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一种聚乙二醇选择性修饰蛋白C端羧基的方法

发明专利无效专利
  • 申请号:
    CN201210300769.6
  • IPC分类号:C07K1/107;C12N9/96;C12N9/48
  • 申请日期:
    2012-08-22
  • 申请人:
    中国科学院过程工程研究所
著录项信息
专利名称一种聚乙二醇选择性修饰蛋白C端羧基的方法
申请号CN201210300769.6申请日期2012-08-22
法律状态撤回申报国家中国
公开/公告日2014-03-12公开/公告号CN103626831A
优先权暂无优先权号暂无
主分类号C07K1/107IPC分类号C;0;7;K;1;/;1;0;7;;;C;1;2;N;9;/;9;6;;;C;1;2;N;9;/;4;8查看分类表>
申请人中国科学院过程工程研究所申请人地址
北京市海淀区中关村北二条1号 变更 专利地址、主体等相关变化,请及时变更,防止失效
权利人中国科学院过程工程研究所当前权利人中国科学院过程工程研究所
发明人胡涛;王俊;苏志国;马光辉;安红波
代理机构暂无代理人暂无
摘要
本发明涉及一种聚乙二醇(PEG)修饰方法。该方法可以选择性修饰蛋白质和多肽C端的羧基,而且每个蛋白质和多肽分子上仅连接了1个PEG分子。该方法所使用的模型蛋白是葡激酶。PEG修饰的主要步骤为:(1)在偏酸性条件下(pH5.0),将葡激酶的羧基与胱胺(cystamine)的氨基用碳二亚胺(EDC)进行连接;(2)胱胺所携带的二硫键经还原剂还原后,生成的巯基与单甲氧基PEG-马来酰亚胺(mPEG-Mal)反应。葡激酶C端羧基的pKa值为2.1-2.4,而天冬氨酸与谷氨酸侧链羧基的pKa值分别为3.7-4.0和4.2-4.5。因此,在pH5.0的条件下PEG可选择性修饰葡激酶的C端羧基。本发明主要用于蛋白质或多肽C端羧基的PEG选择性修饰反应,提供了一种新的PEG修饰方法,其优点在于PEG修饰产物的修饰位点均一性好。

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