一种快速准确检测大肠杆菌O157:H7活菌试剂盒及其检测方法

发明专利无效专利

申请号：
CN201310352563.2
IPC分类号：C12Q1/68;C12Q1/10
申请日期：
2013-08-13
申请人：
无锡中德伯尔生物技术有限公司

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专利名称	一种快速准确检测大肠杆菌O157:H7活菌试剂盒及其检测方法
申请号	CN201310352563.2	申请日期	2013-08-13
法律状态	驳回	申报国家	中国
公开/公告日	2013-12-25	公开/公告号	CN103468797A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12Q1/68 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12Q 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（免疫检测入G01N33/53）；其所用的组合物或试纸；这种组合物的制备方法；在微生物学方法或酶学方法中的条件反应控制〔3〕 C12Q1/00 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（带有条件测量或传感器的测定或试验装置，如菌落计数器入C12M1/34）；其组合物；这种组合物的制备方法〔3，2006.01〕 C12Q1/68 包括核酸〔3，2006.01，2018.01〕	IPC分类号	C;1;2;Q;1;/;6;8;;;C;1;2;Q;1;/;1;0查看分类表>
申请人	无锡中德伯尔生物技术有限公司	申请人地址	江苏省无锡市惠山区堰新路311号5号楼变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	无锡中德伯尔生物技术有限公司	当前权利人	无锡中德伯尔生物技术有限公司
发明人	李林;杨晓慧;许恒毅;徐波
代理机构	南京经纬专利商标代理有限公司	代理人	李纪昌

摘要

本发明公开了一种大肠杆菌O157:H7的PCR的检测方法。本发明针对大肠杆菌O157:H7的rfbE基因，设计一对扩增634bp的特异性PCR引物，同时为防止PCR检测时PCR抑制剂存在引起的假阳性结果，在PCR体系中添加了一对扩增16SrRNA保守区域引物。主要采用磁珠富集的方法从实际样本中分离出目的菌。通过叠氮溴化丙锭（PMA）处理分离的大肠杆菌O157:H7以去除死菌的干扰。最后通过PCR扩增和电泳检测确定实际样本中是否受到大肠杆菌O157:H7的污染。本发明的检测方法具有灵敏度高、特异性强、检测时间短，操作过程简单，并且不会被食物样品中残留的DNA或死菌的干扰，同时也排除了实际样本中PCR抑制剂而引起的假阳性结果，使得检测结果准确可靠。

序号	公开(公告)号	公开(公告)日	申请日	专利名称	申请人
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