同时检测新城疫和禽流感病毒的荧光试纸条及应用

1.一种同时检测新城疫新城疫和禽流感病毒的荧光标记试纸条的制备及检测方法，其特征在于其步骤为：
1)利用新城疫和禽流感单克隆抗体的杂交瘤细胞株；以体内诱生腹水法大量制备抗体，使用Protein G柱进行纯化，获得新城疫单克隆抗体和禽流感单克隆抗体；
2)制备尺寸为50nm荧光纳米颗粒作为标记物；
3)将步骤1)制备的新城疫和禽流感单克隆抗体分别加入步骤2)制备的荧光纳米颗粒中，得到新城疫单克隆抗体-荧光标记物和禽流感单克隆抗体-荧光标记物；
4)将步骤3)制备的新城疫单克隆抗体-荧光标记物和禽流感单克隆抗体-荧光标记物包被在结合垫上；
5)将步骤1)纯化后的新城疫和禽流感单克隆抗体包被在硝酸纤维素膜上构成两条检测线；并将羊抗鼠IgG包被在硝酸纤维素膜上构成质控线；
6)在PVC背衬上按顺序依次粘附所述样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，得到所述用于同时检测新城疫新城疫和禽流感病毒的荧光试纸条；
7)将待检测的样品加载样品垫上过滤后，若样品中有NDV，则与结合垫中的荧光标记抗体结合，通过层析作用先与NC膜上的新城疫单克隆抗体结合形成的荧光结合线3，未结合完的荧光标记抗体继续层析与羊抗鼠IgG结合形成第二条荧光质控线；若样品中有AIV与结合垫中的荧光标记抗体结合，通过层析作用先与NC膜上的禽流感单克隆抗体结合形成的荧光结合线4，未结合完的荧光标记抗体继续层析与羊抗鼠IgG结合形成第二条荧光质控线；
8)观察结果：阳性则出现两条结合线(出现结合线3和质控线为样品中含有NDV，出现结合线4和质控线为样品中含有AIV)；阴性则仅出现一条质控线；试剂条无效则不出现线条。
2.如权利要求2所述的用尺寸为50nm荧光纳米颗粒作为标记物，其特征在于：荧光纳米颗粒是指尺寸为50nm左右的，适合生物标记的荧光纳米颗粒。
3.如权利要求1所述的使用新城疫病毒的快速检测免疫荧光试纸条，其特征在于：所述形成的检测带和控制带检测是指使用凝胶成像系统，专用的荧光测量仪，或其他仪器进行辅助观察并记录结果。
4.权利要求1中所述的试纸条在同时检测新城疫和禽流感病毒中的应用。
5.权利要求1中所述的试纸条在一步检出多个组分中的应用。

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