一种启动子文库构建方法和强启动子

发明专利有效专利

申请号：
CN201510799249.8
IPC分类号：C12N15/113;C12N15/75;C12N1/21;C12Q1/68;C12Q1/02;C40B40/06;C40B50/06;C12R1/125
申请日期：
2015-11-18
申请人：
湖北大学

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法律信息

引证文献

著录项信息

专利名称	一种启动子文库构建方法和强启动子
申请号	CN201510799249.8	申请日期	2015-11-18
法律状态	授权	申报国家	中国
公开/公告日	2016-02-03	公开/公告号	CN105296486A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/113 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/11 DNA或RNA片段；其修饰形成（不用于重组技术的DNA或RNA入C07H 21/00）〔5〕 C12N15/113 调节基因表达的非编码核酸，如反义寡核苷酸〔2010.01〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;1;1;3;;;C;1;2;N;1;5;/;7;5;;;C;1;2;N;1;/;2;1;;;C;1;2;Q;1;/;6;8;;;C;1;2;Q;1;/;0;2;;;C;4;0;B;4;0;/;0;6;;;C;4;0;B;5;0;/;0;6;;;C;1;2;R;1;/;1;2;5查看分类表>
申请人	湖北大学	申请人地址	湖北省武汉市武昌区友谊大道368号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	湖北大学	当前权利人	湖北大学
发明人	张桂敏;卢争辉;周玉玲;马延和
代理机构	北京轻创知识产权代理有限公司	代理人	陈卫

摘要

本发明涉及一种启动子文库，包括至少两个启动子，其中一个启动子包括SEQIDNO.3所示的核苷酸序列，另一个启动子包括SEQIDNO.4所示的核苷酸序列。在构建启动子文库时，以整合型载体pDG1730作为出发载体，插入转录终止子T1T2、T0以及报告基因，得到启动子探针载体pDGT‑GFP；再选取四个在枯草杆菌中具有强转录强度的启动子作为出发启动子，设计24条在退火后能形成相同黏性末端的寡核苷酸引物，借助寡核苷酸退火,经载体连接转化得到启动子文库。通过测定转化子的相对荧光强度，筛选得到两个比强启动子P43和出发启动子更强的启动子，经筛选得到的启动子可用于增强蛋白的表达。

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