一种防治上呼吸道的流感感染的药物及制备方法

1.一种防治上呼吸道的流感感染的药物，其特征在于：原料药 的组成为
甘草0.5-2.5份     黄芪0.5-3.0份    细辛0.25-1.0份
乳香0.5-1.75份    丹参0.5-2.5份    当归0.5-2.0份
赤芍0.2-0.5份     红花0.2-1.0份    苍术0.25-1.75份。
2.根据权利要求1所述的防治上呼吸道的流感感染的药物，其 特征在于：原料药的组成为甘草1.5份    黄芪0.5份    细辛0.5份    乳香1.0份
丹参0.5份    当归0.5份    赤芍0.2份    红花0.5份
苍术0.5份。
3.根据权利要求1或2所述的防治上呼吸道的流感感染药物的 制备方法，其特征在于包括下列步骤：
(1)、各味中药材饮片达中国药典2000版一部标准；
(2)、按配方称取中药饮片加10倍水煮沸3-4小时，去沉渣收上 清液；
(3)、按量加乙醇，乙醇最终浓度为70％，然后去杂；
(4)、收上清，减压蒸发去乙醇；
(5)、用不同孔径纤维膜澄清除菌，加无菌蒸馏水配成要求的药 液浓度，分装成喷雾剂或口服液。

技术领域\n本发明属于中医药技术领域，涉及防治流感等上呼吸道感染的中药制剂及其制备方 法。\n背景技术\n每年冬春季都是上呼吸道感染性疾病的多发期，其中包括病毒细菌引起的普通感 冒、咽喉炎、流行性感冒等，尤其流感对社会影响较大，能引起疾病的流行，使人们的 身心健康受到极大的威胁。现在除用流感疫苗预防外，别无其他防治手段，特别是能直 接消杀上呼吸道流感病毒的中草药纯化的喷雾制剂更为少见。\n发明内容\n本发明提供了一种有效防治流感等上呼吸道感染的中药组合物，并提供了该组合物 的制备和质检方法。根据中药药理学和中药免疫学的理论，药物组分的用量进行了大量 的实验总结得出各组分在下述范围有较好的疗效：\n甘草0.5-2.5份、黄芪0.5-3.0份、细辛0.25-1.0份、乳香0.5-1.75份、丹参0.5- 2.5份、当归0.5-20份、赤芍0.2-0.5份、红花0.2-1.0份、苍术0.25-1.75份。\n优选为：甘草1.5份、黄芪0.5份、细辛0.5份、乳香1.0份、丹参0.5份、当归0.5份、 赤芍0.2份、红花0.5份、苍术0.5份\n喷雾剂制备方法由下列组成：\n1.各味中药材饮片需达中国药典2000版一部标准。\n2.按配方称取中药饮片加10倍水煮沸3-4小时，去沉渣收上清液。\n3.按量加乙醇，乙醇最终浓度为70％，然后去杂质。\n4.收上清，减压蒸发去乙醇。\n5.用不同孔径纤维膜澄清除菌，加无菌蒸馏水配成要求的药液浓度，装瓶分装成喷雾 剂或口服液\n抗流感病毒效力及无菌检查\n1.用鸡胚EID50法检测该批制品杀流感病毒(甲1型，乙型)的效力，灭病毒指数达 106EID50以上为合格，达不到要求废弃。\n2.按生物制品常规抽检样品进行无菌试验，无菌试验应合格。\n以上二项检查合格后，制品可进行分包装。\n本发明的中药制剂对流感病毒(甲1型，乙型)均有极强的杀灭作用，40％草药浓 度能抑制病毒指数高达106EID50以上，同时对上呼吸道细菌也有抑制作用。在感冒初期 如鼻塞、流鼻涕及咽喉肿痛时，是上呼吸道病毒和致病细菌在上呼吸道局部感染增殖期。 用本品喷洒在局部，能很快杀灭局部的病毒及细菌，使其不能继续增殖蔓延，也控制了 病毒向其他健康人传播，病人症状也同时消失，很快达到痊愈，起到治病和防病的双重 作用。目前国内外尚无对流感病毒有如此强杀灭作用的中药制剂。本发明为控制流感等 上呼吸道感染提供一种新型中药制剂，使用方便，效果可靠，无任何毒副作用。\n具体实施方案\n下面结合实施例对本发明通过以下试验进一步阐述本发明所述药物的有益效果，这些试 验包括本发明药物(以下简称清瘟灵)的药效、药理、毒理检查和临床疗效观察。\n[实施例]清瘟灵喷雾剂的制备\n1.称取甘草15克、黄芪5克、细辛5克、乳香10克、丹参5克、当归5克、赤芍2 克、苍术5克等饮片备用。\n2.置于提取罐中加10倍量水，煎煮三小时时间，去渣取上清，加入乙醇到70％，去 杂质进行纯化，再去沉淀收上清，减压蒸发去乙醇，得药液经0.45u孔径纤维素膜 澄清后，加热灭菌，即得澄清透明药液。加无菌蒸馏水配成40％的药液，药液呈棕 黄色透明液体，无菌分装喷雾瓶中，每瓶10-20ml.\n3.分装前做抗病毒试验测定生物活性，抗流感病毒指数达不到要求，药液废弃。\n[试验例1]清瘟灵喷雾剂抗流感病毒试验\n1.试验材料\n1)本发明药物“清瘟灵喷雾剂”三批(04-1、04-2、04-3)，药液浓度为40％(生 药W/V)\n2)甲1型流感病毒株A1/NEW CALEDONIA-中国药品生物制品检定所提供\n3)乙型流感病毒株B/SHANG DONG-中国药品生物制品检定所提供\n4)11日龄鸡胚-长春生物制品研究所提供\n5)1％鸡血球混悬液\n2.试验方法\n1)以药液为稀释液，按10倍连续稀释法分别稀释甲1型和乙型流感病毒，即为药 液与病毒混合液，放室温40分钟，然后按常规将混合液接种在鸡胚尿囊腔中， 37℃孵育三日，再放4℃冷胚，次日取每胚尿液与1％鸡血球混悬液做血凝集 试验，血凝阳性者证明有病毒增殖，阴性即证明病毒被药液杀死，无病毒繁殖。\n同时做单纯病毒对照，计算灭活病毒量(灭活病毒量EID50＝单纯病毒对照EID50 -药液加病毒混合液EID50，即为0.2ml药液可灭活病毒的EID50数)\n2)按2倍连续稀释法将清瘟灵喷雾剂稀释成不同浓度的药液，与200个EID50甲1 型病毒混合，室温作用40分钟，按上述方法进行血凝试验测其对病毒的灭活作 用，然后计算清瘟灵喷雾剂药液的EC50(半数有效浓度)和EC90(90％有效浓 度)。\n3.试验结果\n1)清瘟灵喷雾剂对鸡胚无任何毒性作用。结果见表1。\n表1清瘟灵喷雾剂对鸡胚的毒性作用\n  药液批号   接种鸡胚数   每胚接种量  孵育3天活存  胚数   结论   04-1   04-2   04-3   5   5   5   0.2ml   0.2ml   0.2ml  5  5  5   无毒   无毒   无毒\n2)清瘟灵喷雾剂药液对甲1型流感病毒的灭活作用，毒株为A1/NEW CALEDONIA，对甲1型流感病毒的灭活作用均在106EID50以上。灭活结果见 表2。\n表2清瘟灵喷雾剂药液对甲1型流感病毒的灭活作用\n\n※分母为每次接种胚数，分子为尿液血凝阳性数，“-”代表未做。\n3)清瘟灵喷雾剂药液对乙型流感病毒的灭活作用，毒株为B/SHANG DONG，对乙 型流感病毒的灭活作用均在1055EID50以上。灭活结果见表3。\n表3清瘟灵喷雾剂药液对乙型流感病毒的灭活作用\n\n※分母为每次接种胚数，分子为尿液血凝阳性数，“-”代表未做。\n4)不同浓度的清瘟灵喷雾剂药液对200个甲1型流感病毒测灭活作用，计算EC50 (半数有效浓度)为37.1mg/ml。EC90(90％有效浓度)为77.7mg/ml。结果 见表4。\n表4清瘟灵喷雾剂药液测定EC50和EC90剂量(抗甲1型流感病毒)\n\n[试验例2]清瘟灵喷雾剂抗细菌试验\n1.试验材料\n1)清瘟灵喷雾剂三批(04-1，04-2，04-3)药液浓度为40％(生药W/V)。\n2)嗜血性流感杆菌、金黄色葡萄球菌、A型溶血链球菌等，菌种均由中国药品生 物制品检定所提供。\n3)适于不同菌种的培养基，自备。\n4)平皿。\n5)不锈钢管，内径为6.0mm，高10mm。\n6)氨苄青霉素，华北制药厂产品。\n2.试验方法\n1)菌悬液的制备：取嗜血性流感杆菌、金黄色葡萄球菌、A型溶血链球菌等24小 时培养物，混悬于生理盐水中备用。\n2)双碟的制备：取直径为90mm的平皿，加20ml适宜培养基，均匀铺于碟底，另 取适量培养基加热融化，冷却到50℃后加适量菌液，摇匀，每碟加入5ml，均 匀摊布做为菌层，待冷却后，每碟中等距安放不锈钢管(内径6.0mm，高10mm) 盖上平皿盖备用。\n3)每个不锈钢管中加入待检药液150ul，只加入150ul生理盐水的钢管充阴性对照， 加入不同浓度的氨苄青霉素150ul充阳性对照，将试验平皿放37℃培养24小时 后，判定结果，出现抑菌环即视为有抑菌作用。\n3.试验结果：清瘟灵喷雾剂药液对嗜血性流感杆菌、金黄色葡萄球菌、A型溶血链球 菌均表现有抑菌作用。上述三种细菌均为上呼吸道常见的致病菌，尤其嗜血性流感 杆菌是流脑的主要病原体，抑菌环可达到10mm以上，结果见表。\n表\n\n※“-”代表无抑菌环出现。\n[试验例3]清瘟灵喷雾剂在小鼠体内抗流感病毒试验\n以嗜鼠肺流感病毒FM1株(中国疾病控制中心病毒所提供)感染小白鼠，用清瘟 灵喷雾剂口服4天，然后观察14天，计算死亡率。用注射干扰素做阳性对照，其结果 显示本品的死亡率低于干扰素(干扰素是公认的抗病毒药物之一)，也就是说本品抗流 感病毒的效果优于干扰素。\n[试验例4]清瘟灵喷雾剂的毒理作用\n本品对鸡胚无毒性(结果见试验例1)，对小鼠也无毒性，用小鼠做急性毒性试验，静 脉给药相当于0.5g生药/kg，没有毒性。口服给药相当于200g生药/kg的最大剂量仍未 见毒性。对大白鼠每日给药4次连续给药一周以上，口腔、鼻黏膜等上呼吸道黏膜未见 红肿，经病理学检测与空白对照一致，无任何病理组织学改变。\n[临床试验例1]清瘟灵喷雾剂对上呼吸道感染患者的治疗效果观察。\n20名男女感冒患者，年龄6-71岁，用本品向咽喉部、鼻腔喷药，每天3-4次，每 次3-5喷以上，一般2天后，患者的鼻塞、流鼻涕、咽喉肿痛等症状消失，2-3天 后痊愈。\n[临床试验例2]清瘟灵喷雾剂治疗口腔溃疡的效果观察。\n10名男女口腔溃疡、牙龈肿痛患者，用棉棒沾上本品涂抹患部，每天3-4次，2天 后痊愈。