银杏叶提取物的制备方法

1.一种银杏叶提取物的制备方法，它主要包括下列步骤： (a)银杏叶用95％乙醇或95％-100％甲醇或85％-100％丙酮在常温至80℃浸渍提取； (b)取提取液浓缩回收乙醇或甲醇或丙酮： (c)浓缩液用水或纯化水稀释后粗分离，再稀释，然后在温度为20℃以下冷却沉降： (d)上清液进苯乙烯型大孔吸附树脂柱吸附； (e)用甲醇或乙醇或丙酮溶液洗脱； (f)洗脱液温度控制在小于75℃减压浓缩干燥。
2 .根据权利要求1戶皿的银杏叶提取物的制备方法，其特征在于：步骤 (e)为一次洗脱方式，洗脱剂浓度为30%-95%。
3 .根据权利要求1所述的银杏叶提取物的制备方法，其特征在于：步骤(e)为梯度洗脱方式，繊剂第一次tt浓度为0%-30%，洗脱剂第二次洗脱 浓度为40%-95%。

银杏叶提取物的制备方法本发明属于天然植物药用成份的提取技术，具体地说是一种银杏叶提取 物的制备方法。银杏是世界上最古老的树种之一，被誉为"活化石"，银杏叶是一种重要的药用、《剁建食品原料，它的提取物(GBE， Egb， Extract of Ginkgo, biloba) 具有相当强的抗氧化作用，育隨除生物体内Jlf啲自由基P耻体内脂质过 氧化，提高机体免疫力，延缓衰老等功能，近年来，国内外特别是德国、日 本、美国、法国等国家对银杏叶中的化学成份，分离方法进行了大量的研究， 取得了较大进展，具有代表性的是用^隊取的方法制备银杏叶提取物，如 德国Sehwabe， Flaschman药厂，主要为银杏叶千粗粉，6W。丙酮抽提，压滤 以CCl4脱脂，丙酮水层用硫酸氨饱和，用甲乙酮提取，提取液^!B^缩后配 成一定浓度的乙,液，加适量Pb(0H)2过滤，滤液繊后再以硫酸氨饱和， 甲乙酮提取，提取液千MMI后以乙醇精制再^fl千燥得银杏（GBE)提取 物（见德国专利ED2117429. 1767098)。此种方法，使用的有机、无机化学介 质多，工艺复杂，成本高，且易造成残留影响产品的质量。目前国内的银杏叶提取物的生产技术，主要^^用7Xm醇类，鹏取，再经大?L树脂吸附的方式，（中国专利申请号94114835.1)，但其提取得率低，所得提取物含量也不高。本发明的目的在于提供一种高提取得率和高提取物银杏黄酮醇苷和银 杏萜内酯含量的银杏叶提取物的制备方法。实现本发明目的的技术方案它主要包括以下步骤：(&)银杏叶用95%乙醇或95%-100%甲醇或85%-100%丙酮在常温至801:浸 渍提取；(b) 取提取液浓縮回收乙醇或甲醇或丙酮；(c) 浓縮液用水或纯4^JC稀释后粗分离，再稀释，然后在温度为20。C以 下冷却沉降；(d) 上清液进苯乙烯型大孔吸附树脂柱吸附；(e) 用甲醇或乙醇或丙酮溶液洗脱；(f) 洗脱液温度控制在大于6(TC至小于75"C减压浓縮千燥。 在上述方法中步骤（e)还可以采用一次洗脱方式，洗脱剂浓度可以是30%h~95%;在战方法中步骤（e)可以采用梯度洗脱方式，而洗脱齐啲浓度第一 次可以是0%^30%;第二次可以是40%-95%。本发明的一种银杏叶提取物的制备方法所用的介质没有或基本没有有 害物质残留，工艺控制容易，提取得率高，产品有效物含量高，特别是白果 内酯含量高，妇.5%以上,品质稳定。以下结合实施例对本发明作进一步的说明，但本发明也不仅限于实施例 的内容。实施例一：取银杏叶100kg，用40%乙醇12、 10、 10倍量（是指原料重量与翻y体 积比，续实施例与此相同)。8(TC浸渍搅^JI取三次，每次2小时，放出提 取液，合并浓縮至小体积，加入5倍量的水稀释，药液经粗分离后再加入5 倍量的纯化水在(TC或者-1 t:下静置沉降。取上清液过苯乙烯型AB—8大孔 吸附树脂，用2倍树脂#^只的水洗，用2W。的乙瞎先脱后，树脂再用7(Fo的 乙醇洗脱，收集得洗脱液。糊旨再生后可重复使用。洗脱漱舰泉缩，然后 «千燥，控制^^《75。C，得含银杏黄酮醇苷26. 5%，银杏蔽内酯8.5%， 其中白果内酯高达4. 2%的银杏叶提取物2. 4 kg。实施例二：取银杏叶200kg粉碎^ffi粉，用75%乙醇10、 6、 5倍量，70。C浸MH次， 每次3小时，放出浸提液，合并浓縮至小体积，加入8倍量的纯4t7jC稀释， 药液经粗分离后再加纯化水定容至1600L，于温度2(TC静置沉降。取上清液 过DM—130型大孔吸附树脂柱（苯乙烯型吸附树脂)，用2倍树脂体积的纯 ^7jC洗，用30%的乙醇洗脱后，用95%的乙麟脱，收紫先脱液。树脂再生 后可重复{赶目。洗脱液小于75r温度m!l浓縮，然后喷雾T^喿，得含黄酮醇 苷》28%，银杏萜内酯>9%其中白果内酯高达4. 5%的银杏叶提取物4. 2kg。实施例三：取银杏叶200kg粉碎成小于lcnf的碎片，用40%丙酮15、 14、 13倍量，65。C浸提三次，每次3小时，放出浸提液，合并、«至小体积，加入8倍量 的纯化水稀释，在2(TC下静置。取上清液过AB--8型大孔吸附树脂（苯乙烯 型吸附树脂)，用2倍树脂体积的纯化水洗，用75%的丙酮洗脱，i!^fe脱液。 树脂再生后可重复i吏用。洗脱液«浓缩，然后喷雾^P燥，得含黄酮醇苷》 24%，银杏萜内酯>8%的银杏叶提取物4.6 kg。 实施例四：取银杏叶200kg,用40%甲醇16、 15、 14倍，7(TC浸提三次，每次3小 时，放出浸提液，合并鄉至小体积，加入8倍量的自来水,，在17'C下 静置。取上清液过大孔吸附树脂（苯乙烯型吸附树脂）DM—130，用2倍树 月旨体积的纯化水洗，用75%的甲醇洗脱，收«脱液。树脂再生后可重复使 用。洗脱液在《75。C^ffi浓縮，然后喷雾干燥，得含黄酮醇苷>24%，银杏 萜内酯>6%的银杏叶提取物5.5 kg。实施例五：取银杏叶500kg粉碎成粗粉，用85%乙醇8、 6、 5倍，55。C搅拌浸提三 次，每次3小时，放出浸提液，合并繊至小体积，加入12倍量的纯^7jC 稀释，在7'C下静置。取上清液过滤后再过D101型大孔吸附树脂柱（苯乙烯 型吸附浙t脂)，用2倍树脂体积的纯4t7K洗，用75%的乙醇洗脱，iB^^先脱液。 树脂再用95%的乙醇再生后重复使用。洗脱液在《75"«、«，然后喷雾 干燥，得含黄酮醇苷>24%，银杏萜内酯》6%的银杏叶提取物13. 5kg。实施例六：取银杏叶1000kg粉碎成粗粉，用95%乙醇5、 3、 2倍，6(TC浸提三次， 每次3小时，放出浸提液，合并,缩至小体积，加入10倍量的纯化水稀释， 在1()"C下静置。取上清液过大孔吸附树脂（苯乙烯型吸附树脂）DM-130，用 2倍树脂体积的纯化水洗，用75%的乙,脱，收磐先脱液。树脂再用95% 的乙醇再生后重复j顿。洗脱液在《75。C舰鄉，然后在《75。Cmil千燥， 得含黄酮醇昔>24%，银杏萜内酯》10%的银杏叶提取物26 kg。实施例七：取银杏叶1000kg粉碎^fi粉，用85%甲醇8、 6、 5倍，常温搅拌浸MH 次，每次5小时，放出浸提液，合并浓縮至小体积，加入io倍量的纯4t;K ,，在1CTC下静置。取上清液过大孔吸附树脂(苯乙烯型吸附树脂)CH01A，\n用2倍树脂体积的纯^7jC洗，用40%的甲皿脱，收«^液。树脂再生后 可重复使用。洗脱液在《75。CMffi浓縮，然后在《75。CMffi千燥，得含黄酮 醇苷>24%，银杏萜内酯》6Q/。的银杏叶提取物23kg。 实施例八：取银杏叶1000kg粉碎成粗粉，用100%甲醇8、 6、 5倍，5(TC浸IIH次， 每次3小时，放出浸提液，合并浓缩至小体积，加入5倍量的自来水稀释， 经粗分离后，再加5倍量的自来水搅匀后，在8r下静置。祉清液过大孔 吸附树脂（苯乙烯型吸附树脂）HPD-600，用2倍树脂体积的纯化水洗，用 95%的乙,脱，收集洗脱液。树脂再生后可重复使用。洗脱液在《75。C减 压浓縮，然后在《75。CMffi干燥，得含黄酮醇苷>24%，银杏砲内酯>6%的 银杏叶提取物29kg。 实施例九：取银杏叶1000kg粉碎成粗粉，用70%丙酮7、 6、 5倍，80。C浸JIH次， 每次2小时，放出浸提液，合并t缩至小体积，加入5倍量的纯化水,， 经粗分离后，再加5倍量的纯^7K搅匀后，在2"C下静置。取上清液过大孔 吸附柳旨（苯乙烯型吸附树脂）D-140，用2倍树脂体积的纯化水洗，用95% 的丙酮洗脱，收菊先脱液。树脂再生后可重复使用。洗脱液在《75。C離浓 縮，然后在《75。C船千燥，得含黄酮醇苷>24%，银杏蔽内酯》6%的银杏 叶提取物27kg。 实施例十：取银杏叶1000kg粉碎成粗粉，用85%丙酮12、 9、 9倍，常温搅拌浸提 三次，每次6小时，放出浸提液，合并«至小体积，加入5倍量的纯^fefC ,，经粗分离后，再加5倍量的纯^K搅匀后，在1(TC下静置。取上清液 过大孔吸附树脂（苯乙烯型吸附树脂）ADS-17，用2倍树脂体积的纯化水洗， 用40%的丙酮洗脱，收ft^先脱液。树脂再生后可重复使用。洗脱液在《75"C MJ1浓縮，喷雾干燥，得含黄酮醇苷>24%，银杏萜内酯>6%的银杏叶提取 物25kg。实施例十一：取银杏叶1000kg粉碎離粉，用95%丙酮10、 8、 6倍，常温辦浸提 三次，每次6小时，放出浸提液，合并浓縮至小体积，加入5倍量的纯4WC 稀释，经粗分离后，再加5倍量的纯化水搅匀后，在6。C下静置。取上清液过大孔吸附树脂（苯乙烯型吸附树脂）ADS-16，用2倍树脂^f只的纯化水洗， 用75%的丙酮洗脱，收«脱液。树脂再生后可重复使用。洗脱液在《75'C «浓縮，喷雾干燥，得含黄酮醇苷》24%，银杏蔽内酯》6%的银杏叶提取 物26kg。实施例十二：取银杏叶1000kg粉碎成粗粉，用10鳴丙酮8、 6、 6倍，60。C浸JIH次， 每次2小时，放出浸提液，合并浓縮至小体积，加入5倍量的纯^7jC稀释， 经粗分离后，再加5倍量的纯^7K搅匀后，在5t:下静置。取上清液过大孔 吸附树脂（苯乙烯型吸附树脂）LSA-20，用2倍树脂体积的纯化水洗，用70% 的甲醇f先脱，收集洗脱液。树脂再生后可重复使用。洗脱液在《75。CMil浓 縮，喷雾干燥，得賴酮醇苷》24%，银杏砲内酯》6y。的银杏叶提取物27kg。 实施例十三：取银杏叶1000kg粉碎j^且粉，用95%甲醇10、 8、 6倍，常温搅拌浸提 三次，每次6小时，放出浸提液，合并鄉至小体积，加入10倍量的纯化 7jC稀释，经粗分离后，在l(TC下静置。取上清液过大孔吸附树脂（苯乙烯型 吸附树脂）HPEH600，用2倍树脂体积的纯化水洗，用40%的丙酮^^兑，收集洗脱液。树脂再生后可重复i顿。洗脱液在《75。CMil、WI，喷雾千燥，得 含黄酮醇苷>24%，银杏萜内酯》6%的银杏叶提取物24kg。 实施例十四：取银杏叶1000kg粉碎成粗粉，用95%工业乙醇8、 8、 7倍，50。C浸JiH 次，每次3小时，放出浸提液，合并、«至小体积，加入5倍量的纯ft^JC稀 释，经粗分离后，再加5倍量的纯化水搅匀后，在4t:下静置。取上清M 大孔吸附树脂（苯乙烯型吸附树脂）ADS-17，用2倍树脂^f只的纯化水洗， 用95%的甲醇^先脱，收^^先脱液。树脂再生后可重复使用。洗脱液在《75。C 减压浓縮，《75。CMJ5浓縮干燥，得含黄酮醇苷>24%，银杏砲内酯》6%的 银杏叶提取物28kg。实施例十五：取银杏叶1000kg粉碎j^tl粉，用90%工业乙醇12、 12、 10倍，8(TC浸 ^H次，每次2小时，放出浸提液，合并鄉至小^f只，加入5倍量的纯化 水稀释，经粗分离后，再加5倍量的纯化水搅匀后，在5。C下静置。取上清、,大孔吸附树脂（苯乙烯型吸附树脂）HPD-450，用2倍树脂体积的纯化 水洗，用75%的乙,脱，收«脱液。洗脱液在《75。CMiBW，喷雾干 燥，得含黄酮醇苷》24%，银杏萜内酯》696的银杏叶提取物25kg。 实施例十六：取银杏叶1000kg粉碎成粗粉，用95%药用乙醇8、 6、 4倍，常温搅拌浸 提三次，每次2小时，放出浸提液，合并、MI至小体积，加入5倍量的纯化 水稀释，经粗分离后，再加5倍量的纯^/K搅匀后，在3"下静置。取上清 液过大孔吸附树脂（苯乙烯型吸附树脂）DA101D，用2倍树脂体积的纯化水 洗，用75%的乙瞎先脱，收簾先脱液。洗脱液在《75。CMI5歉缩，喷雾千燥， 得含黄酮醇苷>24%，银杏萜内酯》6%的银杏叶提取物32kg。 实施例十七：取银杏叶1000kg粉碎成粗粉，用食用乙醇6、 5、 4倍，65。C浸ilH次， 每次2小时，放出浸提液，合并MI至小体积，加入5倍量的纯化水稀释， 经粗分离后，再加5倍量的纯^7K搅匀后，在l(TC下静置。取上清液过大孔 吸附树脂（苯乙烯型吸附树脂）D-101，用2倍树脂体积的纯化水洗，用8(Fo 的乙醇洗脱，收^^先脱液。洗脱液在《75。CMiE^t缩，喷雾^P燥，得含黄酮 醇苷》24%，银杏萜内酯》89&的银杏叶提取物29kg。