一种用于鉴定CHO细胞的SCAR标记及其构建方法和应用

发明专利有效专利

申请号：
CN202011161692.X
IPC分类号：C12N15/11;C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12Q1/6811;C12Q1/04
申请日期：
2020-10-27
申请人：
武汉珈创生物技术股份有限公司

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专利名称	一种用于鉴定CHO细胞的SCAR标记及其构建方法和应用
申请号	CN202011161692.X	申请日期	2020-10-27
法律状态	授权	申报国家	暂无
公开/公告日	2021-02-02	公开/公告号	CN112301028A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/11 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/11 DNA或RNA片段；其修饰形成（不用于重组技术的DNA或RNA入C07H 21/00）〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;1;1;;;C;1;2;Q;1;/;6;8;8;8;;;C;1;2;Q;1;/;6;8;5;8;;;C;1;2;Q;1;/;6;8;1;1;;;C;1;2;Q;1;/;0;4查看分类表>
申请人	武汉珈创生物技术股份有限公司	申请人地址	湖北省武汉市东湖开发区高新大道666号武汉国家生物产业基地项目B、C、D区研发楼B1栋变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	武汉珈创生物技术股份有限公司	当前权利人	武汉珈创生物技术股份有限公司
发明人	臧照星;刘愈杰;徐国东
代理机构	北京汇泽知识产权代理有限公司	代理人	吴静

摘要

本发明提供一种用于鉴定CHO细胞的SCAR标记及其构建方法和应用，利用CHO细胞基因组的特异性，以亲缘关系较近的BHK‑21细胞为对照细胞，从60条RAPD引物中筛选到特异性较好，稳定性较高的两条RAPD引物，并获得了三个稳定的特异性条带；通过基因克隆，将这三个片段连接至PMD19‑T后进行测序，使用NCBI BLAST在线比对工具对测序获得的三个序列进行比对，获得了三个只与中国仓鼠相对应的序列(Access number:XR_004770315.1,NW_003623089.1,XM_003515610.5)，除此之外，没有发现其他与之同源性较高的序列，并在此基础上分别在每个序列上设计一对稳定的SCAR标记引物，之后通过对SCAR引物退火温度的摸索，获得合适的退火温度，以提高本法的准确性。本发明具有操作方便、简单、实验结果稳定、特异性强和灵敏度高等特点。

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