一种高效分泌表达转肽酶SortaseA的方法

发明专利有效专利

申请号：
CN201510440032.8
IPC分类号：C12N1/21;C12N9/10;C12R1/19
申请日期：
2015-07-23
申请人：
江南大学

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专利名称	一种高效分泌表达转肽酶SortaseA的方法
申请号	CN201510440032.8	申请日期	2015-07-23
法律状态	授权	申报国家	中国
公开/公告日	2015-12-16	公开/公告号	CN105154378A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N1/21 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N1/00 微生物本身，如原生动物；及其组合物（含有由原生动物、细菌或病毒得到的材料的药物的制备入A61K35/66；从藻类材料制备药物的入A61K36/02；从真菌中材料制备药物的入A61K36/06；药用细菌的抗原或抗体组合物的制备，如细菌菌苗入A61K39/00）；繁殖、维持或保藏微生物或其组合物的方法；制备或分离含有一种微生物的组合物的方法；及其培养基〔3，2006.01〕 C12N1/20 细菌；其培养基〔3〕 C12N1/21 引入外来遗传物质修饰的〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;/;2;1;;;C;1;2;N;9;/;1;0;;;C;1;2;R;1;/;1;9查看分类表>
申请人	江南大学	申请人地址	江苏省无锡市蠡湖大道1800号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	江南大学	当前权利人	江南大学
发明人	吴志猛;赵鑫锐;洪皓飞
代理机构	北京爱普纳杰专利代理事务所（特殊普通合伙）	代理人	张勇

摘要

本发明公开了一种高效分泌表达转肽酶SortaseA的方法，属于基因工程领域。本发明成功实现了利用诱导时添加甘氨酸的添加策略在重组大肠菌BL21(DE3)中胞外高效生产转肽酶SortaseA，解决了目前转肽酶SortaseA分泌效率低，发酵周期长的问题。本发明通过对目的蛋白载体以及发酵体系中添加剂和添加策略的优化，表明pET‑22b载体是适合SortaseA胞外生产的载体，采取两阶段添加甘氨酸(阶段一：诱导时添加终浓度为0.5％的甘氨酸；阶段二：诱导后6小时添加2％的甘氨酸)可以极大地提高大肠杆菌胞外生产SortaseA的水平。该发明第一次实现了SortaseA在大肠杆菌中的胞外高效生产，为后续SortaseA的工业化生产奠定了基础。

序号	公开(公告)号	公开(公告)日	申请日	专利名称	申请人
该专利没有引用任何外部专利数据！

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