一种基因工程菌及其在制备莱鲍迪甙A中的应用

发明专利有效专利

申请号：
CN201710123817.1
IPC分类号：C12N15/62;C12N15/81;C12N1/19;C12P19/56;C12R1/865
申请日期：
2017-03-03
申请人：
南京工业大学;兴化格林生物制品有限公司

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专利名称	一种基因工程菌及其在制备莱鲍迪甙A中的应用
申请号	CN201710123817.1	申请日期	2017-03-03
法律状态	授权	申报国家	中国
公开/公告日	2017-07-07	公开/公告号	CN106929525A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/62 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/11 DNA或RNA片段；其修饰形成（不用于重组技术的DNA或RNA入C07H 21/00）〔5〕 C12N15/62 编码融合蛋白质的DNA序列〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;6;2;;;C;1;2;N;1;5;/;8;1;;;C;1;2;N;1;/;1;9;;;C;1;2;P;1;9;/;5;6;;;C;1;2;R;1;/;8;6;5查看分类表>
申请人	南京工业大学;兴化格林生物制品有限公司	申请人地址	江苏省南京市浦口区浦珠南路30号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	南京工业大学,兴化格林生物制品有限公司	当前权利人	南京工业大学,兴化格林生物制品有限公司
发明人	李艳;李阳阳;周伯雅;严明;陈可泉;郝宁;张竹山;于青海;陈剑波
代理机构	南京新慧恒诚知识产权代理有限公司	代理人	李晓静

摘要

本发明公开了一种基因工程菌及其在制备莱鲍迪甙A中的应用，首先构建得到产甜叶菊糖基转移酶UGT76G1和UDP‑葡萄糖焦磷酸化酶UGPase的基因工程菌，它是在组成型表达甜叶菊糖基转移酶UGT的重组菌基础上，过表达UDP‑葡萄糖焦磷酸化酶UGPase，增加糖基化反应的糖基供体量。然后建立全细胞催化反应体系，将甜菊甙转化为莱鲍迪甙A。菌用量浓度为1~10g/L；葡萄糖用量20~120g/L；底物甜菊糖甙的用量为1~20g/L，催化反应过程中，对细胞催化剂进行表面活性剂处理，增加了细胞通透性，大幅提高了莱鲍迪甙A的产量。本发明利用胞内UDPG的合成途径，提高胞内UDPG糖基共体量，避免其额外添加、实现再生循环，酵母的培养和重组酶的表达同时进行，缩短了重组菌培养及重组酶表达的周期。

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