一种防治病害的辣椒专用有机栽培基质及其制备方法

1.防治病害的辣椒专用有机栽培基质的制备方法，原料质量份如下：
所述的木霉菌菌剂是木霉菌按现有技术培养、发酵制备的液体木霉菌菌液，菌液有效菌含量为2×108个/克～5×108个/克；所述木霉菌菌种选自哈茨木霉（T.harzianum）或绿色木霉（T.viride）；
所述的芽孢杆菌菌剂是芽孢杆菌按现有技术培养、发酵制备的液体芽孢杆菌菌液，菌液有效菌含量为2×109个/克～4×109个/克；所述芽孢杆菌菌种选自枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、球形芽孢杆菌（Bacillus sphaericus）或短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）；
所述的微生物发酵菌剂是EM复合菌剂；
步骤如下：
（1）木霉菌菌剂的制备：
将去皮马铃薯200克，加水1000克，煮沸20分钟，纱布过滤，滤液补充水分到1000克，再加入葡萄糖20克，琼脂16克，蛋白胨2克，磷酸二氢钾2克，七水硫酸镁1克，加热至所有成分溶化，分装试管，在0.11兆帕压力下灭菌30分钟，制作试管斜面，冷却后接入木霉菌菌种，放置在28℃恒温培养箱中培养3天；培养结束后按常规接种量和方法转接至液体培养基中，28℃、80个往复/分钟振荡培养4天，得种子液；再将种子液以5～10wt%的接种量接入液体培养基中，28℃条件下在发酵罐中培养6天，得木霉菌菌剂；菌液有效菌含量为
2×108个/克～5×108个/克；
所述液体培养基：去皮马铃薯200克，加水1000克，煮沸20分钟，纱布过滤，滤液补充水分到1000克，再加入葡萄糖20克，蛋白胨2克，磷酸二氢钾2克，七水硫酸镁1克，加热至所有成分溶化，在0.11兆帕压力下灭菌30分钟；
（2）芽孢杆菌菌剂的制备：
斜面种子：采用PDA培养基，将去皮马铃薯200克，加水1000克，煮沸20分钟，纱布过滤，滤液补充水分到1000克，再加入葡萄糖20克，琼脂18克，加热至所有成分溶化，分装试管，在0.11兆帕压力下灭菌30分钟，制作试管斜面，冷却后接入芽孢杆菌菌种，放置在30℃恒温培养箱中培养2天；得斜面种子；
液体培养基配方：黄豆粉5克，酵母膏4克，蛋白胨4克，葡萄糖3克，可溶性淀粉5克，硝酸钾1克，碳酸钙0.5克，氯化钠0.5克，磷酸二氢钾0.5克，七水硫酸镁0.5克，硫酸亚铁0.01克，水1000克，pH7.3；在0.11兆帕压力下灭菌30分钟；按常规接种量和方法将斜面种子接到液体培养基中，30℃、80个往复/分钟振荡培养3天，得种子液；再将种子液以
5～8wt%的接种量接入液体培养基中，30℃条件下在发酵罐中培养4天，得芽孢杆菌菌剂；
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菌液有效菌含量为2×10 个/克～4×10 个/克；
（3）按配比，取糠醛渣，食用菌菌渣，油渣，木屑，微生物发酵菌剂，混合均匀；调整混合料的水分为55～60wt%，堆制发酵腐熟；温度升至55℃计时，保持5～7天；翻堆，温度再次升至50℃计时，保持4～7天；如此操作再重复2次，共发酵27～42天，得有机物发酵料；
将所得有机物发酵料进行蒸汽灭菌，通入蒸汽，温度升至100℃计时，保持7～10小时，得灭菌有机物发酵料；
(4)按配比，取步骤（1）制备的木霉菌菌剂、步骤（2）制备的芽孢杆菌菌剂加入步骤（3）制备的灭菌有机物发酵料中，混合均匀，调整混合料的水分为55～60wt%，28℃～30℃条件下堆制4～6天，晾干或35℃～40℃烘干至水分含量27～30wt%，得防治病害的辣椒专用有机栽培基质。
2.如权利要求1所述的防治病害的辣椒专用有机栽培基质的制备方法，其特征在原料质量份如下：
3.如权利要求1或2所述的防治病害的辣椒专用有机栽培基质的制备方法，其特征在于所述木霉菌菌种选自哈茨木霉ACCC30371、哈茨木霉ACCC30906、绿色木霉ACCC31911或绿色木霉ACCC30902。
4.如权利要求1或2所述的防治病害的辣椒专用有机栽培基质的制备方法，其特征在于芽孢杆菌菌种选自枯草芽孢杆菌CGMCC1.933、枯草芽孢杆菌CGMCC1.936、球形芽孢杆菌CGMCC1.929、球形芽孢杆菌CGMCC1.930、短小芽孢杆菌CGMCC1.937、短小芽孢杆菌CGMCC1.938中的一种。

一种防治病害的辣椒专用有机栽培基质及其制备方法\n技术领域\n[0001] 本发明涉及一种栽培基质及其制备方法，特别涉及一种防治辣椒主要病害的有机栽培基质及其制备方法，属于无土栽培技术领域。\n背景技术\n[0002] 辣椒(Chili pepper)是我国各地普遍栽培的蔬菜品种之一。近几年，随着设施种植的快速发展，辣椒种植区重茬现象越来越普遍，因连作导致的病害轻者可使辣椒减产\n20%～30%，重者减产50%以上甚至绝收，给椒农带来极大的经济损失。\n[0003] 辣椒根腐病、疫病、立枯病、白绢病、根结线虫病等是辣椒生产中极为常见的真菌性病害，多年来,以化学防治为主的措施不但未能遏制病害上升的趋势,而且还抑制了土壤中的有益微生物,导致病原菌产生抗药性,同时造成有害物质残留。因此,寻找安全、有效的防治辣椒病害的方法是促进辣椒生产良性发展的基础。\n[0004] 辣椒无土栽培具有避免土传病虫害、连作障碍及生产的可控性等诸多优点,是减轻辣椒病害的重要途径之一。但由于上述辣椒病害主要以种子、幼苗移栽等方式传播，仅靠栽培方式的改变还很难控制发病。利用木霉菌和芽孢杆菌的生防作用，通过栽培基质切断辣椒主要病害的传播和抑制病害的发生是无土栽培辣椒高产、优质的重要措施，也是解决辣椒病害严重发生的途径之一。\n[0005] 在温度等条件适合情况下，辣椒的生育期较长，特别是大部分无土栽培辣椒都是在设施条件下进行，温度的人为调控可使其生育时间达到8—10个月，产量也较高，这就需要提供稳定性好、营养丰富的栽培基质。\n[0006] CN200410023791.6提供了一种果菜有机基质型无土栽培基质的配制与应用，该发明公开了两个基质配方：配方1：稻壳∶草炭∶干鸡粪＝2∶1∶1(体积比)；配方2：稻壳∶棉籽壳∶草炭∶干鸡粪＝1∶1∶1∶1(体积比，棉籽壳为栽培过食用菌的废料)。\n按配比充分拌匀，施水相对含水量70-80％时，用薄膜密封发酵55-60℃，维持7-10天。应用上述配方的基质栽培果菜，平均单株基质用量为10-15升。该基质以稻壳和经食用菌栽培后的废弃棉籽壳为主要成分，大大降低了草炭用量，取材容易成本低廉，使用后可作为肥料施入大田，肥沃土壤，不污染环境。但该专利文件的有机基质型无土栽培基质不具有抗病功能。\n[0007] CN200810139332.2公开了一种克服设施土壤根结线虫的蔬菜有机基质栽培方法。\n该种栽培方法的栽培槽是不与土壤隔离的开放式土槽，该种栽培方法可供选择的三个栽培基质配方按其体积比配方1：稻壳∶发酵鸡粪∶河沙＝2∶1∶1；配方2：腐熟牛粪∶稻壳∶河沙＝5∶4∶1；配方3：玉米或小麦秸秆发酵物料∶腐熟鸡粪(或羊粪)∶河沙＝\n4∶1∶1。按规格挖好土槽后，将栽培基质填入槽内，即可在栽培槽中定植番茄、西瓜等蔬菜。土壤根结线虫不会侵入分布有蔬菜主要根系的栽培基质里，因此，该种方法可减少设施土壤根结线虫对蔬菜的危害。但该专利文件提到的防治根结线虫病采用的是工程方法，而非生物方法。\n发明内容\n[0008] 针对现有技术的不足，本发明提供一种基于生物法防治病害的辣椒专用有机栽培基质及其制备方法。\n[0009] 本发明选择不同的有机废弃物进行复配，使其复配物的养分尽量符合辣椒吸收要求，发酵腐熟后灭菌，加入具有防治辣椒根腐病、疫病、立枯病和根结线虫病功能的木霉菌菌剂及芽孢杆菌菌剂，堆制一定时间后即得本发明栽培基质。基质中含有的大量活性木霉菌、芽孢杆菌及其代谢产物对辣椒病害具有明显的抑制作用。经过试验,取得了良好的效果。\n[0010] 术语说明：\n[0011] 生防菌：是一类能够在寄主植物内诱发其产生抗性或分泌抑菌物质，影响病原菌的繁殖、生长直至死亡；或通过抗生作用、竞争作用、捕食作用等，降低病原菌的侵染率和致病性的微生物。\n[0012] 本发明的技术方案如下：\n[0013] 防治病害的辣椒专用有机栽培基质，原料质量份如下：\n[0014] \n[0015] 所述的木霉菌菌剂是木霉菌按现有技术培养、发酵制备的液体木霉菌菌液，菌液有效菌含量为2×108个/克～5×108个/克。\n[0016] 所述木霉菌菌种选自哈茨木霉（T.harzianum）或绿色木霉（T.viride），其中优选中国农业微生物菌种保藏管理中心(Agricultural Culture Collection of China英文缩写ACCC)的哈茨木霉ACCC30371、哈茨木霉ACCC30906、绿色木霉ACCC31911或绿色木霉ACCC30902。\n[0017] 所述的芽孢杆菌菌剂是芽孢杆菌按现有技术培养、发酵制备的液体芽孢杆菌菌液，菌液有效菌含量为2×109个/克～4×109个/克。\n[0018] 所述芽孢杆菌菌种选自枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、球形芽孢杆菌（Bacillus sphaericus）或短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）；其中优选中国普通微生物菌种保藏管理中心（China General Microbiological Culture Colletion Center英文缩写CGMCC）的枯草芽孢杆菌CGMCC1.933、枯草芽孢杆菌CGMCC1.936、球形芽孢杆菌CGMCC1.929、球形芽孢杆菌CGMCC1.930、短小芽孢杆菌CGMCC1.937、短小芽孢杆菌CGMCC1.938中的一种。\n[0019] 上述木霉菌菌剂和芽孢杆菌菌剂属于生防菌剂。\n[0020] 所述糠醛渣是玉米芯为主要原料制造糠醛过程中的废渣。\n[0021] 所述的食用菌菌渣是食用菌生产中废弃的栽培料，主要成分为棉籽壳、作物秸杆、锯末、食用菌菌丝体等。优选平菇栽培废料，基料主要成分为棉籽壳和玉米芯。\n[0022] 所述的油渣是植物榨油厂利用压榨工艺对原料进行挤压、脱胶生产出食用油产品后剩余的残渣，包括豆油渣、花生油渣、棉籽油渣或油菜籽油渣，可选用其中之一，也可组合使用。\n[0023] 所述的木屑是在木材加工过程中废弃木料的的粉碎物。优选的，阔叶树木屑，过孔径3.0mm筛，自然环境下放置半年以上。\n[0024] 所述的微生物发酵菌剂是EM复合菌剂（EM是EffectiveMicroorganesms的简称），它是将光合菌群、酵母菌群、乳酸菌群、芽孢杆菌群、菌根菌群等5科10属80多种微生物在同一状态中复合培养成的一种定型菌剂。呈棕色半透明状液体，pH值在3.5～4.5之间。\n市场有售。\n[0025] 根据本发明，优选的，防治病害的辣椒专用有机栽培基质原料质量份如下：\n[0026] \n[0027] 本发明的防治病害的辣椒专用有机栽培基质的制备方法中，有关木霉菌菌剂和芽孢杆菌菌剂按现有技术培养、发酵，本发明提供如下具体操作条件，但并不仅限于此。\n[0028] 本发明的防治病害的辣椒专用有机栽培基质的制备方法，步骤如下：\n[0029] （1）木霉菌菌剂的制备：\n[0030] 将去皮马铃薯200克，加水1000克，煮沸20分钟，纱布过滤，滤液补充水分到1000克，再加入葡萄糖20克，琼脂16克，蛋白胨2克，磷酸二氢钾2克，七水硫酸镁1克，加热至所有成分溶化，分装试管，在0.11兆帕压力下灭菌30分钟，制作试管斜面，冷却后接入木霉菌菌种，放置在28℃恒温培养箱中培养3天。培养结束后按常规接种量和方法转接至液体培养基中，28℃、80个往复/分钟振荡培养4天，得种子液。再将种子液以5～10wt%的接种量接入液体培养基中，28℃条件下在发酵罐中培养6天，得木霉菌菌剂；菌液有效菌含量\n8 8\n为2×10 个/克～5×10 个/克。\n[0031] 所述液体培养基：去皮马铃薯200克，加水1000克，煮沸20分钟，纱布过滤，滤液补充水分到1000克，再加入葡萄糖20克，蛋白胨2克，磷酸二氢钾2克，七水硫酸镁1克，加热至所有成分溶化，在0.11兆帕压力下灭菌30分钟。\n[0032] （2）芽孢杆菌菌剂的制备：\n[0033] 斜面种子：采用PDA培养基，将去皮马铃薯200克，加水1000克，煮沸20分钟，纱布过滤，滤液补充水分到1000克，再加入葡萄糖20克，琼脂18克，加热至所有成分溶化，分装试管，在0.11兆帕压力下灭菌30分钟，制作试管斜面，冷却后接入芽孢杆菌菌种，放置在\n30℃恒温培养箱中培养2天。得斜面种子。\n[0034] 液体培养基配方：黄豆粉5克，酵母膏4克，蛋白胨4克，葡萄糖3克，可溶性淀粉\n5克，硝酸钾1克，碳酸钙0.5克，氯化钠0.5克，磷酸二氢钾0.5克，七水硫酸镁0.5克，硫酸亚铁0.01克，水1000克，pH7.3。在0.11兆帕压力下灭菌30分钟。按常规接种量和方法将斜面种子接到液体培养基中，30℃、80个往复/分钟振荡培养3天，得种子液。再将种子液以5～8wt%的接种量接入液体培养基中，30℃条件下在发酵罐中培养4天，得芽孢杆\n9 9\n菌菌剂；菌液有效菌含量为2×10 个/克～4×10 个/克。\n[0035] （3）按配比，取糠醛渣，食用菌菌渣，油渣，木屑，微生物发酵菌剂，混合均匀。调整混合料的水分为55～60wt%，堆制发酵腐熟。温度升至55℃计时，保持5～7天。翻堆，温度再次升至50℃计时，保持4～7天。如此操作再重复2次，共发酵27～42天。得有机物发酵料。将所得有机物发酵料进行蒸汽灭菌，通入蒸汽，温度升至100℃计时，保持7～10小时，得灭菌有机物发酵料。\n[0036] (4)按配比，取步骤（1）制备的木霉菌菌剂、步骤（2）制备的芽孢杆菌菌剂加入步骤（3）制备的灭菌有机物发酵料中，混合均匀，调整混合料的水分为55～60wt%，28℃～\n30℃条件下堆制4～6天，晾干或35℃～40℃烘干至水分含量27～30wt%，得防治病害的辣椒专用有机栽培基质。\n[0037] 本发明的防治病害的辣椒专用有机栽培基质的应用方法：\n[0038] 将该栽培基质装入栽培容器（盆或地槽等），厚度为15～25厘米，按常规方法播种辣椒种子或栽植辣椒苗，无需使用化学农药，其它管理措施按普通栽培基质技术即可。\n[0039] 本发明的优良效果如下：\n[0040] 1.减少病害\n[0041] 辣椒是较易发病的蔬菜品种之一，特别是由真菌引起的病害在我国各地普遍发生，在设施条件下栽培更容易发病，严重影响辣椒产量和品质。辣椒真菌性病害可以通过种子、幼苗移栽等方式传播，所以采用基质栽培也难以避免病害发生。本发明是把防病菌加在栽培基质中，起到了预防作用，减少了辣椒病害。\n[0042] 2.保护环境\n[0043] 化学农药除了对病菌起到杀灭作用外，对其它生物也具有毒害性。据研究，化学农药的有效利用只有10%左右，大部分残留在环境中，长期大量使用会威胁环境安全。本发明防治病害的辣椒专用有机栽培基质中木霉菌和芽孢杆菌对辣椒病原菌具有良好的拮抗活性，对其它生物安全。\n[0044] 3．物理性状好\n[0045] 由于辣椒生育期较长，普通有机栽培基质会在栽培过程中继续腐烂，本发明基质中加入了木屑，它分解难度大，能在辣椒生长过程中维持较长时间好的物理性状，为辣椒生长提供良好的根系环境。\n具体实施方式\n[0046] 下面结合实施例对本发明做进一步说明，但不限于此。实施例中的原料用量份数均为质量份。原料说明如下：\n[0047] 木霉菌菌种是:哈茨木霉ACCC30906和绿色木霉ACCC30902，其中实施例1-2用ACCC30906，实施例3-4用ACCC30902，中国农业微生物菌种保藏管理中心购得。\n[0048] 芽孢杆菌菌种是:枯草芽孢杆菌CGMCC1.936和球形芽孢杆菌CGMCC1.929，其中实施例1-2用CGMCC1.936，实施例3-4用CGMCC1.929，中国普通微生物菌种保藏管理中心购得。\n[0049] 糠醛渣，河南宏业化工有限公司以玉米芯为主要原料制造糠醛过程中的废渣。\n[0050] 油渣为山东光大日月股份有限公司生产。实施例1-2用豆油油渣，实施例3-4用油菜籽油渣。\n[0051] 微生物发酵菌剂是EM复合菌剂,江西省天意生物技术开发有限公司生产。\n[0052] 食用菌菌渣，平菇栽培废料，基料主要成分为棉籽壳。\n[0053] 木屑为杨树枝条粉碎物，过孔径3.0mm筛，自然环境下放置半年以上。\n[0054] 实施例1：\n[0055] 防治病害的辣椒专用有机栽培基质组成如下：\n[0056] \n[0057] （1）木霉菌菌剂的制备：\n[0058] 将去皮马铃薯200克，加水1000克，煮沸20分钟，纱布过滤，滤液补充水分到1000克，再加入葡萄糖20克，琼脂16克，蛋白胨2克，磷酸二氢钾2克，七水硫酸镁1克，加热至所有成分溶化，分装试管，在0.11兆帕压力下灭菌30分钟，制作试管斜面，冷却后接入木霉菌菌种，放置在28℃恒温培养箱中培养3天。培养结束后按常规接种量和方法转接至液体培养基中（配方与斜面培养基相同，只是不加琼脂），28℃、80个往复/分钟振荡培养4天，得种子液。再将种子液以8wt%的接种量接入液体培养基中，28℃条件下在发酵罐中培养6\n8\n天，得木霉菌菌剂。该菌液有效菌含量为3.47×10 个/克。\n[0059] （2）芽孢杆菌菌剂的制备：\n[0060] 斜面种子：采用PDA培养基，具体操作是，将去皮马铃薯200克，加水1000克，煮沸\n20分钟，纱布过滤，滤液补充水分到1000克，再加入葡萄糖20克，琼脂18克，加热至所有成分溶化，分装试管，在0.11兆帕压力下灭菌30分钟，制作试管斜面，冷却后接入芽孢杆菌菌种，放置在30℃恒温培养箱中培养2天。\n[0061] 发酵液：液体培养基配方：黄豆粉5克，酵母膏4克，蛋白胨4克，葡萄糖3克，可溶性淀粉5克，硝酸钾1克，碳酸钙0.5克，氯化钠0.5克，磷酸二氢钾0.5克，七水硫酸镁0.5克，硫酸亚铁0.01克，水1000克，pH7.3。在0.11兆帕压力下灭菌30分钟。按常规接种量和方法将斜面种子接到液体培养基中，30℃、80个往复/分钟振荡培养3天，得种子液。再将种子液以7wt%的接种量接入液体培养基中，30℃条件下在发酵罐中培养4天，得芽孢杆\n9\n菌菌剂。该菌液有效菌含量为2.91×10 个/克。\n[0062] （3）取糠醛渣310kg，食用菌菌渣240kg，油渣157kg，木屑280kg，微生物发酵菌剂\n2kg，混合均匀。调整混合料的水分为58wt%，堆制发酵腐熟。温度升至55℃计时，保持6天。\n翻堆，温度再次升至50℃计时，保持6天。如此操作再重复2次，共发酵36天。得有机物发酵料。将有机物发酵料放入容器内，通入蒸汽，温度升至100℃时计时，保持10小时,得灭菌有机物发酵料。\n[0063] (4)取步骤（1）制备的木霉菌菌剂5kg、步骤（2）制备的芽孢杆菌菌剂6kg加入步骤（3）制备的灭菌有机物发酵料中，混合均匀，调整混合料的水分为55wt%，28℃条件下堆制6天，晾至水分含量28wt%，得防治病害的辣椒专用有机栽培基质。\n[0064] 实施例2：\n[0065] 防治病害的辣椒专用有机栽培基质原料组成如下：\n[0066] \n[0067] （1）木霉菌菌剂和芽孢杆菌菌剂的制备同实施例1。\n[0068] （2）取糠醛渣280kg，食用菌菌渣280kg，油渣176kg，木屑250kg，微生物发酵菌剂\n1kg，混合均匀。调整混合料的水分为60wt%，堆制发酵腐熟。温度升至55℃计时，保持7天。\n翻堆，温度再次升至50℃计时，保持4天。如此操作再重复2次，共发酵33天。得有机物发酵料。将有机物发酵料放入容器内，通入蒸汽，温度升至100℃时计时，保持8小时,得灭菌有机物发酵料。\n[0069] (3)取步骤（1）制备的木霉菌菌剂6kg、芽孢杆菌菌剂7kg加入步骤（2）制备的灭菌有机物发酵料中，混合均匀，调整混合料的水分为60wt%，30℃条件下堆制4天，晾至水分含量30wt%，得防治病害的辣椒专用有机栽培基质。\n[0070] 实施例3：\n[0071] 防治病害的辣椒专用有机栽培基质原料组成如下：\n[0072] \n[0073] 制备方法：\n[0074] （1）木霉菌菌剂和芽孢杆菌菌剂的制备同实施例1，所不同的是木霉菌种采用\n8\nACCC30902，木霉菌菌剂菌液有效菌含量为3.67×10 个/克；芽孢杆菌采用CGMCC1.929，芽\n9\n孢杆菌菌剂菌液有效菌含量为2.56×10 个/克。\n[0075] （2）取糠醛渣350kg，食用菌菌渣300kg，油渣134kg，木屑200kg，微生物发酵菌剂\n3kg，混合均匀。调整混合料的水分为55wt%，堆制发酵腐熟。温度升至55℃计时，保持5天。\n翻堆，温度再次升至50℃计时，保持5天。如此操作再重复2次，共发酵30天。得有机物发酵料。将有机物发酵料放入容器内，通入蒸汽，温度升至100℃时计时，保持9小时,得灭菌有机物发酵料。\n[0076] (3)取步骤（1）制备的木霉菌菌剂8kg、芽孢杆菌菌剂5kg加入步骤（2）制备的灭菌有机物发酵料中，混合均匀，调整混合料的水分为57wt%，29℃条件下堆制5天，晾至水分含量27wt%，得防治病害的辣椒专用有机栽培基质。\n[0077] 实施例4：\n[0078] 防治病害的辣椒专用有机栽培基质原料组成如下：\n[0079] \n[0080] 制备方法：\n[0081] （1）木霉菌菌剂和芽孢杆菌菌剂的制备同实施例1，所不同的是木霉菌种采用\n8\nACCC30902，木霉菌菌剂菌液有效菌含量为3.67×10 个/克；芽孢杆菌采用CGMCC1.929，芽\n9\n孢杆菌菌剂菌液有效菌含量为2.56×10 个/克。\n[0082] （2）取糠醛渣250kg，食用菌菌渣300kg，油渣200kg，木屑237kg，微生物发酵菌剂\n2kg，混合均匀。调整混合料的水分为57wt%，堆制发酵腐熟。温度升至55℃计时，保持7天。\n翻堆，温度再次升至50℃计时，保持7天。如此操作再重复2次，共发酵42天。得有机物发酵料。将有机物发酵料放入容器内，通入蒸汽，温度升至100℃时计时，保持7小时,得灭菌