食蟹猴U6启动子高效表达小RNA及多个小RNA表达的载体构建方法

发明专利有效专利

申请号：
CN201911395535.2
IPC分类号：C12N15/113;C12N15/867;C12N15/66
申请日期：
2019-12-30
申请人：
云舟生物科技（广州）有限公司

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专利名称	食蟹猴U6启动子高效表达小RNA及多个小RNA表达的载体构建方法
申请号	CN201911395535.2	申请日期	2019-12-30
法律状态	授权	申报国家	中国
公开/公告日	2020-05-01	公开/公告号	CN111088256A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/113 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/11 DNA或RNA片段；其修饰形成（不用于重组技术的DNA或RNA入C07H 21/00）〔5〕 C12N15/113 调节基因表达的非编码核酸，如反义寡核苷酸〔2010.01〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;1;1;3;;;C;1;2;N;1;5;/;8;6;7;;;C;1;2;N;1;5;/;6;6查看分类表>
申请人	云舟生物科技（广州）有限公司	申请人地址	广东省广州市广州高新技术产业开发区科学城掬泉路3号广州国际企业孵化器(D区)D301-D309号房变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	云舟生物科技（广州）有限公司	当前权利人	云舟生物科技（广州）有限公司
发明人	蓝田;施金秀;罗燕
代理机构	广州三环专利商标代理有限公司	代理人	颜希文

摘要

本发明提供了一种食蟹猴U6基因启动子macU6，包括如SEQIDNO：1所示的核苷酸酸序列。本发明首次在食蟹猴基因组中获得一段与U6启动子同源的序列，即macU6启动子，且具有高效的转录能力。并将其引入到多gRNA表达载体中。本发明中采用GoldenGate克隆技术和Gateway重组克隆技术相结合的方法，构建出由不同U6启动子驱动gRNA串联表达的多gRNA表达载体，该方法简单、高效、灵活、省时。同时，通过引入新的高效的macU6启动子来解决因U6启动子种类过少、U6重复出现导致的载体不稳定问题。

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