞香狼毒素/Bt/阿维菌素的重量比优选为1:2～4:1。\n[0031] 进一步的，本发明同时公开了瑞香狼毒素复配灭虫剂悬浮液的制备方法，包括如下步骤：\n[0032] a、按照配比称取瑞香狼毒素和助剂，混合并研磨，得到混合原料；\n[0033] b、将a步骤所得的混合原料乳化，得到不含Bt的悬浮剂；\n[0034] c、加入Bt和水，搅拌，即得。\n[0035] 进一步的，本发明还公开了瑞香狼毒素复配灭虫剂微乳剂的制备方法，包括如下步骤：\n[0036] a、按照配比加入水、瑞香狼毒素、稳定剂，搅拌；其中，反应温度为40℃；\n[0037] b、加入乳化剂和助溶剂，搅拌，得到不含Bt的微乳剂；\n[0038] c、加入Bt，搅拌，即得。\n[0039] 其中，本发明所述瑞香狼毒素可采用市售或如下方法提取：采用体积浓度为95%的乙醇对瑞香狼毒进行总提，然后采用乙酸乙酯、石油醚等有机溶剂萃取，采用减压浓缩获得。\n[0040] 进一步的，本发明还公开了本发明瑞香狼毒素复配灭虫剂在杀灭蝗虫中的应用。\n[0041] 下面结合实施例对本发明的具体实施方式做进一步的描述，并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。\n[0042] 实施例1采用本发明瑞香狼毒素复配灭虫剂进行室内生测试验\n[0043] 触杀活性采用浸渍法，将3龄蝗虫放入滤网中，浸入不同浓度的药液中，1s后迅速取出，放回饲养笼中喂养，另用水作为对照，每笼接入40只，重复3组，观察72h死亡情况。\n数据用SPSS软件统计处理。计算死亡率、校正死亡率和致死中浓度(LC50)、毒力回归方程，并用孙云沛方法计算共毒系数（CTC）。\n[0044] \n[0045] \n[0046] （以瑞香狼毒素为标准药剂，其毒力指数为100）\n[0047] B的毒力指数（TI）=A的LC50/B的LC50×100\n[0048] M的实际毒力指数（ATI）=A的LC50/M的LC50×100\n[0049] M的理论毒力指数（TTI）=A的TI×PA+B的TI×PB\n[0050] M的毒力系数（CTC）=M的ATI/M的TTI×100\n[0051] 其中：A为瑞香狼毒素，B为Bt，M为A与B不同配比的混合物，PA为A在混剂中所占比例，PB为B在混剂中所占比例，若复配剂的共毒系数小于80，为拮抗作用；80～120，为相加作用；若大于120，为增效作用。\n[0052] 其中，本发明实施例使用的瑞香狼毒素的制备方法为：采用95%（80%～98%）乙醇对瑞香狼毒进行总提，然后采用乙酸乙酯、石油醚等有机溶剂萃取，采用减压浓缩获得。\n[0053] 实验结果如表1所示：\n[0054] 表172h不同配比对蝗虫的毒力测定结果\n[0055] \n[0056] 从表1可以看出，在不同比例的混配中，共毒系数有所差异，但都大于120，即瑞香狼毒素和Bt存在增效作用。其中，瑞香狼毒素/Bt重量比为1:4的增效作用最为明显，72h共毒系数为206.489。\n[0057] 实验结果表明，在室内条件下，瑞香狼毒素、Bt复配剂对蝗虫均有较高的活性，其中，当瑞香狼毒素/Bt重量为1:2～4时，增效效果最好。\n[0058] 实施例2采用本发明复配剂进行草原试验\n[0059] 通过室内生测试验，选出CTC最大的配比六进行防治蝗虫的田间试验，以确定瑞香狼毒素与Bt复配对蝗虫的防治效果；同时通过与瑞香狼毒素、Bt单剂、高效氯氰菊酯、阴性对照的效果对比，验证复配后的增效效果。本实施例中，选用1.2%瑞香狼毒素·Bt悬浮剂，其中，瑞香狼毒素:Bt重量比为1.2:4。\n[0060] 1、实验地点：\n[0061] 新疆哈密市松树塘草原蝗虫监测防治实验站所属松树塘草原蝗害区。\n[0062] 2、试验方法：\n[0063] 先选择代表性比较强，蝗虫密度比较均匀的地块做试验区，然后随机取样调查防\n2\n治前蝗虫密度，蝗虫密度为12只/m左右，每种制剂15g/亩、25g/亩、35g/亩三种处理浓度进行处理，每种处理面积100亩；阳性对照高效氯氰菊酯也为15g/亩，25g/亩，35g/亩三种处理浓度进行处理，每种处理面积100亩；阴性对照为清水，处理面积100亩。实验共计\n3个试验组，13个处理浓度，每个处理浓度为3个重复，四周设隔离带宽度为50米。\n[0064] 用6HW-501高射程喷雾机对每个处理组进行地面大型机械超低量喷雾，施药后3天，7天，14天调查防治效果,调查采用对角线取样法，在每个处理组的四角的两条对角线\n2 2\n上均匀分配调查样点取样，共取40个样区，每个样区为1m，共计40m，记录虫口数，试验结果用以下公式计算出蝗虫的虫口减退率及防效。\n[0065] 3、调查方法：\n[0066] 调查采用对角线取样法，在田块四角的两条对角线上均匀分配调查样点取样，每个样区取40个样点，记录框内虫口数，试验结果用以下公式计算虫口减退率及防效。\n[0067] 4、药效计算方法：\n[0068] 虫口减退率(%)=(施药前活虫数-施药后活虫数)/施药前活虫数×100[0069] 防效（%）=（处理区虫口减退率-对照区虫口减退率）/(100-对照区虫口减退率)×100\n[0070] 5、药害调查方法：\n[0071] 施药后连续7d目测药剂对作物没有药害产生，草原草地生长良好。\n[0072] 6、结果与分析：\n[0073] 本实施例实验结果见表2。\n[0074] 表21.2%瑞香狼毒素﹒Bt复配灭虫剂药效试验\n[0075] \n[0076] 从表2中可以看出，不同药剂进行草原试验，对蝗虫的防治效果为1.2%瑞香狼毒素·Bt复配最好，瑞香狼毒素·Bt复配防治蝗虫速效性快，持续时间长，防治效果好。在施药3天后灭蝗效果可以达到90.45%、95.74%、96.16%，杀虫效果随着用量的增加而递增。根据试验观察，各种药物对草原植被均无药害，同时也对蝗虫有较好的防治效果。\n[0077] 实施例3多元瑞香狼毒素复配灭虫剂的效果\n[0078] 在瑞香狼毒素·Bt复配的基础之上进一步探索多元瑞香狼毒素复配灭虫剂的效果，通过草原实验测定该多元瑞香狼毒素复配灭虫剂灭蝗效果，效果见表3。\n[0079] 表3多元瑞香狼毒素复配灭虫剂灭蝗效果\n[0080]