一种利用恒温扩增反应合成荧光纳米银簇探针定量检测microRNA的分析方法

发明专利有效专利

申请号：
CN201210107456.9
IPC分类号：C12Q1/68
申请日期：
2012-04-13
申请人：
华东理工大学

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专利名称	一种利用恒温扩增反应合成荧光纳米银簇探针定量检测microRNA的分析方法
申请号	CN201210107456.9	申请日期	2012-04-13
法律状态	授权	申报国家	中国
公开/公告日	2012-10-10	公开/公告号	CN102719526A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12Q1/68 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12Q 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（免疫检测入G01N33/53）；其所用的组合物或试纸；这种组合物的制备方法；在微生物学方法或酶学方法中的条件反应控制〔3〕 C12Q1/00 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（带有条件测量或传感器的测定或试验装置，如菌落计数器入C12M1/34）；其组合物；这种组合物的制备方法〔3，2006.01〕 C12Q1/68 包括核酸〔3，2006.01，2018.01〕	IPC分类号	C;1;2;Q;1;/;6;8查看分类表>
申请人	华东理工大学	申请人地址	上海市徐汇区梅陇路130号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	华东理工大学	当前权利人	华东理工大学
发明人	叶邦策;尹斌成;刘玉强
代理机构	上海新天专利代理有限公司	代理人	邬震中

摘要

本发明提供一种利用恒温扩增反应合成荧光纳米银簇探针定量检测microRNA的分析方法。该方法是，设计一条含有三种功能序列的DNA扩增模板：与靶标microRNA结合序列，nicking核酸内切酶酶切序列和合成荧光纳米簇的DNA互补序列。当靶标microRNA与DNA扩增模板结合后，诱导恒温扩增反应和nicking核酸内切酶特异性的酶切反应，得到大量单链DNA产物，其中合成荧光纳米银簇的DNA序列与硝酸银溶液在硼氢化钠的还原作用下制备荧光纳米银簇探针，测定反应体系的荧光信号并计算荧光改变值，与标准工作曲线比对，推算出靶标microRNA的浓度。该方法具有灵敏度高、特异性强、线性检测范围宽、背景信号低、操作简单等特点，可广泛应用于组织，血液或细胞的生物样本中microRNA检测。

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