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一种具有ccdB负筛作用的菌株及其构建方法

发明专利有效专利
  • 申请号:
    CN201811305441.7
  • IPC分类号:C12N1/21;C12N15/70
  • 申请日期:
    2018-11-02
  • 申请人:
    云舟生物科技(广州)有限公司
著录项信息
专利名称一种具有ccdB负筛作用的菌株及其构建方法
申请号CN201811305441.7申请日期2018-11-02
法律状态授权申报国家中国
公开/公告日2019-06-25公开/公告号CN109929788A
优先权暂无优先权号暂无
主分类号C12N1/21IPC分类号C;1;2;N;1;/;2;1;;;C;1;2;N;1;5;/;7;0查看分类表>
申请人云舟生物科技(广州)有限公司申请人地址
广东省广州市广州高新技术产业开发区科学城掬泉路3号广州国际企业孵化器(D区)D301-D309号房 变更 专利地址、主体等相关变化,请及时变更,防止失效
权利人云舟生物科技(广州)有限公司当前权利人云舟生物科技(广州)有限公司
发明人蓝田;施金秀;罗燕;蒙伟能
代理机构广州三环专利商标代理有限公司代理人颜希文;罗尧
摘要
本发明公开了一种具有ccdB负筛作用的菌株,所述菌株为去掉了F因子中ccdA基因和TetR基因的菌株。本发明还公开了具有ccdB负筛作用的菌株构建方法,包括以下步骤:(1)利用Red/ET同源重组技术将菌株中F因子上的ccdA和TetR基因替换为FRT‑Kancassette‑FRTDNA序列,得到基因编辑后的F因子;(2)提供表达FLP重组酶的质粒,通过所述质粒表达的FLP重组酶介导重组反应,删除所述基因编辑后的F因子上两个FRT位点中间的外源序列,即得所述具有ccdB负筛作用的菌株。本发明构建的菌株具有ccdB负筛作用,可应用于基于Gateway和GoldenGate等技术的载体构建,该菌株对重复序列等复杂片段具有良好的稳定复制能力。

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