小麦矮腥黑穗病菌实时荧光PCR固相化试剂盒及其检测方法

发明专利无效专利

申请号：
CN200610054091.2
IPC分类号：C12N15/31;C12Q1/68;C07H21/00
申请日期：
2006-02-21
申请人：
重庆大学;重庆重大生物技术发展有限公司;四川渝高科技有限责任公司

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专利名称	小麦矮腥黑穗病菌实时荧光PCR固相化试剂盒及其检测方法
申请号	CN200610054091.2	申请日期	2006-02-21
法律状态	权利终止	申报国家	中国
公开/公告日	2006-09-27	公开/公告号	CN1837364
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/31 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/11 DNA或RNA片段；其修饰形成（不用于重组技术的DNA或RNA入C07H 21/00）〔5〕 C12N15/31 编码微生物蛋白质，如内毒素的基因〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;3;1;;;C;1;2;Q;1;/;6;8;;;C;0;7;H;2;1;/;0;0查看分类表>
申请人	重庆大学;重庆重大生物技术发展有限公司;四川渝高科技有限责任公司	申请人地址	重庆市沙坪坝区沙正街174号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	重庆大学,重庆重大生物技术发展有限公司,四川渝高科技有限责任公司	当前权利人	重庆大学,重庆重大生物技术发展有限公司,四川渝高科技有限责任公司
发明人	王中康;殷幼平;夏玉先;袁青;曹月青;王春林;彭国雄;曾德玉
代理机构	重庆市前沿专利事务所	代理人	郭云

摘要

本发明依据随机引物介导的多聚酶链式反应(RM-PCR)，从美国小麦矮腥黑穗菌(Tilletia controversa Kuhn TCK)基因组DNA中克隆鉴定的端粒相关序列特征片段；并研制出基于差异片段序列的特异性引物、探针和实时荧光PCR固相化试剂盒，用于TCK冬孢子或侵染菌丝体等不同样品诊断、鉴定的快速检测方法，从样品制备到检测结果的全过程仅需4小时，固相化试剂盒灵敏度高(几百个拷贝)、特异性强(仅检出TCK)、稳定可靠。该发明可以准确地区分TCK与近源种腥黑穗菌如小麦网腥黑穗菌(Tilletiatriticii Tul，TCT)，解决了形态学鉴定既费时且不准确的难题，可以满足进境疫麦的快速鉴定和后期监管的需求，适用于小麦矮腥黑穗病的早期诊断，麦粒包装等带菌材料的分子检验和近缘种的诊断鉴定。

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