一种稳定的环状DNAzyme的制备方法及其在Pb2+检测中的应用

发明专利有效专利

申请号：
CN202011006669.3
IPC分类号：C12N15/113;C12P19/34;C12Q1/682;G01N21/33;G01N21/64
申请日期：
2020-09-23
申请人：
农业农村部环境保护科研监测所

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专利名称	一种稳定的环状DNAzyme的制备方法及其在Pb2+检测中的应用
申请号	CN202011006669.3	申请日期	2020-09-23
法律状态	实质审查	申报国家	中国
公开/公告日	2021-01-05	公开/公告号	CN112175950A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/113 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/11 DNA或RNA片段；其修饰形成（不用于重组技术的DNA或RNA入C07H 21/00）〔5〕 C12N15/113 调节基因表达的非编码核酸，如反义寡核苷酸〔2010.01〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;1;1;3;;;C;1;2;P;1;9;/;3;4;;;C;1;2;Q;1;/;6;8;2;;;G;0;1;N;2;1;/;3;3;;;G;0;1;N;2;1;/;6;4查看分类表>
申请人	农业农村部环境保护科研监测所	申请人地址	天津市南开区复康路31号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	农业农村部环境保护科研监测所	当前权利人	农业农村部环境保护科研监测所
发明人	姜红新;刘潇威;周其文;吉萍萍;赵玉杰;张富合
代理机构	天津知远君正专利代理事务所（特殊普通合伙）	代理人	何君

摘要

本发明开发了一种稳定的环状DNAzyme的制备方法及其在Pb2+检测中的应用，该环状DNAzyme由哑铃状单链DNA的自模板封闭而合成制备。由于环状结构中的双链以稳定的分子内杂交的形式存在，而且封闭的环状结构可以抵抗核酸酶的降解，因此该DNAzyme具有良好的热力学及生物学稳定性。接下来，基于该环状DNAzyme对Pb2+的高度依赖性(GR5 DNAzyme只有在Pb2+存在下才显示催化活性)，结合末端转移酶(TdT)延伸反应以及T7 Exo辅助的循环扩增技术，设计构建了超灵敏的Pb2+生物传感器。并将其用于了食品及环境样品中Pb2+的检测，检测结果与ICP‑MS仪器检测结果一致。

序号	公开(公告)号	公开(公告)日	申请日	专利名称	申请人
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