一种通过提高胞内辅酶水平加强2,3-丁二醇合成的方法

发明专利有效专利

申请号：
CN201510524310.8
IPC分类号：C12N15/53;C12N1/21;C12P7/18;C12R1/07
申请日期：
2015-08-24
申请人：
江南大学;江南大学（如皋）食品生物技术研究所;如皋江大食品生物技术研究所有限公司

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专利名称	一种通过提高胞内辅酶水平加强2,3-丁二醇合成的方法
申请号	CN201510524310.8	申请日期	2015-08-24
法律状态	授权	申报国家	中国
公开/公告日	2015-12-16	公开/公告号	CN105154456A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/53 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/11 DNA或RNA片段；其修饰形成（不用于重组技术的DNA或RNA入C07H 21/00）〔5〕 C12N15/52 编码酶或酶原的基因〔5〕 C12N15/53 氧化还原酶（1）〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;5;3;;;C;1;2;N;1;/;2;1;;;C;1;2;P;7;/;1;8;;;C;1;2;R;1;/;0;7查看分类表>
申请人	江南大学;江南大学（如皋）食品生物技术研究所;如皋江大食品生物技术研究所有限公司	申请人地址	江苏省无锡市蠡湖大道1800号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	江南大学,江南大学（如皋）食品生物技术研究所	当前权利人	江南大学,江南大学（如皋）食品生物技术研究所
发明人	饶志明;杨套伟;胡桂元;刘梅;戴悦;刘畅;李磊;周昌洋;张显;徐美娟
代理机构	暂无	代理人	暂无

摘要

2,3‑丁二醇的合成最后一步是乙偶姻还原酶催化还原乙偶姻合成2,3‑丁二醇，此反应需要还原型辅酶NADH的参与，因此，胞内辅酶NADH水平的高低是影响乙偶姻向2,3‑丁二醇转化程度的一个重要因素。为进一步提高该菌株2,3‑丁二醇合成能力，并减少副产物乙偶姻的积累，发明人将HpaII‑fdh片段插入到基因nox内部，获得片段nox::HpaII‑fdh，并将该片段导入解淀粉芽孢杆菌B10‑127中，通过同源重组原理获得染色体组上基因nox内部被fdh基因插入的重组解淀粉芽孢杆菌(重新命名为N△F)。并对原始菌及重组菌N△F进行2,3‑丁二醇发酵性能检测，结果表明，与原始菌株相比，重组菌2,3‑丁二醇产量提高了18.9％，副产物乙偶姻产量降低70.8％。说明该策略能够提高2,3‑丁二醇产量，降低副产物乙偶姻的积累。

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