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被检样品中的细菌数的定量方法

发明专利有效专利
  • 申请号:
    CN201880080998.7
  • IPC分类号:C12N15/09C12Q1/689
  • 申请日期:
    2018-06-21
  • 申请人:
    三井化学株式会社;国立大学法人富山大学
著录项信息
专利名称被检样品中的细菌数的定量方法
申请号CN201880080998.7申请日期2018-06-21
法律状态实质审查申报国家中国
公开/公告日2020-09-18公开/公告号CN111684067A
优先权暂无优先权号暂无
主分类号C12N15/09IPC分类号C12N15/09;C12Q1/689查看分类表>
申请人三井化学株式会社;国立大学法人富山大学申请人地址
日本*** 变更 专利地址、主体等相关变化,请及时变更,防止失效
权利人三井化学株式会社,国立大学法人富山大学当前权利人三井化学株式会社,国立大学法人富山大学
发明人仁井见英树;北岛勋;宫腰晃央;东祥嗣
代理机构北京市金杜律师事务所代理人杨宏军
摘要
本发明的课题在于提供能够使用PCR法迅速且精度良好地定量被检样品中的细菌菌数的方法。作为解决上述课题的方法,利用以下的工序进行被检样品中的细菌的鉴定及定量。(1)第一PCR工序,以来源于被检样品的核酸作为模板,使用用于扩增细菌的16SrRNA基因的通用引物对,利用PCR法得到第一扩增产物;(2)第二PCR工序,使用用于扩增利用前述第一PCR工序得到的第一扩增产物所具有的序列的内部序列的引物对,利用巢式PCR法得到第二扩增产物;以及(3)菌数定量工序,使用校准用的数据,从由前述第二PCR工序得到的第二扩增产物的量求出前述被检样品中的细菌数。另外,也可以在上述的工序(1)~(3)的基础上追加以下的工序(4)及(5)。(4)菌种鉴定工序,对前述被检样品中的细菌的菌种进行鉴定。(5)细菌数校正工序,以由前述菌数定量工序求出的细菌数作为暂定细菌数,基于前述对照细菌及由前述菌种鉴定工序鉴定出的菌种的16SrRNA操纵子拷贝数来校正暂定细菌数,从而确定前述被检样品中的细菌数。

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