氨基修饰的磁性纳米粒子及免疫磁性纳米分离试剂的制备方法

1.一种氨基修饰的磁性纳米粒子的制备方法，其包括下列步骤：
①将磁性纳米粒子与硅烷试剂按比例1∶0.5～10(g/ml)添加，以体积比为1∶1～30的甲苯和低级一元醇混合溶液为反应溶剂，加热至80℃～120℃在磁性纳米粒子表面进行硅胶包覆，得硅胶包覆的磁纳米粒子；
②将步骤①中硅胶包覆的磁纳米粒子与硅烷偶联剂按1∶0.5～10(g/ml)比例进行反应，反应溶剂及条件同步骤①，制得氨基修饰的磁性纳米粒子；
其中，所述的磁性纳米粒子为Fe3O4磁性纳米粒子，所述的硅烷试剂为正硅酸四乙酯或硅酸钠，所述的硅烷偶联剂为DB550、KH792或SG-Si900。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤①中所述的低级一元醇为甲醇或乙醇。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤①中所述的磁性纳米粒子与硅烷试剂的比例为1∶4～6(g/ml)，反应溶剂为体积比为1∶1的甲苯和甲醇混合溶液。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤①是在惰性气体保护下，搅拌并控温回流18～30小时进行硅胶包覆。
5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤②中所述的硅胶包覆的磁纳米粒子与硅烷偶联剂的比例为1∶2～4(g/ml)，反应溶剂为体积比为1∶1的甲苯和甲醇混合溶液。
6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤②是在惰性气体保护下，搅拌并控温回流18～30小时进行氨基修饰磁纳米粒子。
7.一种免疫磁性纳米分离试剂的制备方法，其包括权利要求1～6任一项所述的制备方法的步骤，然后将步骤②制得的氨基修饰的磁性纳米粒子进行活化后，与抗体或配体进行偶联反应。
8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于所述的活化包括将该制得的氨基修饰的磁性纳米粒子与活化剂戊二醛按比例1∶0.01～1(g/ml)，反应3～8小时。
9.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于所述的与抗体进行偶联反应包括将戊二醛活化后的磁性纳米粒子与抗体在-8～8℃下反应24～48h，并采用有机羧酸或生化试剂作为封闭试剂，并用清洗液清洗；其中清洗液为含有1w/v％NaN3、0.01M Tris、0.1w/v％BSA、0.15M NaCl和0.001M EDTA的水溶液。
10.如权利要求9所述的制备方法，其特征在于所述的戊二醛活化后的磁性纳米粒子与羊抗兔抗体按重量比1:0.025，在0℃反应36小时；所述的有机羧酸为甘氨酸，生化试剂为牛血清白蛋白。

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