基于标签MBP蛋白高产磷脂酶B的重组大肠杆菌及其构建与培养方法

发明专利有效专利

申请号：
CN202010014005.5
IPC分类号：C12N1/21;C12N15/70;C12N9/18;C12R1/19
申请日期：
2020-01-07
申请人：
南京凯诺生物科技有限公司

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专利名称	基于标签MBP蛋白高产磷脂酶B的重组大肠杆菌及其构建与培养方法
申请号	CN202010014005.5	申请日期	2020-01-07
法律状态	实质审查	申报国家	中国
公开/公告日	2020-05-01	公开/公告号	CN111088208A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N1/21 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N1/00 微生物本身，如原生动物；及其组合物（含有由原生动物、细菌或病毒得到的材料的药物的制备入A61K35/66；从藻类材料制备药物的入A61K36/02；从真菌中材料制备药物的入A61K36/06；药用细菌的抗原或抗体组合物的制备，如细菌菌苗入A61K39/00）；繁殖、维持或保藏微生物或其组合物的方法；制备或分离含有一种微生物的组合物的方法；及其培养基〔3，2006.01〕 C12N1/20 细菌；其培养基〔3〕 C12N1/21 引入外来遗传物质修饰的〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;/;2;1;;;C;1;2;N;1;5;/;7;0;;;C;1;2;N;9;/;1;8;;;C;1;2;R;1;/;1;9查看分类表>
申请人	南京凯诺生物科技有限公司	申请人地址	江苏省南京市浦口区江北新区中山科技园科创大道9号A7栋210室变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	南京凯诺生物科技有限公司	当前权利人	南京凯诺生物科技有限公司
发明人	陈可泉;王昕;许晟
代理机构	南京先科专利代理事务所（普通合伙）	代理人	叶帅东

摘要

本发明公开了基于标签MBP蛋白高产磷脂酶B的重组大肠杆菌及其构建与培养方法。本发明选取来自Pseudomonasfluorescens的磷脂酶B基因PLB，经密码子优化后，重组菌经破碎后得到的粗酶液中目标蛋白多以包涵体形式存在，通过添加标签MBP蛋白融合表达明显的提高了PLB蛋白的可溶性表达，与原始菌株相比，酶活提高了约4倍。最终通过对重组菌株产酶条件的研究，确定了产酶的最佳条件，在最佳条件下，PLB酶活可达到465U/mg，较原始酶活提高了约23倍。

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