量子点标记的夹心免疫检测法及其诊断试剂盒

1、一种量子点标记的夹心免疫检测法，其特征在于：将捕捉抗 体直接或间接包被在聚苯乙烯板的微孔，形成三层夹心发光免疫复合 体，用荧光酶标仪激发并检测所形成的捕捉抗体-抗原-检测抗体三层 夹心发光免疫复合物的荧光强度，通过与标准溶液对比求出待测抗原 的浓度。
2、根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：三层夹心发 光免疫复合体的形成是加入待测样品后，捕捉抗体-抗原先反应形成 二元免疫复合物，加入检测抗体后，再通过抗原与检测抗体的特异性 结合形成捕捉抗体-抗原-检测抗体三层夹心的发光免疫复合体。
3、根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：三层夹心发 光免疫复合体的形成是同时加入生物素化的捕捉抗体、待测样品和检 测抗体后，一步反应直接形成捕捉抗体-抗原-检测抗体三层夹心发光 免疫复合体并借助亲和素或链霉亲和素与生物素的特异性结合将该 发光免疫复合体固定到聚苯乙烯板的微孔上。
4、根据权利要求1或2、3所述的检测方法，其特征在于：所说 的检测抗体是指用量子点标记的抗待测抗原的单克隆抗体，选用发射 不同光的量子点标记针对不同抗原的抗体可同时检测同一样品中的 多种待测抗原。
5、根据权利要求1或2、3所述的检测方法，其特征在于：量子 点则是指能够发射荧光的具有核壳结构的纳米粒子，其核壳由半导体 材料包覆而成，其核心部分为CdS、CdSe、CdTe、MgS、MgSe、MgTe、 CaS等任何一种发光量子点或称为半导体纳米微晶体，其发光颜色因 大小不同而异。
6、根据权利要求1或2、3所述的检测方法，其特征在于：捕捉 抗体也是抗待测抗原的单克隆抗体，这两株单抗应识别待测抗原分子 上不同的抗原表位，即具有互补性，能同时结合到同一抗原分子上。
7、根据权利要求1或2、3所述的检测方法，其特征在于：所说 的用荧光酶标仪激发并检测所形成的捕捉抗体-抗原-检测抗体三层 夹心发光免疫复合物的荧光强度是指用不同QDs标记的检测抗体经 荧光酶标仪激发后发射出不同颜色的光谱，在每种光谱的最大吸收波 长范围内检测其荧光强度。
8、根据权利要求1或2、3所述的检测方法，其特征在于：上述 的待测抗原可以是任何一种蛋白、肽类或其他小分子抗原，可以是心 肌肌钙蛋白I(cTnI)、胎儿甲种球蛋白(AFP)、乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)等；相应的捕捉抗体和检测抗体应为特异性抗每种待测抗 原的多克隆或单克隆抗体，它们可以是抗心肌肌钙蛋白I抗体，抗 AFP抗体，抗HBsAg抗体等；使用不同的单克隆或多克隆抗体，就 可检测不同的相应的待测抗原。
9、一种量子点标记的夹心免疫检测法诊断试剂盒，其特征在于 组成包括：
包被有捕捉抗体的聚苯乙烯微孔板或包被有亲和素的聚苯乙烯 微孔板和生物素化的捕捉抗体、
量子点标记的检测抗体、
阳性对照血清、
阴性对照血清、
pH7.2-7.4磷酸盐缓冲液。
10、根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于：捕捉抗体和标 记抗体是抗几种抗原的抗体混合物，用该试剂盒同时检测同一样品中 相应的几种抗原。

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