一种基于声致穿孔的单细胞基因转染方法

发明专利有效专利

申请号：
CN202110110696.3
IPC分类号：C12N15/88;C12N13/00
申请日期：
2021-01-27
申请人：
上海交通大学

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专利名称	一种基于声致穿孔的单细胞基因转染方法
申请号	CN202110110696.3	申请日期	2021-01-27
法律状态	实质审查	申报国家	中国
公开/公告日	2021-05-18	公开/公告号	CN112813105A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/88 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/87 使用其他类目中不包含的方法（如共转化）引入外来遗传物质〔5〕 C12N15/88 使用微胶囊，如使用脂质体囊〔5，2006.01〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;8;8;;;C;1;2;N;1;3;/;0;0查看分类表>
申请人	上海交通大学	申请人地址	上海市闵行区东川路800号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	上海交通大学	当前权利人	上海交通大学
发明人	秦鹏;贾彩霞
代理机构	上海科盛知识产权代理有限公司	代理人	刘燕武

摘要

本发明涉及一种基于声致穿孔的单细胞基因转染方法，包括以下步骤：(1)制备阳离子磷脂微泡；(2)将靶细胞加入微泡共孵育，使得微泡贴合于靶细胞膜表面，之后加入混有基因转染试剂的细胞缓冲液；(3)装载超声换能器，确保靶细胞在超声的有效作用范围；(4)发射单脉冲超声，介导微泡发生声空化，促使靶细胞的细胞膜发生可逆性穿孔，使得基因转染试剂从穿孔处进入靶细胞内，完成转染。与现有技术相比，本发明通过给予靶细胞安全有效的声空化剂量，引起靶细胞膜发生可逆性穿孔，利用细胞膜穿孔到再封闭这一时间窗，基因转染试剂从穿孔处进入细胞内实现转染，有效提高基因转染效率，同时保证生物安全性，降低细胞治疗中的副作用。

序号	公开(公告)号	公开(公告)日	申请日	专利名称	申请人
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