溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库构建方法

发明专利无效专利

申请号：
CN200610124341.5
IPC分类号：C40B40/06;C40B50/06;C12N15/31
申请日期：
2006-12-22
申请人：
广东海洋大学

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著录项信息

专利名称	溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库构建方法
申请号	CN200610124341.5	申请日期	2006-12-22
法律状态	权利终止	申报国家	中国
公开/公告日	2007-08-22	公开/公告号	CN101021015
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C40B40/06 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C4 组合技术 C40 组合技术〔8〕 C40B 组合化学；化合物库，如化学库、虚拟库〔8〕 C40B40/00 库本身，如阵列、混合物〔8〕 C40B40/04 仅含有机化合物的化合物库〔8〕 C40B40/06 含核苷或多核苷酸，或其衍生物的化合物库〔8〕	IPC分类号	C;4;0;B;4;0;/;0;6;;;C;4;0;B;5;0;/;0;6;;;C;1;2;N;1;5;/;3;1查看分类表>
申请人	广东海洋大学	申请人地址	广东省湛江市霞山区解放东路40号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	广东海洋大学	当前权利人	广东海洋大学
发明人	吴灶和;王蓓;简纪常;鲁义善
代理机构	湛江市三强专利事务所	代理人	庞爱英

摘要

一种溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库构建方法，以溶藻弧菌为材料，用提取总RNA、反转录、应用RD-PCR技术扩增反转录得到的双链DNA、分子克隆及ESTs生物信息学等方法对该菌进行研究。此方法具有质量高，所筛选的基因片段重复性低，筛选基因片段效率高，目的性强等特点。该文库应用了RD-PCR技术，对欲克隆的基因片段进行了扩增，由于酶切后片段大小较均一，可以有效地避免PCR对短片的优先扩增，防止所构建的cDNA文库出现明显偏向，在这点上优于一般PCR介导的cDNA文库构建法。该文库可以作为深入研究溶藻弧菌毒力因子以及致病机理的基础；能为研制新型基因工程疫苗提供新的思路。

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