通过敲除口蹄疫病毒受体整合素β6亚基基因获得抗口蹄疫转基因牛的方法

发明专利无效专利

申请号：
CN201110261686.6
IPC分类号：C12N15/09;C12N15/877;A61D19/04;A01K67/027
申请日期：
2011-09-06
申请人：
山东省农业科学院奶牛研究中心

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专利名称	通过敲除口蹄疫病毒受体整合素β6亚基基因获得抗口蹄疫转基因牛的方法
申请号	CN201110261686.6	申请日期	2011-09-06
法律状态	权利终止	申报国家	中国
公开/公告日	2012-01-18	公开/公告号	CN102321609A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/09 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;0;9;;;C;1;2;N;1;5;/;8;7;7;;;A;6;1;D;1;9;/;0;4;;;A;0;1;K;6;7;/;0;2;7查看分类表>
申请人	山东省农业科学院奶牛研究中心	申请人地址	山东省济南市历城区工业北路159-1号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	山东省农业科学院奶牛研究中心	当前权利人	山东省农业科学院奶牛研究中心
发明人	何洪彬;王洪梅;武建明;刘晓;陈莉莉;高运东;仲跻峰
代理机构	济南圣达知识产权代理有限公司	代理人	杨琪

摘要

本发明公开了一种通过敲除口蹄疫病毒受体整合素β6亚基基因获得抗口蹄疫转基因牛的方法，是将线性化的携带有报告基因的突变的整合素β6亚基基因的打靶载体转染牛体细胞，通过同源重组获得替换整合素β6亚基基因的核供体细胞，将核供体细胞核导入牛的去核卵母细胞中得到重构胚，再将重构胚移入代孕牛子宫中，得到的子代即为整合素β6亚基基因被敲除的杂合子转基因牛。杂合子转基因牛经二次打靶和体细胞克隆获得纯合子转基因牛。用本方法获得的转基因牛低表达或不表达口蹄疫病毒受体整合素β6亚基，使FMDV感染率明显下降，其具备了抗FMD的能力。该发明打破了传统的通过免疫学手段预防FMD的思维模式，为控制和消灭牛FMD开辟了新的途径。

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