饲料中沙门氏菌的微滴数字PCR检测方法

发明专利无效专利

申请号：
CN201711383009.5
IPC分类号：C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/42
申请日期：
2017-12-20
申请人：
吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心

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著录项信息

专利名称	饲料中沙门氏菌的微滴数字PCR检测方法
申请号	CN201711383009.5	申请日期	2017-12-20
法律状态	撤回	申报国家	中国
公开/公告日	2018-05-18	公开/公告号	CN108048585A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12Q1/689 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12Q 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（免疫检测入G01N33/53）；其所用的组合物或试纸；这种组合物的制备方法；在微生物学方法或酶学方法中的条件反应控制〔3〕 C12Q1/00 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（带有条件测量或传感器的测定或试验装置，如菌落计数器入C12M1/34）；其组合物；这种组合物的制备方法〔3，2006.01〕 C12Q1/68 包括核酸〔3，2006.01，2018.01〕 C12Q1/6876 用于核酸分析的核酸产品，如引物或探针〔2018.01〕 C12Q1/6888 用于生物体的检测与识别〔2018.01〕 C12Q1/689 用于细菌〔2018.01〕	IPC分类号	C;1;2;Q;1;/;6;8;9;;;C;1;2;Q;1;/;6;8;6;;;C;1;2;Q;1;/;0;4;;;C;1;2;N;1;5;/;1;1;;;C;1;2;R;1;/;4;2查看分类表>
申请人	吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心	申请人地址	吉林省长春市绿园区普阳街1333号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心	当前权利人	吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心
发明人	王准;聂丹丹;李文君;杨帆;王玮琳;李忠起;彭勃;罗雁非;刘金华;刘韬
代理机构	长春市东师专利事务所	代理人	张铁生

摘要

本发明公开了鉴定沙门氏菌的PCR扩增引物及探针引物，包括：沙门氏菌引物正向序列：5＇‑GCGGCGTTGGAGAGTGATA‑3＇，反向序列；5＇‑AGCAATGGAAAAAGCAGGATG‑3＇；探针序列：5＇‑FAM‑CATTTCTTAAACGGCGGTGTCTTTCCCT‑TAMRA‑3＇；一种饲料中沙门氏菌的微滴数字PCR检测方法，包括以下步骤：称取样品至盛有225mL无菌培养液的均质袋中，用拍击式均质器拍打，稀释为1:10的样品匀液，进行增菌培养，得到增菌液；提取待测样品、阳性对照、阴性对照的DNA；获得鉴定沙门氏菌的PCR扩增引物及探针引物；将所得DNA进行微滴数字PCR扩增，获得反应液；对反应液进行检测与分析。结果表明该引物对沙门氏菌的扩增具有特异性；同时微滴数字PCR对其扩增稳定，具有重复性；取浓度为108‑103的基因序列进行检测，灵敏度良好。

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